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牛副流感3型病毒Nano-PCR、LAMP方法的建立及初步應(yīng)用

發(fā)布時間:2018-03-29 16:49

  本文選題:牛副流感型病毒(BPIV) 切入點:Nano-PCR 出處:《中國畜牧獸醫(yī)》2017年10期


【摘要】:試驗旨在建立牛副流感3型病毒(bovine parainfluenza type-3 virus,BPIV3)納米PCR(Nano-PCR)與環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增技術(shù)(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)新型快速分子檢測技術(shù),對其進(jìn)行特異性和敏感性對比試驗,并對10份臨床樣品進(jìn)行了檢測。特異性與敏感性試驗結(jié)果顯示,建立的Nano-PCR和LAMP方法只對BPIV3特異,而對牛呼吸道合胞體病毒、牛傳染性鼻氣管炎病毒、牛病毒性腹瀉病毒無交叉反應(yīng);建立的Nano-PCR和LAMP方法具有相同的敏感性,均是普通PCR的10倍,最低核酸檢出量均為4.16×102拷貝/μL。臨床檢測結(jié)果顯示,建立的兩種方法陽性符合率為100%,且陽性檢出率均高于普通PCR。因此,本試驗建立的Nano-PCR和LAMP方法為BPIV3的臨床診斷提供了更快速、敏感、可靠的工具。
[Abstract]:The aim of this study was to establish a novel rapid molecular detection technique for bovine parainfluenza virus parainfluenza type-3 virus (BPIV3) and loop mediated isothermal amplification technique (loop-mediated isothermal amplification LAMPP), and to compare its specificity and sensitivity. The specificity and sensitivity tests showed that the established Nano-PCR and LAMP methods were only specific to BPIV3, but to bovine respiratory syncytial virus and bovine infectious rhinotracheitis virus. There was no cross reaction between bovine viral diarrhea virus (BVDV), and the sensitivity of Nano-PCR and LAMP was the same, which was 10 times of that of normal PCR, and the lowest detection amount of nucleic acid was 4.16 脳 10 ~ 2 copies / 渭 L. The positive coincidence rate of the two methods was 100, and the positive rate was higher than that of normal PCR.Therefore, the Nano-PCR and LAMP methods established in this experiment provide a more rapid, sensitive and reliable tool for the clinical diagnosis of BPIV3.
【作者單位】: 東北農(nóng)業(yè)大學(xué);中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所農(nóng)業(yè)部經(jīng)濟(jì)動物疫病重點實驗室;安圖縣畜牧獸醫(yī)總站;
【基金】:國家重點研發(fā)計劃:畜禽重大疫病防控于高效安全養(yǎng)殖綜合技術(shù)研發(fā)(2016YFD0500907) 吉林省科技廳重點科技成果轉(zhuǎn)化項目(20150307024NY) 吉林省科技廳產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新戰(zhàn)略聯(lián)盟項目(20170309002NY)
【分類號】:S852.653

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本文編號:1681996

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