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與臍帶間充質(zhì)干細胞共培養(yǎng)促進奶牛乳腺上皮細胞乳蛋白合成及其機制

發(fā)布時間:2018-03-01 09:10

  本文關(guān)鍵詞: 臍帶間充質(zhì)干細胞(UCMSC) 牛乳腺上皮細胞(BMEC) 共培養(yǎng) 乳蛋白 β酪蛋白(CSN) κ酪蛋白(CSN) 出處:《細胞與分子免疫學雜志》2017年02期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的研究臍帶間充質(zhì)干細胞(UCMSC)調(diào)節(jié)奶牛乳腺上皮細胞(BMEC)乳蛋白合成的可能作用機制。方法利用TranswellTM小室將UCMSC和BMEC進行雙層共培養(yǎng),BMEC單純培養(yǎng)為對照組,胰島素樣生長因子1受體(IGF-1R)抑制劑AG1024處理細胞,ELISA檢測上清IGF-1和β酪蛋白(CSN2)、κ酪蛋白(CSN3)含量變化,實時定量PCR檢測Janus激酶2/信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子與轉(zhuǎn)錄激活子5(JAK2/STAT5)信號通路相關(guān)基因的相對表達豐度;再用JAK2信號通路阻斷劑AG490孵育細胞,實時定量PCR檢測CSN2、CSN3 mRNA的相對表達豐度。結(jié)果與UCMSC共培養(yǎng)后,BMEC的CSN2、CSN3合成量和CSN2、CSN3、JAK2、STAT5、E74樣ETS轉(zhuǎn)錄因子5(ELF5)mRNA相對表達豐度均顯著高于單純培養(yǎng)的BMEC;AG1024處理后,顯著降低BMEC的CSN2、CSN3合成量,顯著降低CSN2、CSN3、JAK2、STAT5、ELF5 mRNA的相對表達豐度;給予AG490阻斷后,顯著降低CSN2、CSN3 mRNA相對表達豐度;在AG1024基礎(chǔ)上,加入AG490后顯著降低CSN2、CSN3 mRNA相對表達豐度。結(jié)論UCMSC能夠通過IGF-1介導(dǎo)JAK2/STAT5信號通路,上調(diào)BMEC乳蛋白合成關(guān)鍵基因mRNA的表達豐度,促進其乳蛋白的合成。
[Abstract]:Objective to study the possible mechanism of UCM SCC regulating milk protein synthesis of bovine mammary epithelial cells (BMECs). Methods UCMSC and BMEC were co-cultured in TranswellTM chamber as control group. Insulin like growth factor 1 receptor IGF-1R inhibitor (AG1024) was used to detect the changes of IGF-1 and 尾 casein (CSN2), 魏 casein (CSN3) levels in supernatants. Real-time quantitative PCR was used to detect the relative expression abundance of Janus kinase 2 / signal transducers associated with transcription activator 5 (JAK2 / STAT5) signaling pathway, and then incubated cells with AG490, a JAK2 signaling pathway blocker. Results after co-culture with UCMSC, the relative expression abundance of CSN2CN3 in BMEC and the relative expression of ETS transcription factor 5 ELF5N3 in CSN2CSN3- JAK2STAT5E74 were significantly higher than that in ECBMN1024 treated with UCMSC alone, and the synthesis of CSN2CSN3 in BMEC was significantly lower than that in ECBMN2A1024 treated with CSN2STAT5E74.Results the relative expression abundance of CSN2CSN3 in BMEC was significantly lower than that in cultured ECBMG1024, and the relative abundance of ETS transcription factor 5 ELF5N was significantly higher than that of ECBMG AG1024. After blocking AG490, the relative expression abundance of CSN2 mRNA was significantly decreased, and the relative abundance of mRNA expression was significantly decreased after the addition of AG4 90 on the basis of AG1024. Conclusion UCMSC can mediate the JAK2/STAT5 signaling pathway by IGF-1. Upregulate the expression abundance of mRNA, the key gene of BMEC milk protein synthesis, and promote its milk protein synthesis.
【作者單位】: 新疆農(nóng)業(yè)大學動物科學學院新疆肉乳用草食動物營養(yǎng)實驗室;
【基金】:奶產(chǎn)業(yè)體系資助(CARS-37) 國家自然科學基金(31560645) 新疆農(nóng)業(yè)大學畜牧學博士后工作站資助 新疆維吾爾自治區(qū)高等學?蒲杏媱濏椖(XJEDU2013S17) 2013年度新疆研究生科研創(chuàng)新項目(xjau-2013-yjsky-XJGRI2013113)
【分類號】:S823

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本文編號:1551286

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