本文選題：ASIP-YY　切入點(diǎn)：羊駝　出處：《農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào)》2017年07期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：鼠灰色(Agouti)基因時(shí)影響動(dòng)物毛色的重要基因之一,雖然在多種動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)了Agouti基因的存在和表達(dá),但Agouti信號(hào)蛋白(Agouti signaling protein,ASIP)對(duì)羊駝(Lama pacos)黑色素細(xì)胞的增殖及對(duì)毛色相關(guān)基因的影響研究鮮見報(bào)道。本研究旨在利用不同濃度ASIP-YY(a C-terminal fragment of ASIP)作用于體外培養(yǎng)的羊駝皮膚黑色素細(xì)胞,觀察其對(duì)黑色素細(xì)胞及黑色素生成的影響。不同濃度ASIP-YY(0.0、0.1、1.0、10.0、100.0 nmol/L)處理羊駝皮膚黑色素細(xì)胞72 h。四甲基偶氮噻唑藍(lán)(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法檢測(cè)黑色素細(xì)胞活力,紫外分光光度法檢測(cè)黑色素含量,q RT-PCR檢測(cè)酪氨酸酶(Tyrosinase,TYR)、TRP-1、TRP-2、黑色素細(xì)胞膜上的黑色素皮質(zhì)激素受體1(melanocortin-1 receptor,MC1R)和小眼畸形相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子(Micropht-halmiaassocitated transcription factor,MITF)m RNA表達(dá)量。結(jié)果顯示,黑色素細(xì)胞活力受到抑制;ASIP-YY在0.1、10.0、100.0 nmol/L時(shí)對(duì)TYR m RNA的表達(dá)極顯著抑制(P0.01),10.0、100.0 nmol/L時(shí)對(duì)TRP-1 m RNA的表達(dá)極顯著抑制(P0.01),10.0 nmol/L時(shí)對(duì)MC1R m RNA的表達(dá)顯著抑制(P0.05),0.1、1.0、10.0 nmol/L時(shí)對(duì)MITF m RNA的表達(dá)極顯著抑制(P0.01);0.1、1.0 nmol/L時(shí)對(duì)TRP-1、TRP-2 m RNA的表達(dá)顯著提高(P0.05),1.0、100.0 nmol/L時(shí)對(duì)MC1R的表達(dá)極顯著提高(P0.01)。ASIP-YY可使黑色素細(xì)胞體積變小,抑制黑色素相關(guān)基因的表達(dá),可能是ASIPYY競(jìng)爭(zhēng)性的與MC1R結(jié)合,從而抑制黑色素相關(guān)基因的表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)為進(jìn)一步研究ASIP對(duì)羊駝皮膚黑色素生成調(diào)控提供一定的理論基礎(chǔ)。
[Abstract]:The Agouti gene is one of the important genes that influence the color of animal coat, although the existence and expression of Agouti gene have been found in many animals. However, there are few reports on the effects of Agouti signal protein (Agouti) on the proliferation of melanocytes and on the coat color related genes. The aim of this study was to use different concentrations of ASIP-YY(a C-terminal fragment of ASIP to treat the melanocytes of alpaca skin in vitro. To observe its effect on melanocyte and melanin production, the melanocytes of alpaca skin were treated with different concentrations of ASIP-YYP0.00.1nmol / L (1.0 ~ 10.0nmol / L) for 72 h. The activity of melanocytes was detected by tetrazoliumium tetrazolium tetrazolium tetrazolium (MTT) assay. Detection of melanin content by UV Spectrophotometry and RT-PCR Detection of tyrosinase TRP-1 TRP-2, melanocortin-1 receptor MC1R on melanin cell membrane and micropht-halmiaassocitated transcription factorMITFm RNA expression on melanocortin-1 receptor on melanoma cell membrane and micropht-halmiaassocatted transcription factorMITFm RNA, the results showed that. The expression of TYR m RNA was significantly inhibited by ASIP-YY at 0.1 ~ 10.0 ~ 100.0 nmol/L. The expression of TRP-1 m RNA was significantly inhibited by TRP-1 m RNA at 0.01 ~ 10.0 nmol/L. ASIP-YY significantly inhibited the expression of MC1R m RNA at 10. 0 nmol/L with P0. 05 0. 1. 01 and 10. 0 nmol/L. The expression of MITF m RNA was significantly inhibited by P0. 01. 0. 0. 0. 0. 0 nmol/L and 10. 0% P0. 01. 0. 0. 0. 0. 1. 0 nmol/L. The expression of TRP-1 m RNA was significantly inhibited by ASIP-YY. Inhibition of the expression of TRP-1TRP-2 m RNA at 1.0 nmol/L of P0.01P0.01P0.01TP-YY could significantly increase the expression of MC1R at 1.0 nmol/L. ASIP-YY could make the melanocyte volume smaller. Inhibiting the expression of melanin related genes may be the competitive binding of ASIPYY to MC1R, thus inhibiting the expression of melanin related genes. This study provides a theoretical basis for further study on the regulation of melanin production in alpaca skin by ASIP.
【作者單位】： 山西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.30972223和No.31272628)
【分類號(hào)】：S829.9

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1623118