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腸炎沙門菌效應(yīng)蛋白AvrA的原核表達及多克隆抗體的制備

發(fā)布時間:2018-03-25 11:48

  本文選題:腸炎沙門菌 切入點:Avr 出處:《中國獸醫(yī)科學》2017年07期


【摘要】:為研究腸炎沙門菌(Salmonella enteritidis)avr A基因功能及其在感染過程中的表達分布情況,本研究通過PCR技術(shù)克隆獲得了avr A基因,并構(gòu)建了腸炎沙門菌Avr A原核表達載體p Cold-avr A,轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21(DE3)中進行表達;表達蛋白經(jīng)純化后免疫小鼠獲得Avr A多克隆抗體,通過Western-blot檢測了抗體特異性。結(jié)果顯示,成功構(gòu)建了表達載體p Cold-avr A,并獲得了純化的Avr A蛋白,成功制備了小鼠抗Avr A蛋白的多克隆抗體,可用于檢測細菌Avr A蛋白的表達。本研究成功獲得純化的Avr A蛋白及其多克隆抗體,為進一步探討Avr A在腸炎沙門菌感染過程中所發(fā)揮功能奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to study the function of Salmonella enteritidis)avr A gene and its expression and distribution during infection, avr A gene was cloned by PCR technique. The prokaryotic expression vector of Salmonella enteritidis Avr A, p Cold-avr A, was constructed and expressed in E. coli BL21 (DE3). The expressed protein was purified and immunized with Avr A polyclonal antibody. The specificity of the antibody was detected by Western-blot. The expression vector p Cold-avr A was successfully constructed, and the purified Avr A protein was obtained. The polyclonal antibody against Avr A protein was successfully prepared. The purified Avr A protein and its polyclonal antibody were successfully obtained, which laid a foundation for further study on the function of Avr A in the process of Salmonella enteritis infection.
【作者單位】: 揚州大學江蘇省人獸共患病學重點實驗室江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】:國家自然科學基金項目(31320103907) 江蘇省高校研究生科研創(chuàng)新計劃項目(KYZZ_0368)
【分類號】:S852.61

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