本文選題：馬立克氏病　切入點：野毒株　出處：《山東農(nóng)業(yè)大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：禽馬立克氏病(Marek,s disease,MD)是由雞馬立克氏病病毒引起的(Marek,s disease virus,MDV)一種高度接觸性傳染病,可引起禽的惡性淋巴腫瘤性疾病。近年來,在一些即使已經(jīng)免疫了CVI988/Rispens等商品疫苗的雞群,仍然會發(fā)生MDV的感染并引起腫瘤的發(fā)生,給當前家禽產(chǎn)業(yè)造成了嚴重的經(jīng)濟損失。我們有興趣知道這類發(fā)生免疫失敗的雞群中雞馬立克氏病病毒是否發(fā)生了致病性和主要致病基因的變化,為此,本研究對從不同CVI988/Rispens商品疫苗的雞群中分離鑒定了三株MDV野毒株,并對其主要致病基因進行了克隆測序和序列分析,并對純化后的毒株開展了致病性實驗。1.不同雞群中MDV野毒株的分離鑒定和主要致病基因序列分析為了研究近年來我國MDV的流行和分布情況、毒力變化及其分子衍化的規(guī)律,本研究通過臨床剖檢,病毒分離,IFA檢測和致病基因的擴增從曾免疫過商品化疫苗CVI988/Rispens的3個白羽肉種雞場發(fā)病雞的淋巴細胞中分離到三株適應雞胚成纖維細胞的MDV野毒株(分別命名為SDAU1501、SDAU1502、SDAU1503)。對3株MDV的主要致病基因vIL8、pp38、meq基因進行了PCR擴增并與標準參考毒株進行氨基酸序列比較分析發(fā)現(xiàn):SDAU1503株與CVI988和814株親緣關(guān)系較近,而SDAU1501和SDAU1502株與中國早期分離的GX0101親緣關(guān)系較近。同源性分析發(fā)現(xiàn)SDAU1503株的meq基因與CVI988/Rispens同源性最高為99.1%,而SDAU1502與SDAU1501同源性100%,且與GX0101相同;pp38基因相對保守,SDAU1503和SDAU1502與GX0101序列完全一致,而SDAU1501與GX0101的同源性為99.7%,與其他國外參考毒株的同源性也高達99.3%;vIL8基因SDAU1503與4個國外標準毒株同源性最高為99.3%,而SDAU1501和SDAU1502與GX0101同源性最高,分別為98.5和99.3%,與國外參考毒株的同源性為97%。根據(jù)對MDV三個致病基因的序列比較發(fā)現(xiàn),SDAU1501和SDAU1502的致病基因與強毒株氨基酸同源性很高,而SDAU1503的致病基因與弱毒疫苗株氨基酸同源性很高,但對于其各自的致病性還需要進一步的致病性試驗研究。2.近期分離MDV野毒株的致病性分析為了進一步觀察對分離到的3株MDV野毒株的致病性,將3株MDV野毒人工感染1日齡海藍褐蛋雞進行了致病性試驗研究。結(jié)果顯示,SDAU1501和SDAU1502毒株毒力較強,感染SDAU1501和SDAU1502的雞出現(xiàn)臨床癥狀最早被發(fā)現(xiàn)于攻毒后21天,雞只死亡最早出現(xiàn)于攻毒后的25天,發(fā)病雞羽毛松亂,臨床癥狀主要集中于7-10周,感染SDAU1501毒株的海藍褐雞群可以達到100%和90%的發(fā)病率和死亡率,以及54%的腫瘤發(fā)生率,感染SDAU1502毒株的海藍褐雞群可以達到100%和77%的發(fā)病率和死亡率,以及44%的腫瘤發(fā)生率;SDAU1503毒株毒力較弱,感染SDAU1503病毒的雞出現(xiàn)臨床癥狀主要集中于10-12周,臨床癥狀最早出現(xiàn)于攻毒后47天,死亡時間最早出現(xiàn)于攻毒后52天,發(fā)病率可達到70%,但死亡率和腫瘤發(fā)生率卻只有34%和14%左右。對感染了3株病毒的自然死亡雞只和攻毒16周后剖殺的雞只逐只進行剖檢發(fā)現(xiàn),3株MDV病毒均能引起不同程度的心臟、肝臟和腎臟腫瘤,并且個別雞只出現(xiàn)了皮膚、腺胃和卵巢的腫瘤。感染了SDAU1501和SDAU1502的雞群,在感染病毒后第6-8周的死亡雞剖檢主要可見到豆粒大小的心臟腫瘤;肝臟、脾臟腫大,零星出現(xiàn)腫瘤,感染后10-12周的死亡雞只開始出現(xiàn)彌散性的肝臟腫瘤,感染病毒后的14-16周,部分的發(fā)病的死亡雞只剖檢可以看見腺胃腫瘤性病變。但感染SDAU1503的雞只,腫瘤發(fā)生的時間稍有延遲,但出現(xiàn)肝臟病變的時間要早于心臟的病變,攻毒后的第8周的死亡雞只剖檢可見腎臟和肝臟的腫瘤,在14-16周零星可見心臟腫瘤。本研究結(jié)果表明,近年來MDV新的變異不斷發(fā)生,且毒力逐步變強,對MD的監(jiān)測應當繼續(xù)下去,同時,在現(xiàn)有MDV疫苗對野毒株的保護效力方面進行全面系統(tǒng)評估。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：S852.65

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本文編號：1651440