本文選題：基因工程　切入點(diǎn)：布魯氏菌　出處：《基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)》2017年01期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：本研究在S19弱毒菌株的基礎(chǔ)上通過一系列手段獲得布魯氏菌Bp26蛋白、Bmp18蛋白雙缺失株,待遺傳學(xué)鑒定合格后用于小鼠實驗。將120只小鼠分為實驗組、S19對照組和空白對照組3組,將雙基因缺失株和S19弱毒株培養(yǎng)24 h后離心收集菌體,使用PBS清洗重懸后進(jìn)行細(xì)菌計數(shù),實驗組小鼠腹腔接種檢驗合格的雙基因缺失株5×10~5 CFU的劑量,病菌對照組腹腔接種S19弱毒菌株5×10~5 CFU的劑量,空白對照組腹腔注射同等體積的PBS溶液,觀察分析Bp26蛋白做抗原的免疫原性、雙基因缺失菌株的毒力情況和免疫應(yīng)答情況。最終構(gòu)建出能夠區(qū)分自然免疫和人工免疫并具低毒性的布魯氏弱毒菌株。雙基因缺失株具有遺傳穩(wěn)定性,采用Bp26蛋白做抗原對3組小鼠的免疫原性測定,表明實驗組40只小鼠均未表現(xiàn)出免疫原性,S19對照組40只小鼠中有28只表現(xiàn)出了免疫原性,占70%,空白對照組40只小鼠均未表現(xiàn)出免疫原性,雙基因缺失株與原S19弱毒株的免疫應(yīng)答基本一致,且更為安全。
[Abstract]:On the basis of S19 attenuated strain, the double deletion strain of Bp26 protein and Bmp18 protein of Brucella spp was obtained by a series of methods, and was used in mouse experiment after genetic identification. 120 mice were divided into three groups: the experimental group, S19 control group, and the blank control group, respectively. The double gene deletion strain and S19 attenuated strain were cultured for 24 hours and then centrifuged to collect the bacteria. The bacteria were cleaned by PBS and counted. The mice in the experimental group were inoculated intraperitoneally with the dose of 5 脳 10 5 CFU. The control group was intraperitoneally inoculated with S19 attenuated strain 5 脳 10 ~ (5) CFU, and the blank control group was intraperitoneally injected with the same volume of PBS solution. The immunogenicity of Bp26 protein as antigen was observed and analyzed. The virulence and immune response of the double gene deletion strain. Finally, a low toxicity Brucella attenuated strain, which can distinguish natural and artificial immunity, was constructed. The double gene deletion strain has genetic stability. The immunogenicity of the three groups of mice was determined by using Bp26 protein as antigen. The results showed that none of the 40 mice in the experimental group showed immunogenicity, and 28 of the 40 mice in the control group showed immunogenicity. None of the 40 mice in the blank control group showed immunogenicity, and the immune response of the double gene deletion strain was basically consistent with that of the original S19 attenuated strain, and it was safer than that of the original S19 attenuated strain.
【作者單位】： 內(nèi)蒙古民族大學(xué)動物科技學(xué)院;吉林大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(31260608) 內(nèi)蒙古自治區(qū)高等學(xué)�？茖W(xué)技術(shù)研究重點(diǎn)項目(NJZZ12117) 內(nèi)蒙古通遼市校科技合作項目(SXZD2012131) 內(nèi)蒙古自治區(qū)自然科學(xué)基金項目(2015MS0339)共同資助
【分類號】：S852.4

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本文編號：1651379