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檢測水禽源細小病毒的膠體金試紙條的研制

發(fā)布時間:2018-03-26 05:07

  本文選題:鵝細小病毒 切入點:番鴨細小病毒 出處:《中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報》2017年09期


【摘要】:為建立水禽源細小病毒的快速檢測方法,本研究采用純化的小鵝瘟病毒(GPV)免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞進行融合,篩選到21株能夠穩(wěn)定分泌抗GPV的單克隆抗體(MAb),將1株MAb純化后與膠體金結(jié)合,噴涂金標墊,與另一株純化的MAb配對,制成檢測水禽源細小病毒的膠體金試紙條。特異性試驗表明,鵝細小病毒、番鴨細小病毒和新型番鴨細小病毒的檢測結(jié)果均為陽性,豬細小病毒、1型鴨甲肝病毒、坦布蘇病毒、產(chǎn)蛋下降綜合征病毒、H9N2亞型禽流感病毒、番鴨呼腸孤病毒和新城疫病毒等的檢測結(jié)果均為陰性。該方法對鵝細小病毒、番鴨細小病毒和新型番鴨細小病毒的最低檢出量分別為10~(4.7) ELD50/mL、10~(4.7)ELD50/mL和10~(5.7) ELD50/mL。重復(fù)性試驗良好。對臨床糞便樣品的檢測,該方法比PCR方法簡單快速,但是存在漏檢的情況。上述結(jié)果表明,本實驗建立的方法可用于水禽源細小病毒病的初步快速篩查。
[Abstract]:In order to establish a rapid detection method for waterfowl parvovirus, BALB/c mice were immunized with purified Gosling plague virus (GPVV). The spleen cells of the immunized mice were fused with SP2/0 myeloma cells. We screened out 21 McAb which can secrete GPV stably, then purified one MAb, then combined with colloidal gold, sprayed gold standard pad, paired with another purified MAb. A colloidal gold test strip was made for the detection of waterfowl parvovirus. The specificity test showed that goose parvovirus, muscovy duck parvovirus and new muscovy duck parvovirus were positive, porcine parvovirus type 1 duck hepatitis A virus and tambusuvirus were positive. The detection results of egg drop syndrome virus H9N2 subtype avian influenza virus, muscovy duck reovirus and Newcastle disease virus were negative. The minimum detectable quantities of muscovy duck parvovirus and new muscovy duck parvovirus were 10 ~ 4. 7) ELD50 / mL10 / mL and 10 ~ 5. 7% ELD50 / mL respectively. The reproducibility of the method was good. The detection of clinical fecal samples by this method was simpler and faster than that of PCR method, but there were some cases of missed detection. The method established in this study can be used for the preliminary rapid screening of waterfowl parvovirus disease.
【作者單位】: 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所福建省畜禽疫病防治工程技術(shù)研究中心/福建省禽病防治重點實驗室;廈門市波生生物技術(shù)有限公司;
【基金】:現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項資金(CARS-42) 公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項經(jīng)費(201003012)
【分類號】:S852.65

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本文編號:1666464

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