本文選題：云南半細(xì)毛羊　切入點(diǎn)：毛囊干細(xì)胞　出處：《西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》2017年04期

【摘要】：【目的】研究云南半細(xì)毛羊毛囊干細(xì)胞(Hair follicle stem cells,HFSCs)的分離培養(yǎng)方法�！痉椒ā坑媒M織塊法原代培養(yǎng)云南半細(xì)毛羊HFSCs,并進(jìn)行細(xì)胞純化和傳代培養(yǎng),培養(yǎng)液為無血清培養(yǎng)液DMEM/F12+40ng/mL bFGF+20ng/mL EGF+20μL/mL B27+100IU/mL青霉素+100IU/mL鏈霉素。對(duì)建立的細(xì)胞系進(jìn)行免疫組化、RT-PCR和流式細(xì)胞術(shù)鑒定。【結(jié)果】HFSCs體積小,為貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞,呈典型的鋪路石狀,核質(zhì)比高,在倒置顯微鏡下胞體透亮、折光性強(qiáng)。RT-PCR分析表明,HFSCs表達(dá)K14、K19和β1-integrin,但是不表達(dá)CD271和nestin。免疫組化分析結(jié)果表明,HFSCs表達(dá)K14,不表達(dá)CD271。流式細(xì)胞術(shù)鑒定表明,HFSCs表達(dá)K14,陽(yáng)性率為93.5%;不表達(dá)CD271�！窘Y(jié)論】建立了云南半細(xì)毛羊HSFCs無血清體外培養(yǎng)技術(shù)體系。
[Abstract]:[objective] to study the method of isolation and culture of hair follicle stem cells (Hair follicle stem cells) of Yunnan semi-fine wool sheep. [methods] the primary culture of Yunnan semi-fine wool sheep was carried out by tissue block method, and the cells were purified and subcultured. The culture medium was DMEM/F12 40ng/mL bFGF 20ng/mL EGF 20 渭 L/mL B27 100IU/mL penicillin 100IU/mL streptomycin. The established cell lines were identified by immunohistochemistry RT-PCR and flow cytometry. [results] HFSCs was a small, adherent growth cell, and had typical paving stone shape. The ratio of nucleus to cytoplasm is high, and the cell body is bright under inverted microscope. The results of immunocytochemical analysis showed that HSCs expressed K14 K14 and 尾 1-integrin, but not CD271 and Neisin. The results of immunohistochemical analysis showed that HSCs expressed K14 and CD271. Flow cytometry showed that HSCs expressed K14 with a positive rate of 93.50.Conclusion the expression of CD271was established. HSFCs serum-free culture technique system of South semi-fine wool sheep in vitro.
【作者單位】： 云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院;
【基金】：國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)項(xiàng)目(CARS-40) 云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究青年項(xiàng)目(2012FD083)
【分類號(hào)】：S826

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本文編號(hào)：1672134