大腸埃希菌F4菌毛凝集性單抗制備及抗原表位差異
本文選題:產(chǎn)腸毒素大腸埃希菌F 切入點(diǎn):凝集性 出處:《揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版)》2017年01期 論文類型:期刊論文
【摘要】:采用雜交瘤單克隆抗體制備技術(shù),獲得4株能穩(wěn)定分泌產(chǎn)腸毒素大腸埃希菌(ETEC)F4菌毛特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞株,分別命名為8EH2、8EH3、9E10、11D4。免疫印跡和凝集反應(yīng)結(jié)果表明:這4株單抗均能與純化的F4菌毛蛋白發(fā)生特異性反應(yīng),且與F4大腸埃希菌不同血清型變異株F4ab、F4ac和F4ad發(fā)生特異性肉眼可見(jiàn)的凝集反應(yīng);而與F18、F6(987P)、F5(K99)產(chǎn)腸毒素大腸埃希菌參考株、分離株以及腸炎沙門(mén)氏菌參考株50336、分離株等多種腸桿菌科細(xì)菌無(wú)任何交叉反應(yīng)。對(duì)單抗亞類的特性檢測(cè)結(jié)果顯示,這4株單抗均屬于IgG1抗體,且主要識(shí)別F4ac的抗原表位,其中,8EH2、8EH3、9E10也能夠較好地識(shí)別F4ab的抗原表位。結(jié)果說(shuō)明F4菌毛凝集性單克隆抗體為ETEC F4感染的快速特異診斷提供技術(shù)基礎(chǔ)。
[Abstract]:By using hybridoma monoclonal antibody preparation technique, four hybridoma cell lines were obtained, which could stably secrete the specific antibody against enterotoxigenic Escherichia coli ETEC-F4 fimbriae. The results of immunoblotting and agglutination showed that the four McAbs could react specifically with the purified F4 fimbriae protein. Specific agglutination reaction was observed with different serotype variants of Escherichia coli F4, F4abanF4ac and F4ad, but with F18, F6, 987Pn987, F5K99, the reference strain of Enterotoxin-producing Escherichia coli, F4abanf4ac and F4ad. There was no cross reaction among the isolates, the reference strain of Salmonella enteritidis 50336, and the isolates of Enterobacteriaceae. The characteristics of the McAb subclasses showed that all the McAbs belonged to the IgG1 antibody and mainly recognized the epitopes of F4ac. The antigenic epitopes of F4ab could also be well identified by 8EH _ 2 and 8EH _ 3G _ 9E10. The results indicated that the F4 pili agglutination monoclonal antibody could provide a technical basis for the rapid and specific diagnosis of ETEC F4 infection.
【作者單位】: 揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院/江蘇省動(dòng)物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;
【基金】:科技部畜禽重大疫病防控與高效安全養(yǎng)殖綜合技術(shù)研發(fā)重點(diǎn)專項(xiàng)(2016YFD0500900) 國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31672579、30571374、30771603、31072136、31270171) 江蘇高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程項(xiàng)目(2014-09) 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所獸醫(yī)生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放基金項(xiàng)目(SKLVBF201706)
【分類號(hào)】:S852.4
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,本文編號(hào):1614405
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