地克珠利對柔嫩艾美耳球蟲SAG4表達(dá)的影響
本文選題:地克珠利 切入點:柔嫩艾美耳球蟲 出處:《中國獸醫(yī)科學(xué)》2017年07期
【摘要】:建立地克珠利抗柔嫩艾美耳球蟲感染雞動物模型,收集獲得柔嫩艾美耳球蟲第2代裂殖子,采用PCR擴增柔嫩艾美耳球蟲第2代裂殖子SAG4基因不含N端信號肽的編碼序列,構(gòu)建p ET-28a-SAG4表達(dá)質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化至BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞,用IPTG誘導(dǎo)表達(dá)融合蛋白,鎳親和層析柱法純化蛋白,通過免疫BALB/c小鼠制備SAG4抗血清。用Real-time PCR檢測SAG4 m RNA的表達(dá),用Western-blot和免疫熒光技術(shù)檢測SAG4蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果顯示,p ET-28a-SAG4表達(dá)的重組蛋白為可溶性蛋白,地克珠利顯著降低了柔嫩艾美耳球蟲第2代裂殖子SAG4基因m RNA和蛋白的表達(dá)。這提示SAG4基因可能與地克珠利抗球蟲作用相關(guān),這將為地克珠利抗球蟲作用機理的闡述提供理論依據(jù)。
[Abstract]:A chicken model of resistance to Eimeria tenella infection was established. The second generation merozoite of Eimeria tenella was collected and amplified by PCR. The SAG4 gene of the second generation of Eimeria tenella was amplified without N-terminal signal peptide. The expression plasmid of p ET-28a-SAG4 was constructed and transformed into BL21DDE3) competent cells. The fusion protein was induced by IPTG and purified by nickel affinity chromatography. The antiserum of SAG4 was prepared by immunizing BALB/c mice. The expression of SAG4 m RNA was detected by Real-time PCR. Western-blot and immunofluorescence techniques were used to detect the expression of SAG4 protein. The results showed that the recombinant protein expressed by ET-28a-SAG4 was soluble protein. The expression of m RNA and protein in the second generation of merozoite of Eimeria tenella was significantly reduced by Dikjul, which suggested that the SAG4 gene might be related to the anti-coccidiosis effect of Dichulide. This will provide a theoretical basis for the exposition of the anti-coccidiosis mechanism.
【作者單位】: 河南科技大學(xué)動物科技學(xué)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(31472238,31101855)
【分類號】:S852.723
【相似文獻】
相關(guān)期刊論文 前10條
1 王凱;王建軍;郭玉廣;張學(xué)民;;雞柔嫩艾美耳球蟲病的發(fā)病機制[J];中國畜牧獸醫(yī)文摘;2011年01期
2 ;馬杜霉素水溶劑抗雞柔嫩艾美耳球蟲[J];四川畜禽;1996年02期
3 朱引潔,丁熙成;微球克對雞柔嫩艾美耳球蟲的預(yù)防效果試驗[J];中國獸醫(yī)雜志;2001年10期
4 史喜菊,鄭明學(xué),高建廣,韓春來,劉美麗;雞柔嫩艾美耳球蟲病流行病學(xué)研究進展[J];山西農(nóng)業(yè)科學(xué);2001年01期
5 金嶺梅 ,孟新宇 ,趙枝新 ,趙其平 ,王米 ,鐘允安;抗柔嫩艾美耳球蟲植物性制劑效力篩選試驗[J];中國飼料;2003年23期
6 顧有方,朱桂蘭;地克珠利抗柔嫩艾美耳球蟲鳳陽地理株的效果觀察[J];畜牧與獸醫(yī);2003年03期
7 明慶磊,程超,朱必才,胡孝忠;柔嫩艾美耳球蟲早熟株的選育及其免疫原性研究[J];徐州師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2003年03期
8 楊世華,余澤平,劉麗貞;不同藥物治療不同感染時期的雞柔嫩艾美耳球蟲病效果試驗[J];江西畜牧獸醫(yī)雜志;2004年01期
9 王天奇,范文利,董發(fā)明,龍塔,張玲;中藥煎劑抗雞柔嫩艾美耳球蟲的效果研究[J];中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志;2005年02期
10 金嶺梅,鐘允安,孟新宇,趙枝新;柔嫩艾美耳球蟲感染對肉仔雞糞便水分的影響[J];家畜生態(tài)學(xué)報;2005年03期
相關(guān)會議論文 前10條
1 鄭明學(xué);范運峰;韓克光;古少鵬;;細(xì)胞鈣超載與雞柔嫩艾美耳球蟲病損傷關(guān)系[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)病理學(xué)分會第十六次學(xué)術(shù)研討會、中國病理生理學(xué)會動物病理生理專業(yè)委員會第十五次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年
