LPS誘導牦牛成纖維細胞TLR4及其信號通路基因表達變化分析
本文選題:成纖維細胞 切入點:牦牛 出處:《中國獸醫(yī)學報》2017年09期 論文類型:期刊論文
【摘要】:采用PCR方法從牦牛成纖維細胞中擴增TLR4基因,并用5mg/L質量濃度的LPS誘導牦牛成纖維細胞,分別在0,12,24,36h用實時熒光定量PCR檢測TLR4及其信號通路基因(IL-1β、IL-8)mRNA水平的相對表達量。結果顯示,克隆得到TLR4基因序列長2 067bp(GenBank號:KU743904),與GenBank中野牦牛TLR4的相似性達99%。5mg/L質量濃度的LPS誘導處理后的各基因與0h相比,在12和24h均有上調,在36h均下調。誘導后24h,TLR4、IL-1β和IL-8基因的表達量均達到最大值,且都顯著高于0和36h(P0.05)。由此得出TLR4、IL-1β和IL-8均可在牦牛皮膚成纖維細胞中表達,并參與了對LPS的應答反應。
[Abstract]:The TLR4 gene was amplified from yak fibroblasts by PCR method, and the yak fibroblasts were induced by 5 mg / L LPS. The relative expression of TLR4 and its signal pathway gene, IL-1 尾 -IL-8 mRNA was detected by real-time fluorescence quantitative PCR at 0 ~ 1212 ~ 24 ~ 36 h, respectively. The length of TLR4 gene was 2 067 BP GenBank: KU743904, and the similarity with wild yak TLR4 in GenBank was 99.5mg / L LPS. Compared with 0h, the genes were up-regulated at 12 and 24 hours. The expression levels of IL-1 尾 and IL-8 gene of TLR4 were significantly higher than those of 0 and 36 h after induction, and the results showed that TLR4, IL-1 尾 and IL-8 could be expressed in yak skin fibroblasts, and participated in the response to LPS, and the expression of TLR4TLR4 尾 and IL-8 was significantly higher than that of P0.05 at 0 and 36 h after induction, the results showed that TLR4 and IL-8 could be expressed in yak skin fibroblasts and participate in the response to LPS.
【作者單位】: 西南民族大學青藏高原研究院;西南民族大學生命科學與技術學院;
【基金】:中央高校青年教師基金資助項目(2015NZYQN60) 四川省教育廳重點資助項目(16ZA0014)
【分類號】:S823.85
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,本文編號:1637515
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