本文關(guān)鍵詞： 農(nóng)畜產(chǎn)品 山西市場 檢測 載體構(gòu)建 抗草甘膦除草劑 轉(zhuǎn)基因大豆GTS40-3-2 SD大鼠 毒理學(xué)　出處：《山西農(nóng)業(yè)大學(xué)》2015年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：[目的]轉(zhuǎn)基因作物在全球范圍內(nèi)的廣泛種植促進了糧食產(chǎn)量的增加,緩解了人類的貧困和饑餓以及因殺蟲劑的使用而帶來的環(huán)境等問題,為全球特別是發(fā)展中國家和地區(qū)的經(jīng)濟、環(huán)境以及社會福利等方面帶來了持續(xù)可觀的巨大利益。然而,生物安全性問題從轉(zhuǎn)基因作物誕生之日起就與之相伴,其爭論從未停止過。盡管,在進行商業(yè)化之前轉(zhuǎn)基因作物及其產(chǎn)品已經(jīng)過了嚴格的一系列毒理學(xué)認證,但目前的轉(zhuǎn)基因作物及其產(chǎn)品的安全性試驗大多數(shù)僅限于動物短期喂養(yǎng)觀察試驗,對轉(zhuǎn)基因作物及其產(chǎn)品的長期攝入所帶來的慢性影響缺乏相關(guān)試驗數(shù)據(jù),且對人體的影響缺乏有效的論證。本論文從動物飼料轉(zhuǎn)基因成分檢測入手,進而針對人們的日常膳食肉、蛋、奶和油進行全面的轉(zhuǎn)基因成分調(diào)查研究,最后進行SD大鼠的長期慢性動物飼養(yǎng),旨在為我國轉(zhuǎn)基因飼料飼用安全性評價體系提供試驗數(shù)據(jù)支持,同時也對來源于轉(zhuǎn)基因作物的原材料產(chǎn)品的合理應(yīng)用以及通過轉(zhuǎn)基因飼料喂養(yǎng)動物所產(chǎn)生的農(nóng)畜產(chǎn)品的安全性評價具有重要的現(xiàn)實和理論意義。[方法]采用定性PCR方法檢測了30份山西市場上蛋雞和豬飼料中的轉(zhuǎn)基因成分;應(yīng)用重疊PCR方法,采用基因的克隆、轉(zhuǎn)化和表達,構(gòu)建了標準質(zhì)粒分子;利用構(gòu)建的標準質(zhì)粒分子,進行了山西市場上肉、蛋、奶和油等農(nóng)畜產(chǎn)品中轉(zhuǎn)基因成分定性、定量及ELISA蛋白檢測;模擬了轉(zhuǎn)基因抗草甘膦除草劑大豆GTS40-3-2長期喂養(yǎng)大鼠動物模型,采用組織切片、血液學(xué)與血液生化學(xué)指標、定性和定量及ELISA蛋白檢測等方法來探討轉(zhuǎn)基因大豆成分對大鼠的毒性作用及殘留情況。[結(jié)果](1)抽檢山西市場上飼料共計30份,包括20家不同廠家的雞和豬不同發(fā)育期飼料,品種具有代表性,覆蓋面廣。其中25個飼料樣品檢測結(jié)果為陽性,陽性占有率為83.3%。而陽性樣品中僅有1個飼料樣品標明含有“轉(zhuǎn)基因”成分,轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品標識率僅為4%。試驗結(jié)果表明：雞和豬飼料中大多含有大豆轉(zhuǎn)化體事件GTS40-3-2,有少量飼料含有玉米轉(zhuǎn)化體事件MON810。(2)利用定性PCR和重疊PCR技術(shù),將四個基因成功通過分子克隆的方法克隆到一個質(zhì)粒載體分子中,在后續(xù)的定性和定量PCR檢測中用作陽性標準品。(3)對山西市場肉、蛋、奶和油等農(nóng)畜產(chǎn)品進行轉(zhuǎn)基因生物產(chǎn)品成分相關(guān)基因及蛋白檢測。在進行動物飼料相關(guān)基因檢測中發(fā)現(xiàn)所有抽查的11家農(nóng)戶所喂養(yǎng)動物的飼料全部含有轉(zhuǎn)基因成分,特別是含有大豆GTS40-3-2特異轉(zhuǎn)化體事件。隨后試驗收集這11家農(nóng)戶所飼養(yǎng)動物的糞便進行相關(guān)基因檢測,除了含有真核生物核糖體特異的基因18SrDNA外,都未檢測到相關(guān)基因。對所抽查的一戶農(nóng)家的10只肉雞進行了轉(zhuǎn)基因大豆GTS40-3-2在肉雞體內(nèi)代謝殘留的研究,無論是定性和定量還是蛋白檢測,都檢測到肉雞的盲腸內(nèi)容物和腸糞中含有轉(zhuǎn)基因成分,肉雞的其它實質(zhì)臟器未發(fā)現(xiàn)含有轉(zhuǎn)基因成分。此外,對山西市場食用油及豬肉、雞蛋和牛奶進行了相關(guān)基因及蛋白檢測,發(fā)現(xiàn)除了豬的腸內(nèi)容物含有轉(zhuǎn)基因成分外,其它實質(zhì)臟器都未檢測到轉(zhuǎn)基因成分的相關(guān)基因及蛋白。14份食用油檢測到有13個油樣含不同含量的大豆內(nèi)標Lectin基因,只有2個油樣檢測出含有極低拷貝的GTS40-3-2基因。(4)通過添加含有大豆轉(zhuǎn)化體事件GTS40-3-2的豆粕作為飼料喂養(yǎng)一代和二代SD大鼠,試驗測定了大鼠的周增重、飼料消耗、血液學(xué)指標、血液生化指標以及組織病理切片觀察等指標,都未發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因組和非轉(zhuǎn)基因組有統(tǒng)計學(xué)意義的顯著差異。試驗對大鼠的腸道菌群以及臟器進行了與飼料相關(guān)基因的定性和定量檢測以及ELISA蛋白檢測,只有大鼠腸糞和盲腸內(nèi)容物檢測到有轉(zhuǎn)基因成分的殘留,大鼠的腸道菌群和實質(zhì)臟器都未檢出有轉(zhuǎn)基因成分的殘留。[結(jié)論]通過定性PCR、實時熒光定量PCR、切片技術(shù)和ELISA蛋白檢測等方法對山西市場上的動物飼料、豬臟器、肉雞臟器、雞蛋、牛奶、食用油和SD大鼠長期喂養(yǎng)進行試驗。研究結(jié)果揭示：山西市場上的動物飼料中普遍含有轉(zhuǎn)基因成分,但對這些飼料喂養(yǎng)的動物所產(chǎn)生的豬肉、肉雞、雞蛋和牛奶等農(nóng)畜產(chǎn)品進行飼料相關(guān)的定性、定量及ELISA檢測,均未發(fā)現(xiàn)有相關(guān)轉(zhuǎn)基因成分和蛋白的殘留；食用油的檢測結(jié)果顯示樣品含有低拷貝內(nèi)源基因,少數(shù)樣品含有極低拷貝的外源基因。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S816