2 王天奇;董發(fā)明;龍塔;張玲;;中藥煎劑抗雞柔嫩艾美耳球蟲的效果研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜寄生蟲學(xué)分會第五次代表大會暨第八次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2004年
3 安健;王黎霞;陳雪;趙忠才;孫素芳;蔣民;;15種中藥粉劑對柔嫩艾美耳球蟲的控制效果[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)病理學(xué)分會第十五次、中國病理生理學(xué)會動物病生專業(yè)委員會第十四次學(xué)術(shù)討論會論文集[C];2007年
4 顏彥;韓紅玉;黃兵;姜連連;董輝;趙其平;;柔嫩艾美耳球蟲小熱激蛋白基因的克隆與表達(dá)[A];全國寄生蟲學(xué)與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年
5 曾明華;張祝明;;4株柔嫩艾美耳球蟲耐藥性檢測[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)藥理毒理學(xué)分會第九次學(xué)術(shù)討論會論文與摘要集[C];2006年
6 李佩國;張香齋;李蘊玉;賈青輝;;復(fù)方中草藥對感染柔嫩艾美耳球蟲肉仔雞血清中尿酸、肌酐的影響[A];全國動物生理生化第九次學(xué)術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2006年
7 李佩國;張香齋;李蘊玉;賈青輝;;復(fù)方中草藥對感染柔嫩艾美耳球蟲的肉仔雞血清中若干抗氧化指標(biāo)的影響[A];全國動物生理生化第九次學(xué)術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2006年
8 李建梅;劉梅;沈欣悅;程旭;殷建玫;尤素蘭;蘇一軍;戴亞斌;陶建平;;八個品種雞對柔嫩艾美耳球蟲的易感性研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家禽學(xué)分會第九次代表會議暨第十六次全國家禽學(xué)術(shù)討論會論文集[C];2013年
9 包永占;秦建華;馬志平;劉迎;史萬玉;鐘秀會;;“禽球靈”對柔嫩艾美耳球蟲感染雛雞血液生理指標(biāo)的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜寄生蟲學(xué)分會第六次代表大會暨第十次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年
10 馬衛(wèi)嬌;韓紅玉;黃兵;姜連連;董輝;程軍;趙其平;朱順海;曾艷波;;柔嫩艾美耳球蟲表面抗原基因的初步研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會禽病學(xué)分會第十五次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年
相關(guān)博士學(xué)位論文 前6條
1 武斌;柔嫩艾美耳球蟲病毒全基因組序列測定及轉(zhuǎn)染載體的構(gòu)建[D];吉林大學(xué);2016年
2 李佩國;河北省雞柔嫩艾美耳球蟲地方株的耐藥性檢測[D];吉林大學(xué);2010年
3 劉立恒;柔嫩艾美耳球蟲比較蛋白組及免疫蛋白組研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年
4 劉任強;柔嫩艾美耳球蟲組織蛋白酶B和L的生物學(xué)特性研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年
5 張德福;氫溴酸常山酮抗柔嫩艾美耳球蟲作用研究[D];浙江大學(xué);2012年
6 趙娜;柔嫩艾美耳球蟲端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶互作蛋白的篩選及功能研究[D];吉林大學(xué);2015年
相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條
1 翟頎;柔嫩艾美耳球蟲兩個保守蛋白的初步研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年
2 左云云;柔嫩艾美耳球蟲組蛋白去乙;窼ir2克隆表達(dá)及表達(dá)動態(tài)分析[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年
3 林雨鑫;京海黃雞柔嫩艾美耳球蟲感染后盲腸轉(zhuǎn)錄組分析及其雜交配套系親本的抗性評價[D];揚州大學(xué);2015年
4 馬慶濤;青蒿素與DVD聯(lián)合用藥對雞柔嫩艾美耳球蟲感染的療效研究[D];揚州大學(xué);2015年
5 朱玉蘭;柔嫩艾美耳球蟲Etgam59基因克隆表達(dá)與免疫保護性研究[D];揚州大學(xué);2015年
6 張藜瀟;攜病毒柔嫩艾美耳球蟲誘導(dǎo)宿主TLRs表達(dá)及細(xì)胞因子分泌的研究[D];吉林大學(xué);2016年
7 王自文;柔嫩艾美耳球蟲鈣依賴蛋白激酶4功能特性的初步研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2016年
8 朱雪龍;柔嫩艾美耳球蟲絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶特性研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2016年
9 李聰;柔嫩艾美耳球蟲胱硫醚β合成酶和保守蛋白CHP317特性的初步研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2016年
10 劉利利;沙咪珠利抗柔嫩艾美耳球蟲作用機理的初步研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2016年
,本文編號:1669913
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/dongwuyixue/1669913.html