本文關鍵詞： 鴨甲型肝炎病毒(DHAV) DHAV- DHAV- 反向遺傳操作 重組新城疫病毒　出處：《中國獸醫(yī)學報》2017年09期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為進一步研發(fā)安全有效的鴨甲型肝炎病毒(DHAV)多價疫苗,本研究以新城疫病毒(NDV)LaSota弱毒疫苗株為載體,構建出共表達DHAV-1和-3型VP1基因的重組病毒rLS-1VP1-2A-3VP1,并對其毒力、生物學特性進行鑒定。通過間接免疫熒光試驗(IFA)驗證DHAV-1和-3型VP1蛋白在細胞內能夠有效表達。利用Western blot進一步驗證重組病毒產生的中和抗體能和DHAV-1和DHAV-3VP1表達蛋白發(fā)生較強的反應。重組病毒rLS-1VP1-2A-3VP1保持了原重組疫苗株rLS-RFP對雞胚的高滴度生長適應和低致病的特性。將重組病毒rLS-1VP1-2A-3VP1免疫種鴨1次,通過中和試驗檢測該重組病毒能夠在鴨體內產生針對DHAV-1和DHAV-3的中和抗體,平均效價分別為1∶18.17和1∶16.60。本研究結果表明重組病毒rLS-1VP1-2A-3VP1具有作為鴨肝炎重組病毒活載體疫苗用于種鴨的潛力。
[Abstract]:In order to further develop a safe and effective duck hepatitis A virus (DHAV) multivalent vaccine, the recombinant virus rLS-1VP1-2A-3VP1 was constructed and its virulence was studied by using NDV (NDV) LaSota attenuated vaccine strain of Newcastle disease virus (NDV) as vector, and the recombinant virus rLS-1VP1-2A-3VP1 was constructed. By indirect immunofluorescence assay (IFA), DHAV-1 and type -3 VP1 proteins were effectively expressed in cells. Western blot was used to further verify the neutralizing antibody produced by the recombinant virus and DHAV-1 and DHAV-3VP1 expression proteins. The recombinant virus rLS-1VP1-2A-3VP1 maintained the characteristics of high titer growth adaptation and low pathogenicity of the original recombinant vaccine strain rLS-RFP to chicken embryo. The recombinant virus rLS-1VP1-2A-3VP1 was immunized with duck once. Neutralization tests showed that the recombinant virus produced neutralizing antibodies against DHAV-1 and DHAV-3 in ducks. The average titers were 1: 18.17 and 1: 16.60 respectively. The results showed that the recombinant virus rLS-1VP1-2A-3VP1 had the potential to be used as live vector vaccine for duck hepatitis virus.
【作者單位】： 山東農業(yè)大學動物科技學院;山東省農業(yè)科學院家禽研究所;
【基金】：山東省現(xiàn)代農業(yè)產業(yè)技術體系資助項目(SDAIT-13-011-01) 山東省農業(yè)科學院青年科研基金資助項目(2014QNZ06)
【分類號】：S852.65

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本文編號：1542870