狂犬病病毒G蛋白V區(qū)特異性單克隆抗體的制備與鑒定
本文關(guān)鍵詞: 狂犬病病毒 糖蛋白 真核表達 單克隆抗體 出處:《中國獸醫(yī)科學》2017年05期 論文類型:期刊論文
【摘要】:為制備狂犬病病毒糖蛋白(G蛋白)特異性單克隆抗體(McAb)及鑒定其識別范圍,采用人工合成多肽"PPDQLVNLHDFRSDEIEHLVVEE"與KLH的偶聯(lián)物免疫小鼠,經(jīng)篩選制備出1株陽性雜交瘤細胞,記作4D3,其亞類鑒定為IgG2b/κ鏈。構(gòu)建了真核表達載體pCAGGS-G/pCAGGS-13G,經(jīng)鑒定可正確表達G蛋白,用于鑒定McAb。免疫熒光與Western-blot分析顯示,該株McAb與真核表達的人工減毒株LBNSE G蛋白可發(fā)生特異反應,而與強毒株IMDRV-13的G蛋白不反應。本試驗結(jié)果可為進一步研究G蛋白的結(jié)構(gòu)、功能和毒株的初步篩查提供參考。
[Abstract]:In order to prepare monoclonal antibody against rabies virus glycoprotein (G protein) and identify its recognition range, mice were immunized with a conjugate of synthetic polypeptide "PPDQLVNLHDFRSDEIEHLVVEE" and KLH. The eukaryotic expression vector pCAGS-G / pCAGGS-13G was constructed. The recombinant plasmid pCAGS-G / pCAGGS-13G was identified and used to identify the G protein. Immunofluorescence and Western-blot analysis showed that the McAb could react specifically with the LBNSE G protein. The results can provide a reference for further study on the structure, function and screening of G protein.
【作者單位】: 中國農(nóng)業(yè)科學院特產(chǎn)研究所特種經(jīng)濟動物分子生物學重點實驗室;內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學獸醫(yī)學院;
【基金】:公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(201303042) 國家自然科學基金面上項目(31572505)
【分類號】:S852.655
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,本文編號:1528432
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