發(fā)布時間：2018-02-26 17:09

  本文關鍵詞： 豬EP基因 非酶連接 丙酸誘導 原核表達　出處：《中國獸醫(yī)學報》2017年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為進一步體外研究EP1基因的生物學功能,本試驗對EP1基因進行了組織分布分析。以豬骨髓cDNA為模板克隆了豬EP1基因的開放閱讀框,對克隆的基因序列進行了序列分析,用非酶連接技術將此基因克隆至丙酸誘導型原核表達載體pBbB3a-His6-MBP-LIC中。用菌液PCR進行陽性克隆鑒定并測序,將測序鑒定正確的克隆菌液提取質粒,轉化至E.coli BL21(DE3)中。丙酸鈉誘導表達His6-MBP-EP1融合蛋白,并用Western blot進行鑒定。結果顯示:本試驗成功克隆了豬EP1基因,長度為651bp,豬EP1基因在骨髓中的表達量很高;構建了EP1丙酸誘導型原核表達載體pBbB3a-His6-MBP-EP1;His6-MBP-EP1融合蛋白在裂解菌液的上清中表達,相對分子質量為65560。結果表明,運用大腸桿菌表達系統(tǒng)成功表達EP1基因融合蛋白,為進一步在體外開展豬EP1基因生物學功能的研究提供基礎。
[Abstract]:In order to further study the biological function of EP1 gene in vitro , an open reading frame of EP1 gene was cloned from pig bone marrow cDNA . The cloned gene was cloned into E . coli BL21 ( DE3 ) . The expression of His6 - MBP - EP1 fusion protein was cloned into E . coli BL21 ( DE3 ) . The results showed that the EP1 gene was successfully cloned into E . coli BL21 ( DE3 ) .

【作者單位】： 河南農業(yè)大學農業(yè)部動物生化與營養(yǎng)重點開放實驗室;
【基金】：農業(yè)部“948”重點計劃資助項目(2011-G35) 河南省重點科技攻關資助項目(112102310705)
【分類號】：Q78

【參考文獻】

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【共引文獻】

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本文編號：1538926