本文選題：豬　切入點(diǎn)：修復(fù)基因　出處：《河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報》2017年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為建立用熒光定量PCR方法檢測豬IGF1、EGFR、EGF、β-actin基因表達(dá)量的標(biāo)準(zhǔn)曲線,本試驗根據(jù)目的基因在NCBI上CDS區(qū)序列,設(shè)計合成引物,構(gòu)建目的基因重組質(zhì)粒,采用SYBR GreenI熒光定量RT-PCR的檢測方法,構(gòu)建檢測豬IGF1、EGFR、EGF、β-actin基因表達(dá)量的標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果顯示,由pEASY-T1目的基因所構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系良好,線性回歸系數(shù)(R2)均大于或等于0.99,起始模板與Ct值之間呈良好的線性關(guān)系,溶解曲線峰值單一,表明引物具有很好的特異性,結(jié)果準(zhǔn)確可靠。本研究成功構(gòu)建了用熒光定量RT-PCR方法檢測豬IGF1、EGFR、EGF、β-actin基因表達(dá)量的標(biāo)準(zhǔn)曲線,為后續(xù)檢測基因相對表達(dá)量的變化奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to establish a standard curve for detecting the expression of EGF1, 尾 -actin gene in porcine IGF1-EGFR, 尾 -actin gene, primers were designed and synthesized according to the sequence of CDS region of the target gene on NCBI, and the recombinant plasmid of the target gene was constructed. The detection method of SYBR GreenI fluorescence quantitative RT-PCR was used to detect the expression of EGF, 尾 -actin gene. A standard curve was constructed to detect the expression of EGF, 尾 -actin gene in pig IGF1 gene. The results showed that the standard curve constructed by pEASY-T1 gene had a good linear relationship, and the linear regression coefficient (R2) was greater than or equal to 0.99, and there was a good linear relationship between the initial template and Ct value. The peak value of the dissolution curve was single, which indicated that the primer had good specificity and the results were accurate and reliable. In this study, a standard curve for the detection of EGF1, 尾 -actin gene expression in pig IGF1 was successfully constructed by fluorescence quantitative RT-PCR. It lays a foundation for the subsequent detection of the relative expression of genes.
【作者單位】： 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)診斷中心/農(nóng)業(yè)部動物疫病病原生物學(xué)華北科學(xué)觀測實(shí)驗站;衡水市農(nóng)牧局;伊犁特克斯縣畜牧局獸醫(yī)站;
【基金】：國家自然基金項目(31470125)
【分類號】：Q78;S828

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本文編號：1630296