本文關(guān)鍵詞： 綿羊肺炎支原體 p蛋白 表達　出處：《中國畜牧獸醫(yī)》2017年02期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為分析綿羊肺炎支原體(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)膜表面脂蛋白p60的免疫學(xué)特性,本研究分別擴增p60蛋白N端與C端的基因,并通過重疊延伸PCR將C端基因序列中的TGA(1 459-1 461bp)定點突變?yōu)橥x密碼子TGG。將擴增的基因片段分別插入到pET-32a(+)表達載體上,重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21(DE3)感受態(tài)細胞中進行誘導(dǎo)表達,得到分子質(zhì)量約57ku的p60-N蛋白和分子質(zhì)量約為30.5ku的p60-C蛋白;再對純化后的重組蛋白進行Western blotting分析,結(jié)果表明重組蛋白均可與MO陽性血清發(fā)生特異性免疫學(xué)反應(yīng),表明表達的重組蛋白p60-N和p60-C均有良好的反應(yīng)原性。本研究為篩選MO主要的免疫原性蛋白和建立特異的血清學(xué)診斷方法提供了依據(jù)。
[Abstract]:In order to analyze the immunological characteristics of membrane surface lipoprotein p60 of Mycoplasma ovis pneumoniae MOA, the N-terminal and C-terminal genes of p60 protein were amplified, respectively. The TGA(1 459-1 461bp in C terminal gene sequence was mutated into synonymous codon TGG by overlapping extension PCR. The amplified gene fragments were inserted into pET-32a () expression vector, respectively. The recombinant plasmids were transformed into Escherichia coli BL21DE3) and induced to express the p60-N protein with molecular weight of 57ku and p60-C protein with molecular weight of 30.5ku. The purified recombinant protein was analyzed by Western blotting. The results showed that the recombinant protein could react specifically with MO positive serum. The results showed that the recombinant proteins p60-N and p60-C had good reactivity. This study provided a basis for screening the major immunogenic proteins of MO and establishing a specific serological diagnostic method.
【作者單位】： 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院微生物與免疫實驗室;
【基金】：內(nèi)蒙古自治區(qū)科技計劃“舍飼肉羊疫病動態(tài)防控關(guān)鍵技術(shù)研究”(201502070) 國家科技支撐計劃“重點牧區(qū)”生產(chǎn)生態(tài)生活“保障技術(shù)集成與示范”(2012BAD13B00)
【分類號】：S852.62

【參考文獻】

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2 張悅;劉茂軍;邵國青;;豬肺炎支原體主要抗原蛋白的研究進展[J];中國農(nóng)學(xué)通報;2013年02期

3 王建昌;吳春濤;牛鐘相;;綿羊肺炎支原體Y-98株外膜蛋白成分分析及其免疫原性研究[J];西南農(nóng)業(yè)學(xué)報;2007年01期

【共引文獻】

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3 劉思遠;王琳;楊琳娜;高玉喬;趙寶華;;豬肺炎支原體168弱毒株P(guān)65基因的原核表達及鑒定[J];動物醫(yī)學(xué)進展;2015年04期

4 陳誠;喬軍;孟慶玲;劉田莉;胡政香;馬玉;才學(xué)鵬;陳創(chuàng)夫;;綿羊肺炎支原體新疆流行株膜蛋白p56基因的克隆及分子特征分析[J];基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué);2014年06期

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6 吉瑪;娘洛;張淑云;;豬肺炎支原體巢式PCR診斷方法的建立及應(yīng)用[J];家畜生態(tài)學(xué)報;2014年03期

7 劉茂軍;張悅;杜改梅;白昀;王海燕;姜平;邵國青;;豬肺炎支原體P65基因原核表達及免疫原性分析[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報;2014年02期

8 才讓卓瑪;宋秀紅;;豬肺炎支原體黏附因子P97蛋白的高效表達與鑒定[J];畜牧與獸醫(yī);2013年11期

9 李瑩瑩;何穎;趙武;李斌;秦毅斌;盧冰霞;梁家幸;陸芹章;;豬支原體肺炎研究進展[J];動物醫(yī)學(xué)進展;2013年10期

10 楊發(fā)龍;張賢宇;湯承;岳華;;綿羊肺炎支原體P113蛋白C端重復(fù)區(qū)的表達及其免疫原性[J];中國獸醫(yī)科學(xué);2013年07期

【二級參考文獻】

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6 劉茂軍;邵國青;張映;;豬肺炎支原體不同毒力株黏附因子基因序列分析[J];江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報;2010年03期

7 張萍慧;郝永清;張愛榮;范利霞;白龍;;綿羊肺炎支原體的分離與鑒定[J];畜牧與飼料科學(xué);2010年01期

8 劉志宗;葛亞明;寧紅梅;張映;聶向庭;;豬肺炎支原體P46基因特異性噬菌體隨機肽庫的構(gòu)建[J];畜牧與獸醫(yī);2009年10期

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10 曹培麗;李媛;陳超;郭丹;辛九慶;李繼昌;;豬肺炎支原體P52蛋白的原核表達及抗血清制備[J];中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報;2009年07期

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3 ;[J];;年期

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