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弓形蟲不同發(fā)育時(shí)期棒狀體頸部蛋白5基因的表達(dá)研究

發(fā)布時(shí)間:2018-04-11 15:49

  本文選題:弓形蟲 + 棒狀體頸部蛋白 ; 參考:《中國畜牧獸醫(yī)》2017年02期


【摘要】:為探究不同發(fā)育時(shí)期弓形蟲棒狀體頸部蛋白5(Toxoplasma gondii rhoptry neck protein 5,TgRON5)基因的表達(dá)情況與其毒力的相關(guān)性,本試驗(yàn)以Ⅱ型弓形蟲PRU蟲株作為研究對(duì)象,以弓形蟲管家基因ACT1作為內(nèi)參基因,分別對(duì)目的基因和內(nèi)參基因設(shè)計(jì)特異性引物,通過對(duì)各基因建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,確定二者擴(kuò)增效率的一致性后,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR相對(duì)定量法對(duì)弓形蟲4個(gè)不同發(fā)育時(shí)期(速殖子、緩殖子、未孢子化卵囊及孢子化卵囊)中TgRON5基因的表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)與分析。結(jié)果顯示,TgRON5基因在弓形蟲各發(fā)育時(shí)期均有表達(dá),其中,孢子化卵囊表達(dá)水平最高,未孢子化卵囊次之,速殖子較低,緩殖子最低,表明RON5蛋白的合成與分泌與蟲體入侵宿主細(xì)胞的侵襲力有著密切的關(guān)系。本研究結(jié)果為闡明TgRON5蛋白參與弓形蟲入侵的機(jī)理奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to investigate the relationship between the expression of 5(Toxoplasma gondii rhoptry neck protein 5 (TgRON5) gene and its virulence in different developmental stages of Toxoplasma gondii, the Toxoplasma gondii PRU strain was used as the research object, and the Toxoplasma steward gene ACT1 was used as the internal reference gene.Specific primers were designed for the target gene and the internal reference gene respectively. The standard curve of each gene was established to determine the consistency of the amplification efficiency of the two genes.The expression of TgRON5 gene in Toxoplasma gondii (Toxoplasma gondii) at four different developmental stages (tachyzoites, bradyzoites, unsporulated oocysts and sporocystified oocysts) was detected and analyzed by real-time fluorescence quantitative PCR relative quantitative method.The results showed that TgRON5 gene was expressed in all developmental stages of Toxoplasma gondii. Spore oocysts had the highest expression level, followed by unspore oocysts, lower tachyzoites and lowest bradyzoites.The results showed that the synthesis and secretion of RON5 protein were closely related to the invasiveness of host cells.The results laid a foundation for elucidating the mechanism of TgRON5 protein involved in Toxoplasma gondii invasion.
【作者單位】: 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院國家動(dòng)物寄生原蟲實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31302085)
【分類號(hào)】:R382.5;S852.7

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