GH蛋白誘導(dǎo)雞原代成肌細(xì)胞表達(dá)IGF1條件優(yōu)化
發(fā)布時(shí)間:2018-04-14 20:59
本文選題:雞成肌細(xì)胞 + 生長(zhǎng)激素(GH)蛋白。 參考:《農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào)》2017年03期
【摘要】:生長(zhǎng)激素(growth hormone,GH)具有促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育的作用,其通過(guò)內(nèi)分泌系統(tǒng)與生長(zhǎng)激素受體(growth hormone receptor,GHR)結(jié)合形成GH-GHR-IGF1信號(hào)通路,在組織和器官發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮功能。胰島素樣生長(zhǎng)因子1(insulin-like growth factor 1,IGF1)是一種生長(zhǎng)調(diào)節(jié)多肽,對(duì)動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育和生理調(diào)節(jié)有重要作用。為了確定體外培養(yǎng)條件下GH誘導(dǎo)雞成肌細(xì)胞表達(dá)IGF1的最佳添加方式和濃度,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)分離培養(yǎng)雞(Gallus gallus)原代成肌細(xì)胞,研究GH對(duì)下游IGF1 m RNA和蛋白質(zhì)表達(dá)的影響。實(shí)驗(yàn)選用孵化至11胚齡的雞胚,在無(wú)菌條件下分離其腿肌組織,通過(guò)機(jī)械法和差速貼壁法分離純化獲得雞原代成肌細(xì)胞。在此基礎(chǔ)上,分別在有血清和血清饑餓條件下,在培養(yǎng)液中添加不同濃度的GH(50,100,200和500 ng/m L)誘導(dǎo)培養(yǎng)3 h,收獲細(xì)胞,定量分析IGF1的表達(dá)變化。結(jié)果表明,體外培養(yǎng)條件下GH可以誘導(dǎo)雞成肌細(xì)胞表達(dá)IGF1 m RNA和蛋白質(zhì)。在相同的GH添加濃度下,IGF1在血清饑餓條件下的表達(dá)量高于有血清培養(yǎng)條件。尤其是在200 ng/m L添加濃度下,IGF1表達(dá)量極顯著高于有血清培養(yǎng)條件。研究結(jié)果表明,在血清饑餓培養(yǎng)條件下,200 ng/m L GH能夠誘導(dǎo)雞原代成肌細(xì)胞表達(dá)IGF1的量達(dá)到最高水平。本研究的開展為揭示GH-GHR-IGF1通路調(diào)控雞成肌細(xì)胞增殖和分化的機(jī)制提供了理論依據(jù),為研究肉雞骨骼肌發(fā)育提供了基本數(shù)據(jù)和資料。
[Abstract]:Growth hormone ( GH ) plays a role in promoting the growth and development of chicken . GH - GHR - IGF1 signal pathway is formed by combining endocrine system with growth hormone receptor ( GHR ) . The expression of IGF1 is higher than that in serum .
【作者單位】: 廣東海洋大學(xué)農(nóng)學(xué)院;華南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)部雞遺傳育種與繁殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(No.31672412和No.31301958) 農(nóng)業(yè)部雞遺傳育種與繁殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放項(xiàng)目
【分類號(hào)】:S831
【相似文獻(xiàn)】
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1 袁媛;史新娥;劉月光;楊公社;;高表達(dá)FoxO1抑制豬骨骼肌成肌細(xì)胞的分化[J];生物工程學(xué)報(bào);2010年12期
,本文編號(hào):1750991
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