狂犬病病毒G蛋白V區(qū)特異性單克隆抗體的制備與鑒定
本文關(guān)鍵詞: 狂犬病病毒 糖蛋白 真核表達(dá) 單克隆抗體 出處:《中國(guó)獸醫(yī)科學(xué)》2017年05期 論文類型:期刊論文
【摘要】:為制備狂犬病病毒糖蛋白(G蛋白)特異性單克隆抗體(McAb)及鑒定其識(shí)別范圍,采用人工合成多肽"PPDQLVNLHDFRSDEIEHLVVEE"與KLH的偶聯(lián)物免疫小鼠,經(jīng)篩選制備出1株陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞,記作4D3,其亞類鑒定為IgG2b/κ鏈。構(gòu)建了真核表達(dá)載體pCAGGS-G/pCAGGS-13G,經(jīng)鑒定可正確表達(dá)G蛋白,用于鑒定McAb。免疫熒光與Western-blot分析顯示,該株McAb與真核表達(dá)的人工減毒株LBNSE G蛋白可發(fā)生特異反應(yīng),而與強(qiáng)毒株IMDRV-13的G蛋白不反應(yīng)。本試驗(yàn)結(jié)果可為進(jìn)一步研究G蛋白的結(jié)構(gòu)、功能和毒株的初步篩查提供參考。
[Abstract]:In order to prepare monoclonal antibody against rabies virus glycoprotein (G protein) and identify its recognition range, mice were immunized with a conjugate of synthetic polypeptide "PPDQLVNLHDFRSDEIEHLVVEE" and KLH. The eukaryotic expression vector pCAGS-G / pCAGGS-13G was constructed. The recombinant plasmid pCAGS-G / pCAGGS-13G was identified and used to identify the G protein. Immunofluorescence and Western-blot analysis showed that the McAb could react specifically with the LBNSE G protein. The results can provide a reference for further study on the structure, function and screening of G protein.
【作者單位】: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院;
【基金】:公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201303042) 國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31572505)
【分類號(hào)】:S852.655
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,本文編號(hào):1528432
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