本文選題：水泡性口炎病毒　切入點(diǎn)：M蛋白　出處：《吉林大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：水泡性口炎(Vesicular stomatitis,VS)是由水泡性口炎病毒(Vesicu1ar stomatitis virus,VSV)感染而引起的一類人畜共患傳染病,是一類具有高度接觸性的傳染病。該病作為一種蟲媒性傳染病,患病動(dòng)物、隱形帶毒者、庫蚊都是主要的傳播者和帶毒者,主要通過唾液以及水泡液排到外環(huán)境中,也可在體內(nèi)發(fā)生經(jīng)卵傳遞。臨床上,可感染多種哺乳動(dòng)物,以在感染動(dòng)物的口腔、唇部、舌、乳頭以及感染動(dòng)物的蹄冠等部位黏膜或皮膚出現(xiàn)水泡性口炎病變?yōu)樘卣?此外,還能夠引起感染動(dòng)物腦膜腦炎的發(fā)生,出現(xiàn)明顯的神經(jīng)癥狀。人也可偶爾感染,出現(xiàn)流感樣癥狀,有時(shí)甚至?xí)鸩《拘阅X炎。由此可見,水泡性口炎具有重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義,其不僅對(duì)養(yǎng)殖業(yè)會(huì)造成一定的損失,而且對(duì)于人類的健康也存在一定的威脅。水泡性口炎的癥狀與一些疾病極為相似,比如:口蹄疫(FMD)、豬水皰疹病(VES)、豬水泡病(SVD)等,臨床上很容易造成誤診,并很可能導(dǎo)致疾病的擴(kuò)散。因此,臨床上針對(duì)該類疾病的類癥鑒別診斷具有重要的意義。目前,盡管存在許多檢測(cè)VSV的方法,但傳統(tǒng)的一些方法存在操作比較復(fù)雜、檢測(cè)周期長(zhǎng)、不利于臨床的快速檢測(cè)等缺點(diǎn),而一些分子生物學(xué)方法雖然檢測(cè)周期短且較為敏感,但是需要專業(yè)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備以及專業(yè)的檢測(cè)人員,而且有些方法極易出現(xiàn)假陽性結(jié)果造成誤診。雙抗體夾心ELISA檢測(cè)方法克服了傳統(tǒng)檢測(cè)方法的一些弊端,具有操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)周期短結(jié)果穩(wěn)定的特點(diǎn);同時(shí),該方法敏感性良好,特異性高,能夠達(dá)到分子生物學(xué)的檢測(cè)水平,而且該方法不需要專業(yè)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備及較高的實(shí)驗(yàn)條件,比分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)更適合臨床大規(guī)模的檢測(cè),所以雙抗體夾心ELISA檢測(cè)方法在獸醫(yī)臨床上受到越來越廣泛的應(yīng)用。在本實(shí)驗(yàn)中,我們以實(shí)驗(yàn)室前期制備的VSV單克隆抗體作為捕獲抗體,以制備的兔抗VSV-M蛋白多克隆抗體作為檢測(cè)抗體,建立VSV-M蛋白雙抗體夾心ELISA檢測(cè)方法。通過對(duì)ELISA檢測(cè)方法條件的優(yōu)化,建立最優(yōu)的VSV-M蛋白雙抗體夾心ELISA檢測(cè)方法,并對(duì)該方法的靈敏性、特異性、重復(fù)性以及符合率等性能進(jìn)行評(píng)價(jià),結(jié)果顯示:該方法靈敏性高,最低可檢測(cè)2.5μg/m L的病毒;特異性強(qiáng),在檢測(cè)VSV、SVDV、FMDV、ORFV時(shí),僅VSV檢測(cè)結(jié)果顯示為陽性,其余三種病毒檢測(cè)結(jié)果均顯示為陰性;重復(fù)性檢測(cè)結(jié)果顯示,該檢測(cè)方法的重復(fù)性變異系數(shù)小于10%;符合率測(cè)定結(jié)果顯示,該方法與RT-PCR方法的符合率為97%。以上結(jié)果表明,本試驗(yàn)所建立的VSV-M蛋白雙抗體夾心ELISA檢測(cè)方法具有靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。之后,我們應(yīng)用該方法對(duì)采集自吉林省農(nóng)安、松原等地區(qū)牛群中200份牛口腔拭子進(jìn)行檢測(cè),同時(shí)以RT-PCR檢測(cè)方法進(jìn)行對(duì)比驗(yàn)證,結(jié)果顯示,臨床采集的200份�？谇皇米訕颖镜臋z測(cè)結(jié)果均為陰性,該結(jié)果與RT-PCR檢測(cè)結(jié)果一致。因此,VSV-M蛋白雙抗體夾心ELISA檢測(cè)方法的建立將為水泡性口炎的預(yù)警、預(yù)報(bào)及防控提供技術(shù)支撐,進(jìn)而產(chǎn)生潛在的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。
[Abstract]:Vesicular stomatitis (Vesicular stomatitis VS) is composed of vesicular stomatitis virus (Vesicu1ar stomatitis, virus, VSV) infection caused by a zoonotic disease, is a highly contagious disease. The disease is a kind of insect borne infectious diseases, the prevalence of animal, stealth virus, Culex are the main disseminators and carriers, mainly through saliva and blisters to external environment, but also transovarial transmission occurs in vivo. Clinically, it can infect mammals, in infected animal mouth, lips, tongue, nipple and infected animal Coronet and other parts of mucosal or skin to appear the characteristics of vesicular stomatitis disease; in addition, can also cause infection animal meningoencephalitis, obvious neurological symptoms. People can also occasionally infections, flu like symptoms, sometimes even cause viral encephalitis. Thus, vesicular stomatitis 鍏鋒湁閲嶈鐨勫叕鍏卞崼鐢熷鎰忎箟,鍏朵笉浠呭鍏繪畺涓氫細(xì)閫犳垚涓，

本文編號(hào)：1692735