本文選題：豬繁殖與呼吸綜合征病毒　切入點(diǎn)：豬流行性腹瀉病毒　出處：《中國獸醫(yī)科學(xué)》2017年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為快速簡便地檢測豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)與豬流行性腹瀉病毒(PEDV),根據(jù)GenBank中已發(fā)布的基因序列,選擇PRRSV的ORF7基因和PEDV的S基因,分別設(shè)計1對特異性引物,通過對反應(yīng)體系中各成分的優(yōu)化,建立了可同時檢測PRRSV和PEDV的雙重RT-PCR方法。本方法能從PRRSV和PEDV的混合基因組中分別擴(kuò)增出300 bp和578 bp的特異性片段,且對豬傳染性胃腸炎病毒、豬瘟病毒、乙型腦炎病毒、輪狀病毒、大腸桿菌的擴(kuò)增結(jié)果均為陰性;應(yīng)用該方法對采自成都周邊的79份臨床樣品進(jìn)行檢測,結(jié)果與單一RT-PCR的檢測結(jié)果一致,具有良好的重復(fù)性;本方法檢出的最小拷貝數(shù)為1.49×10~5copies/μL,敏感性也較好。本研究建立的雙重RT-PCR方法具有較好實(shí)用性,可用于臨床樣品的檢測。
[Abstract]:In order to detect porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSVV) and porcine epidemic diarrhea virus (PEDVV) quickly and easily, according to the published gene sequence in GenBank, the ORF7 gene of PRRSV and the S gene of PEDV were selected and a pair of specific primers were designed. By optimizing the components of the reaction system, a dual RT-PCR method was established for simultaneous detection of PRRSV and PEDV. The specific fragments of 300bp and 578bp were amplified from the mixed genome of PRRSV and PEDV, respectively. The amplification results of classical swine fever virus, Japanese encephalitis virus, rotavirus and Escherichia coli were all negative. This method has good reproducibility, the minimum copy number of this method is 1.49 脳 10 ~ (5) copi es / 渭 L, and the sensitivity is good. The dual RT-PCR method established in this study has good practicability and can be used for the detection of clinical samples.
【作者單位】： 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院;四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物疫病與人類健康四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：四川省科技支撐計劃項目(2017NZ0038) “十二五”農(nóng)村領(lǐng)域國家科技計劃項目(2015BAD12B04-2.3)
【分類號】：S852.651

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本文編號：1635040