本文選題：解淀粉芽孢桿菌　切入點(diǎn)：肉雞　出處：《華南農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：為尋找新型飼料添加劑,減少抗生素濫用帶來的危害,本試驗(yàn)擬從雞腸道中篩選出可作為雞的益生菌芽孢桿菌,開展本試驗(yàn)。試驗(yàn)一:雞源芽孢桿菌的篩選和鑒定:在無菌條件下從一只健康肉雞內(nèi)臟中取出約1 cm回腸樣,經(jīng)10 ml滅菌生理鹽水洗去內(nèi)容物;回腸樣轉(zhuǎn)入含500μl 0.016%二硫基蘇糖醇(DTT)的1.5 ml的離心管中,渦旋15 min以洗下小腸粘膜上的細(xì)菌;離心取上清液;上清液經(jīng)熱處理(65℃,45 min)以殺死細(xì)菌營養(yǎng)體,后以MH平板分離出芽孢菌。上述芽孢菌液接入20 ml MH肉湯培養(yǎng)24 h,離心所得菌體分別經(jīng)模擬胃液和模擬小腸液處理12 h以選出耐受菌;耐受菌經(jīng)DSM液培養(yǎng)促進(jìn)芽孢生成,經(jīng)熱處理(65℃,45 min)后涂布于MH平板以選出多株耐受模擬胃液和模擬小腸液的芽孢菌。上述多株芽孢菌進(jìn)一步經(jīng)LBST瓊脂和含指標(biāo)菌(大腸桿菌E.coli K88)的MH瓊脂的檢測,篩選出淀粉酶、蛋白酶和抗菌物質(zhì)的外泌能力均最強(qiáng)的一株芽孢桿菌,并以16SrDNA分子生物學(xué)分類法確認(rèn)其種屬屬性。從耐受模擬胃液和模擬小腸液的53株芽孢菌中,分別經(jīng)53孔的LBST瓊脂平板、酪蛋白瓊脂平板和含指示菌(大腸桿菌E.coli K88)的MH瓊脂平板的檢測,篩選出淀粉酶、蛋白酶和抗菌物質(zhì)的外泌能力均較強(qiáng)的一株芽孢桿菌(編號(hào)為Y);經(jīng)16S rDNA分子生物學(xué)分類法鑒定,此株菌為解淀粉芽孢桿菌,被命名為解淀粉芽孢桿菌Y。試驗(yàn)二:芽孢桿菌篩選株對(duì)肉雞的飼用效果試驗(yàn):600只11日齡麻黃公雞,隨機(jī)分成4個(gè)飼糧組,每組3個(gè)重復(fù),每重復(fù)50只,分3個(gè)生長階段(11~21日齡、22~42日齡和43~70日齡)開展飼養(yǎng)試驗(yàn)。對(duì)于每個(gè)生長階段,4組雞分別飼喂4種試驗(yàn)飼糧(粉料);試驗(yàn)雞自由采食飲水,每天24 h維持光照。對(duì)于每生長階段,4種試驗(yàn)飼糧的組成分別為:基礎(chǔ)飼糧;基礎(chǔ)飼糧+芽孢菌預(yù)混劑(10 mg.kg-1)(1×106CFU/g);基礎(chǔ)飼糧+芽孢菌預(yù)混劑(100 mg.kg-1)(1×107 CFU/g);基礎(chǔ)飼糧+芽孢菌預(yù)混劑(1000 mg.kg-1)(1×10~8 CFU/g)。對(duì)每生長階段,測定各組生產(chǎn)性能指標(biāo)。在最后生長階段的結(jié)束時(shí),從各組中采血清測定其生化指標(biāo),采小腸樣測定小腸絨毛結(jié)構(gòu)指標(biāo),采盲腸內(nèi)容物測定盲腸微生物指標(biāo)。在肉雞生長的各個(gè)階段,總體上,解淀粉芽孢桿菌顯著性提高了肉雞的總增重、平均日采食量和平均日增重(P0.05),降低了耗料增重比和死亡率(P0.05),有促進(jìn)肉雞生長性能的作用。血清的總蛋白、白蛋白和球蛋白隨著芽孢添加量的增加而增加(P0.05);血清的尿素氮、脂多糖和丙二醛隨著芽孢添加量的增加而降低(P0.05)。對(duì)于空腸,各組的隱窩深度CD差異不顯著(P0.05),但絨毛高度VH和VH/CD值均隨著芽孢添加量增加而增加;對(duì)于回腸,絨毛高度VH和VH/CD值均隨著芽孢添加量增加而增加,其中1000組均顯著高于對(duì)照組(P0.05);而隱窩深度CD隨著芽孢添加量增加而降低(P0.05)。盲腸內(nèi)容物大腸桿菌數(shù)隨芽孢添加量增加而降低(P0.05);乳酸菌數(shù)隨芽孢添加量增加而增加(P0.05);因而,乳酸桿菌/大腸桿菌值隨芽孢添加量增加而增加,其中1000組顯著高于對(duì)照組(P0.05)。結(jié)論:1、從健康雞腸道中可分離出耐65℃高溫、耐模擬胃液、耐模擬腸液、能產(chǎn)淀粉酶、蛋白酶和抑菌物質(zhì)的解淀粉芽孢桿菌。2、飼糧中添加解淀粉芽孢桿菌Y 10~8CFU/g時(shí),可改善腸道菌群和小腸絨毛結(jié)構(gòu),提高肉雞的抗氧化能力、飼料轉(zhuǎn)化率和采食量,從而可促進(jìn)肉雞生長。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S831.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1709264