發(fā)布時(shí)間：2018-02-25 17:43

  本文關(guān)鍵詞： 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 美洲型 多重RT-PCR 野毒株 疫苗株　出處：《中國畜牧獸醫(yī)》2017年03期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為建立豬繁殖與呼吸綜合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的快速鑒別檢測方法,本研究針對(duì)PRRSV美洲型經(jīng)典株、高致病性變異株以及TJM-F92疫苗株的Nsp2基因序列特點(diǎn),設(shè)計(jì)2對(duì)特異性引物。經(jīng)優(yōu)化反應(yīng)條件后,建立了能同時(shí)檢測并區(qū)分PRRSV美洲型經(jīng)典株、變異株及疫苗株的多重RT-PCR方法。該方法特異性強(qiáng),與豬其他病毒間不存在交叉反應(yīng);敏感性高,對(duì)重組質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的檢出下限為1.13×103拷貝/μL。應(yīng)用所建立的方法對(duì)349份臨床疑似病料進(jìn)行檢測,結(jié)果檢出PRRSV陽性119份,其中美洲型經(jīng)典株5份、變異株107份、TJM-F92疫苗株7份,且有變異株和TJM-F92疫苗株混合陽性7份。表明本研究成功建立了PRRSV美洲型經(jīng)典株、變異株及TJM-F92疫苗株的多重RT-PCR鑒別檢測方法,可用于PRRSV的臨床檢測及流行病學(xué)調(diào)查。
[Abstract]:In order to establish a rapid identification and detection method for porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSVV) of porcine reproductive and respiratory syndrome virus, this study aimed at the Nsp2 gene sequence characteristics of PRRSV American classic strain, highly pathogenic variant strain and TJM-F92 vaccine strain. Two pairs of specific primers were designed. After optimizing the reaction conditions, a multiplex RT-PCR method was established to simultaneously detect and distinguish the classical PRRSV strains, variant strains and vaccine strains. The method was highly specific and had no cross reaction with other porcine viruses. The detection limit of the standard plasmid was 1.13 脳 10 ~ 3 copies / 渭 L. the results showed that there were 119 PRRSV positive samples, 5 of which were American classical strains, using the established method to detect 349 clinical suspected samples, and the results were as follows: (1) the detection limit of the recombinant plasmid was 1.13 脳 10 ~ 3 copies / 渭 L. There were 7 strains of TJM-F92 vaccine strains and 7 strains of mixed positive strains of PRRSV and TJM-F92 vaccine strains. The results showed that the method of identification and detection of PRRSV American classic strains, variant strains and TJM-F92 vaccine strains was successfully established in this study. It can be used for clinical detection and epidemiological investigation of PRRSV.
【作者單位】： 廣西動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心;廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【基金】：廣西科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(桂科轉(zhuǎn)14125004-22)
【分類號(hào)】：S852.65

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本文編號(hào)：1534540