【參考文獻】

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1 陳德龍;張蒔眉;鄒世穎;劉一非;周忻;賀曉云;黃昆侖;;轉(zhuǎn)基因耐草甘膦除草劑玉米CC-2喂養(yǎng)SD大鼠90天亞慢性毒性研究[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報;2013年12期

2 王榮談;姜羽;韋嬌君;張大兵;楊立桃;;轉(zhuǎn)基因生物及其產(chǎn)品的標識與檢測[J];植物生理學(xué)報;2013年07期

3 許安君;;實時熒光定量PCR技術(shù)在糧油轉(zhuǎn)基因成分檢測中的應(yīng)用[J];糧油食品科技;2013年02期

4 張思璐;劉云霄;張浩琪;CHIN James;吳希陽;;屬特異性T-RFLP技術(shù)用于乳酸桿菌的群落分析[J];微生物學(xué)通報;2012年08期

5 蘆春斌;張偉;劉標;;抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆飼料對雄性小鼠脾淋巴細胞體外增殖的影響[J];大豆科學(xué);2012年02期

6 Clive James;;2011年全球生物技術(shù)/轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化發(fā)展態(tài)勢[J];中國生物工程雜志;2012年01期

7 袁建琴;史宗勇;高斌戰(zhàn);鄭明學(xué);;綿羊痘病毒的分離及雙抗夾心法ELISA的建立[J];山西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2010年06期

8 李麗婷;許文濤;郭星;姚業(yè)成;黃昆侖;;提取鼠腸道內(nèi)微生物基因組DNA的方法研究[J];中國糧油學(xué)報;2010年01期

9 陶新;徐子偉;鄧波;李永明;劉敏華;;少量動物糞便細菌總DNA提取方法的研究[J];中國畜牧雜志;2009年23期

10 王榮談;劉冬兒;厲建萌;張大兵;楊立桃;;實時熒光定量PCR技術(shù)及其在植物轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測中的應(yīng)用[J];植物生理學(xué)通訊;2009年06期

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本文編號：1521784