發(fā)布時間：2018-02-26 12:29

  本文關鍵詞： SD大鼠 醋酸鎘 α-硫辛酸 氧化損傷 縫隙連接通訊　出處：《揚州大學》2015年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：為探討鎘和a-硫辛酸((α-LA)對大鼠肝腎功能的影響以及此過程中細胞縫隙通訊功能(GJIC)的變化。本研究采用體內建模的方法,100 g雌性SD大鼠30只預飼1周后,隨機分為3組,每組10只,分別為對照組(Control)、鎘組(Cd)、鎘與a-硫辛酸共同處理組(Cd+a-LA)。對照組實驗大鼠自由飲用超純水(DDW),鎘組大鼠50 mg/L的醋酸鎘自由飲水,鎘與α-硫辛酸共同處理組在醋酸鎘自由飲水的同時進行每公斤體重50mg (50mg/kg.bw) a-硫辛酸灌胃。①試驗12周內,每天定時測定各組大鼠的采食量和體重,在試驗第4周、8周對各組大鼠進行眼眶靜脈叢采血,進行血常規(guī)檢測,并測定血清中丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、血清堿性磷酸酶(ALP)活性及總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)的含量。②試驗結束后進行血常規(guī)以及血清中生化相關指標檢測的同時,測定各組大鼠血清、肝臟、腎臟中超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)的活性以及丙二醛(MDA)、鎘的含量。③采用透射電鏡以及光學顯微鏡觀察各組大鼠的肝臟、腎皮質的病理、超微結構變化。④采用切開熒光染料標記傳輸示蹤法(IL/DT)對各組肝臟細胞間縫隙連接通訊功能進行檢測。利用Westemblot檢測各組大鼠肝臟、腎臟中Cx43、p-Cx43、Cx32蛋白表達變化。⑤采用熒光定量PCR法檢測試驗結束后各組大鼠肝臟、腎臟中Cx32、Cx26、Cx43mRNA表達量的變化。結果表明：①試驗4周后,各組大鼠血液紅細胞數(shù)、血紅蛋白含量以及肝腎功能相關指標(ALB、AST、ALT、BUN、UA、TP、ALP)變化不明顯。試驗8周、12周鎘組大鼠血清ALB、AST、ALT、BUN、UA含量顯著或極顯著高于對照組(p0.05或p0.01),而TP、ALP含量顯著或極顯著低于對照組(p0.05或p0.01),紅細胞數(shù)、血紅蛋白含量顯著或極顯著低于對照組(p0.05或p0.01),而鎘與α-硫辛酸共同處理組在不同時間與對照組相比均差異不明顯(p0.05)。②試驗12周后,與對照組相比,鎘組大鼠血清、肝臟、腎臟中SOD、CAT、GSH-Px活性顯著或極顯著的降低(p0.05或p0.01),MDA含量呈顯著或極顯著升高(p0.05或p0.01)；而鎘與a-硫辛酸共同處理組與對照組相比差異顯著或不顯著(p0.05或p0.05)。③鎘組肝腎病理變化表現(xiàn)為肝臟中央靜脈周圍脂肪變性、匯管區(qū)膽管上皮增生,腎皮質腎小球萎縮。鎘與α-硫辛酸共同處理組肝細胞輕度的脂肪變性,腎小球上皮細胞顆粒變性。電鏡結果顯示：鎘組大鼠腎皮質、肝臟細胞器損傷明顯,表現(xiàn)為細胞核濃縮,核內染色質分布不均勻,線粒體脊完全消失、模糊。而鎘與α-硫辛酸共同處理組大鼠肝腎超微結構變化相對較輕。④IL/DT結果顯示,鎘組、鎘與α-硫辛酸共同處理組肝細胞兩側熒光黃(LY)擴散距離極顯著低于對照組(p0.01),而鎘與α-硫辛酸共同處理組兩側LY擴散距離極顯著高于鎘組(p0.01)；與對照組相比,鎘組、鎘與α-硫辛酸共同處理組肝腎中連接蛋白43(Cx43)、磷酸化連接蛋白43(p-Cx43)、連接蛋白32(Cx32)蛋白表達量呈顯著或極顯著的降低(p0.05或p0.01),而鎘與α-硫辛酸共同處理組的連接蛋白表達水平顯著或極顯著的高于鎘組(p0.05或p0.01)。⑤鎘組、鎘與α-硫辛酸共同處理組大鼠肝腎中Cx43、Cx32、Cx26 mRNA轉錄基因表達與對照組相比均顯著或極顯著的降低(p0.05或p0.01),鎘與α-硫辛酸共同處理組與鎘組相比呈顯著或極顯著升高(p0.05或p0.01)。結論：①a-硫辛酸能夠保護鎘對大鼠肝腎功能以及血液常規(guī)指標的毒性變化,試驗期越長α-硫辛酸保護作用越明顯；②鎘可以引起大鼠血清以及肝腎中抗氧化物酶活性的降低以及脂質過氧化產物的升高,α-硫辛酸能提高機體的抗氧化功能而保護鎘的毒性；③鎘引起大鼠多種組織發(fā)生明顯的病理學變化,肝臟和腎臟較嚴重,尤其是細胞核、線粒體損傷嚴重,α-硫辛酸能緩解這些損傷；④鎘能降低大鼠肝腎細胞縫隙連接相關蛋白表達水平,對大鼠肝腎細胞中細胞縫隙通訊功能(GJIC)產生了抑制作用,α-硫辛酸能使肝腎細胞間連接蛋白發(fā)生變化,上調GJIC而起到保護作用。
[Abstract]:In order to study the effects of cadmium and alpha - lipoic acid ( 偽 - LA ) on the liver and kidney function of rats and the changes of cellular gap communication function ( GJIC ) in this process . The changes of serum ALB , AST , ALT , BUN and UA in cadmium and 偽 - lipoic acid group were significantly lower than those in control group ( P 0.05 or 0.01 ) . Cadmium can induce the decrease of antioxidant enzyme activity in rat serum and liver and kidney and the increase of lipid peroxidation products .

【學位授予單位】：揚州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S852.3

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本文編號：1538018