本文選題：豬傳染性胃腸炎病毒　切入點(diǎn)：N蛋白　出處：《中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年03期

【摘要】：為建立豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)的原位檢測(cè)方法,本研究以TGEV N蛋白的單克隆抗體為一抗,羊抗小鼠IgG-HRP為二抗,AEC過(guò)氧化物酶底物為顯色液,建立了TGEV的免疫過(guò)氧化物酶單層細(xì)胞試驗(yàn)(IPMA)檢測(cè)方法。檢測(cè)結(jié)果顯示,一抗的最佳使用濃度為0.5 ng/μL,二抗的最佳稀釋倍數(shù)為1∶2 000倍,經(jīng)AEC顯色,TGEV感染的陽(yáng)性細(xì)胞呈紅棕色;對(duì)常見的豬流行性腹瀉病毒、豬輪狀病毒和豬圓環(huán)病毒2型等豬病病原檢測(cè)均為陰性,具有良好特異性;同時(shí)該方法能夠在普通顯微鏡下觀察到病毒在細(xì)胞中的分布情況。本研究建立的方法為TGEV的實(shí)驗(yàn)室鑒定及TGEV在感染細(xì)胞中的定位和動(dòng)態(tài)分布提供有效的檢測(cè)手段。
[Abstract]:In order to establish an in situ detection method for porcine transmissible gastroenteritis virus (TGEV), the monoclonal antibody against TGEV N protein was used as the first antibody and the goat anti mouse IgG-HRP as the second antibody to AEC peroxidase substrate as the chromogenic fluid. A method for the detection of TGEV by immunoperoxidase monolayer assay was established. The results showed that the best concentration of the first antibody was 0.5 ng/ 渭 L, the best dilution multiple of the second antibody was 1:2 000 times, and the positive cells infected by AEC were reddish brown. The detection of common porcine epidemic diarrhea virus, porcine rotavirus and porcine circovirus type 2 were negative and had good specificity. At the same time, this method can observe the distribution of virus in the cells under the ordinary microscope. The method established in this study provides an effective method for the laboratory identification of TGEV and the localization and dynamic distribution of TGEV in infected cells.
【作者單位】： 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所獸醫(yī)生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/豬消化道團(tuán)隊(duì);
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31172350、31572541、31502092) 國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室資助項(xiàng)目(SKLVBP2015005)
【分類號(hào)】：S852.65

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本文編號(hào)：1670238