本文選題：水泡性口炎病毒　切入點：M蛋白　出處：《吉林大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：水泡性口炎(Vesicular stomatitis,VS)是由水泡性口炎病毒(Vesicu1ar stomatitis virus,VSV)感染而引起的一類人畜共患傳染病,是一類具有高度接觸性的傳染病。該病作為一種蟲媒性傳染病,患病動物、隱形帶毒者、庫蚊都是主要的傳播者和帶毒者,主要通過唾液以及水泡液排到外環(huán)境中,也可在體內(nèi)發(fā)生經(jīng)卵傳遞。臨床上,可感染多種哺乳動物,以在感染動物的口腔、唇部、舌、乳頭以及感染動物的蹄冠等部位黏膜或皮膚出現(xiàn)水泡性口炎病變?yōu)樘卣?此外,還能夠引起感染動物腦膜腦炎的發(fā)生,出現(xiàn)明顯的神經(jīng)癥狀。人也可偶爾感染,出現(xiàn)流感樣癥狀,有時甚至?xí)鸩《拘阅X炎。由此可見,水泡性口炎具有重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義,其不僅對養(yǎng)殖業(yè)會造成一定的損失,而且對于人類的健康也存在一定的威脅。水泡性口炎的癥狀與一些疾病極為相似,比如:口蹄疫(FMD)、豬水皰疹病(VES)、豬水泡病(SVD)等,臨床上很容易造成誤診,并很可能導(dǎo)致疾病的擴散。因此,臨床上針對該類疾病的類癥鑒別診斷具有重要的意義。目前,盡管存在許多檢測VSV的方法,但傳統(tǒng)的一些方法存在操作比較復(fù)雜、檢測周期長、不利于臨床的快速檢測等缺點,而一些分子生物學(xué)方法雖然檢測周期短且較為敏感,但是需要專業(yè)的實驗設(shè)備以及專業(yè)的檢測人員,而且有些方法極易出現(xiàn)假陽性結(jié)果造成誤診。雙抗體夾心ELISA檢測方法克服了傳統(tǒng)檢測方法的一些弊端,具有操作簡便、檢測周期短結(jié)果穩(wěn)定的特點;同時,該方法敏感性良好,特異性高,能夠達到分子生物學(xué)的檢測水平,而且該方法不需要專業(yè)的實驗設(shè)備及較高的實驗條件,比分子生物學(xué)檢測技術(shù)更適合臨床大規(guī)模的檢測,所以雙抗體夾心ELISA檢測方法在獸醫(yī)臨床上受到越來越廣泛的應(yīng)用。在本實驗中,我們以實驗室前期制備的VSV單克隆抗體作為捕獲抗體,以制備的兔抗VSV-M蛋白多克隆抗體作為檢測抗體,建立VSV-M蛋白雙抗體夾心ELISA檢測方法。通過對ELISA檢測方法條件的優(yōu)化,建立最優(yōu)的VSV-M蛋白雙抗體夾心ELISA檢測方法,并對該方法的靈敏性、特異性、重復(fù)性以及符合率等性能進行評價,結(jié)果顯示:該方法靈敏性高,最低可檢測2.5μg/m L的病毒;特異性強,在檢測VSV、SVDV、FMDV、ORFV時,僅VSV檢測結(jié)果顯示為陽性,其余三種病毒檢測結(jié)果均顯示為陰性;重復(fù)性檢測結(jié)果顯示,該檢測方法的重復(fù)性變異系數(shù)小于10%;符合率測定結(jié)果顯示,該方法與RT-PCR方法的符合率為97%。以上結(jié)果表明,本試驗所建立的VSV-M蛋白雙抗體夾心ELISA檢測方法具有靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好等優(yōu)點。之后,我們應(yīng)用該方法對采集自吉林省農(nóng)安、松原等地區(qū)牛群中200份�？谇皇米舆M行檢測,同時以RT-PCR檢測方法進行對比驗證,結(jié)果顯示,臨床采集的200份�？谇皇米訕颖镜臋z測結(jié)果均為陰性,該結(jié)果與RT-PCR檢測結(jié)果一致。因此,VSV-M蛋白雙抗體夾心ELISA檢測方法的建立將為水泡性口炎的預(yù)警、預(yù)報及防控提供技術(shù)支撐,進而產(chǎn)生潛在的經(jīng)濟和社會效益。
[Abstract]:Vesicular stomatitis (Vesicular stomatitis VS) is composed of vesicular stomatitis virus (Vesicu1ar stomatitis, virus, VSV) infection caused by a zoonotic disease, is a highly contagious disease. The disease is a kind of insect borne infectious diseases, the prevalence of animal, stealth virus, Culex are the main disseminators and carriers, mainly through saliva and blisters to external environment, but also transovarial transmission occurs in vivo. Clinically, it can infect mammals, in infected animal mouth, lips, tongue, nipple and infected animal Coronet and other parts of mucosal or skin to appear the characteristics of vesicular stomatitis disease; in addition, can also cause infection animal meningoencephalitis, obvious neurological symptoms. People can also occasionally infections, flu like symptoms, sometimes even cause viral encephalitis. Thus, vesicular stomatitis 鍏鋒湁閲嶈鐨勫叕鍏卞崼鐢熷鎰忎箟,鍏朵笉浠呭鍏繪畺涓氫細閫犳垚涓，

本文編號：1692735