本文選題：肉雞　切入點：脂聯(lián)素　出處：《西北農(nóng)林科技大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：本研究通過構(gòu)建雞骨骼肌細胞氧化應(yīng)激模型,探討脂聯(lián)素在p53、溶酶體、線粒體等的參與下,對肉雞骨骼肌細胞氧化損傷的修復(fù)機制,為肉雞抗應(yīng)激高效養(yǎng)殖提供依據(jù)。試驗結(jié)果如下:1分離培養(yǎng)肉雞骨骼肌衛(wèi)星細胞并鑒定,過氧化氫處理構(gòu)建肉雞骨骼肌氧化應(yīng)激模型,分析氧化應(yīng)激和細胞活力相關(guān)指標(biāo)。結(jié)果表明:(1)DESMIN免疫熒光鑒定培養(yǎng)獲得的細胞為骨骼肌衛(wèi)星細胞;(2)H2O2處理獲得的衛(wèi)星細胞,ROS、MDA含量水平和TUNEL染色細胞凋亡率顯著升高,細胞活力、SOD和GSH-Px酶活力單位顯著降低(P0.05),表明過氧化氫處理構(gòu)建的骨骼肌衛(wèi)星細胞氧化應(yīng)激模型成功。2脂聯(lián)素處理肉雞骨骼肌氧化應(yīng)激模型衛(wèi)星細胞,分析細胞內(nèi)溶酶體和線粒體指標(biāo)的變化。結(jié)果表明:(1)脂聯(lián)素處理組細胞ROS、MDA含量水平和凋亡率顯著降低,細胞活力、SOD和GSH-Px酶活力單位顯著升高(P0.05);(2)脂聯(lián)素處理組顯著改善溶酶體和線粒體的膜通透性,Bax、Cyt-c、Caspase 8、Cathepsin B、Chymosin基因和蛋白水平均顯著降低,Bcl-2基因和蛋白水平顯著升高(P0.05)。表明脂聯(lián)素通過改善細胞溶酶體和線粒體功能來修復(fù)骨骼肌細胞的氧化損傷。3 p53抑制劑PFT-α與脂聯(lián)素共同處理氧化應(yīng)激模型細胞,研究p53參與脂聯(lián)素修復(fù)氧化應(yīng)激的機制。結(jié)果表明:與脂聯(lián)素處理氧化應(yīng)激模型組相比,(1)PFT-α進一步顯著降低了細胞ROS、MDA含量水平和TUNEL凋亡率,促進細胞活力、SOD和GSH-Px酶活力提高(P0.05);(2)PFT-α改善溶酶體和線粒體的膜通透性,抑制Bax、Cyt-c、Caspase 8、Cathepsin B、Chymosin基因和蛋白表達水平,促進Bcl-2基因和蛋白表達(P0.05)。抑制p53表達,可進一步促進脂聯(lián)素修復(fù)骨骼肌細胞氧化損傷的作用。綜上所述,脂聯(lián)素可通過抑制p53的表達,改善細胞溶酶體和線粒體膜通透性、恢復(fù)膜電位、抑制凋亡基因和蛋白的表達、以及細胞凋亡進程等途徑,修復(fù)肉雞骨骼肌細胞的氧化損傷。
[Abstract]:In this study, the oxidative stress model of chicken skeletal muscle cells was established to explore the repair mechanism of oxidative damage of skeletal muscle cells induced by adiponectin with the participation of p53, lysosome and mitochondria, so as to provide evidence for anti-stress and high-efficiency breeding of broilers.The results were as follows: firstly, the skeletal muscle satellite cells of broilers were isolated and identified. The oxidative stress model of broiler skeletal muscle was constructed by hydrogen peroxide treatment, and the related indexes of oxidative stress and cell viability were analyzed.Sod and GSH-Px activity units significantly decreased P0.05, which indicated that oxidative stress model of skeletal muscle satellite cells constructed by hydrogen peroxide treatment was successfully treated with adiponectin in broiler skeletal muscle oxidative stress model satellite cells.The changes of intracellular lysosomes and mitochondria were analyzed.The results showed that the content of MDA and apoptosis rate of ROSN in adiponectin treated group were significantly lower than those in control group.It is suggested that adiponectin can repair oxidative damage of skeletal muscle cells by improving the function of lysosome and mitochondria. 3. PFT- 偽, a p53 inhibitor, co-treated oxidative stress model cells with adiponectin, and studied the mechanism of p53 involved in the repair of oxidative stress by adiponectin.The results showed that compared with adiponectin treated oxidative stress model group, PFT- 偽 further decreased the content of rosid and TUNEL apoptosis, and promoted the activity of sod and GSH-Px. P0.05PFT- 偽 improved the membrane permeability of lysosomes and mitochondria.The expression level of Chymosin gene and protein was inhibited and the expression of Bcl-2 gene and protein was promoted by inhibiting the expression of Caspase 8 and Cathepsin Chymosin, and promoting the expression of Bcl-2 gene and protein.Inhibition of p53 expression could further promote the effect of adiponectin on the repair of oxidative injury of skeletal muscle cells.In conclusion, adiponectin can inhibit the expression of p53, improve the permeability of lysosome and mitochondria, restore membrane potential, inhibit the expression of apoptotic genes and proteins, and the process of apoptosis.Repair oxidative damage of skeletal muscle cells in broilers.
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S831

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