莊曉薇
（山東省臨朐縣畜牧局，山東 臨朐  262600）

摘要：對16份豬場病豬病料進行病原菌分離、血清學鑒定、致病力試驗、保護力試驗、細菌回收試驗、藥敏試驗，結果表明，該病原菌為II 型豬鏈球菌，引起關節(jié)炎的豬鏈球菌較引起敗血癥的豬鏈球菌致病力弱；該菌對頭孢菌素、青霉素高度敏感。
關鍵詞：豬鏈球菌；分離；鑒定
中圖分類號：Ｓ852.61+1               文獻標識碼：A                 文章編號：1007－273X（２０１３）０8-0013-03

豬鏈球菌 (Streptococcosis suis) 是引起豬的多種疾病的病原菌之一，該病原菌在養(yǎng)豬業(yè)發(fā)達國家如美、英、荷蘭及愛爾蘭等國常有發(fā)生。我國于 1958 年就有豬鏈球菌病的報道，1976 年我國南方幾省曾一度廣泛流行，給我國養(yǎng)豬業(yè)帶來了很大危害［1］。
    目前發(fā)現(xiàn)的豬鏈球菌莢膜型已超過 30 種。該病一年四季均可發(fā)生，但以 4~10 月份發(fā)生較多。常為地方性流行，多呈敗血性，短期波及全群，如不進行防治，則發(fā)病率、病死率很高，慢性常為地方性散發(fā)性傳染［2］。
1  豬場發(fā)病情況
    2012 年 4 月，山東省臨朐縣某生豬繁育場仔豬流行關節(jié)炎及敗血癥，發(fā)病豬多為 2~6 周齡仔豬。無菌采取病豬的關節(jié)液、肝、脾、肺及腸系膜淋巴結，經(jīng)實驗室分離鑒定，證實為II 型豬鏈球菌。
2  材料與方法
2.1  材料
2.1.1  病料  無菌采取該生豬繁育場患關節(jié)炎病豬的關節(jié)液 8 份，分別編號為 1-8 號；無菌采取患敗血癥豬的肝、肺、脾及腸系膜淋巴結 8 份，分別編號為 9~16 號。
2.1.2  試劑   試驗所用的各種糖均購自上海化學試劑二廠，批號為 2010~2012 年不等。
2.1.3  培養(yǎng)基  綿羊鮮血平板、匹克氏增菌液、10 ml/L豬血清肉湯及各種糖培養(yǎng)基按常規(guī)方法制備。
2.1.4  試驗抗原   豬鏈球菌診斷血清與平板凝集抗原均購自中國獸藥鑒察所，批號為 990725。
2.1.5  藥敏紙片 購自廣東省某軍區(qū)后勤部，批號 20000312。
2.1.6  試驗動物  健康小白鼠 (30~35 g) 50 只，購自青島農業(yè)大學動物科技學院。
2.2  方法
2.2.1  病原分離  將所采病料分別涂片，革蘭氏染色鏡檢，然后分別接種于鮮血瓊脂平板。37 ℃ 需氧培養(yǎng) 24 h 后，挑取可疑菌落接種于匹克氏增菌液，37 ℃ 培養(yǎng) 24 h 后，革蘭氏染色，顯微鏡檢查，再接種于血清肉湯，純化后放置 4 ℃，冷藏備用［3］。
2.2.2  分離菌株的鑒定
    （1）生化試驗。隨機抽取上述分離菌血清肉湯培養(yǎng)物 3#、8#、13#、15#，分別接種于蔗糖、山梨醇、棉子糖、葡萄糖、水楊苷、馬尿酸鈉培養(yǎng)基，37 ℃培養(yǎng)24 h 后，觀察其對糖的利用情況［4］。
    （2）血清學鑒定。將 3#、8#、13#、15# 菌經(jīng)血清肉湯培養(yǎng) 8 h，通過 3 000 r/min 離心 10 min，PBS 洗滌 2 次，用pH 7.2 的 0.01mol/L PBS制成 1:10~1:20倍稀釋的細菌懸液。取 1 滴上述細菌懸液與適當?shù)目寡逶跐崈舨Ｆ匣靹�，立即觀察凝集現(xiàn)象。同感；潔霉素和卡那霉素中度敏感；而對土霉素、鏈霉素、慶大霉素具有耐藥性。
4  討論
過去屢有敗血型豬鏈球菌的報道，而關于集約化養(yǎng)豬場關節(jié)炎型鏈球菌病的報道較少。本次試驗從患關節(jié)炎豬的關節(jié)液中成功分離出了豬鏈球菌。另外，該種豬場約有60% 的仔豬流行關節(jié)炎，嚴重者可發(fā)生敗血癥而死亡，給種豬場造成巨大的經(jīng)濟損失。所以，研究該病可為生產中防制該病提供理論依據(jù)。
病豬的鼻液、尿液、肌肉、內臟和關節(jié)內均帶有病原體，建議首先應加強對健康豬的免疫。另一方面，在發(fā)病后對病豬和健康豬進行隔離，根據(jù)實驗室藥敏試驗結果配合藥物治療，，建議用頭孢菌素、青霉素、潔霉素等藥物治療。該種豬繁育場采納我們的建議，首先對所有的未發(fā)病仔豬用滅活疫苗免疫接種，對已發(fā)病的豬用青霉素等藥物配合治療，另外注意衛(wèi)生管理。該病得到有效的控制。
5  結論
引起豬關節(jié)炎的豬鏈球菌的致病力較小，而引起敗血癥的豬鏈球菌的致病力較強。但通過生化試驗和血清學鑒定，它們又是同種細菌且血清型也相同。同種血清型的豬鏈球菌的致病力之間的差異還有待于進一步研究。
參考文獻：
［1］ 楊本升，劉玉斌，茍仕金，等． 動物微生物學［M］． 長春:吉林科學技術出版社，1995.
［2］ 黃毓茂,黃引賢．2型豬鏈球菌的血清學鑒定［J］．中國獸醫(yī)學報，1995，15（1）：63-65
［3］ 李健強,李大金.獸醫(yī)微生物學實驗實習指導［M］. 西安：陜西科學技術出刊社，1999.
［4］ 張彥明，賈靖國，劉安典．動物性食品衛(wèi)生檢驗技術［M］. 西安．西北大學出版社，1996.
［5］ 蔡寶祥.家畜傳染病學［M］． 北京：中國農業(yè)出版社，1998.
［6］ 甘肅農業(yè)大學.獸醫(yī)微生物學［M］. 北京：中國農業(yè)出版社，1982.
［7］ 劉榮標．獸醫(yī)微生物學（上）［M］. 臺北：藝軒圖書出版社，1984.
［8］ 鄭明球．家畜傳染病學實驗指導［M］． 北京：中國農業(yè)出版社，1999.

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