本文關(guān)鍵詞： 農(nóng)畜產(chǎn)品 山西市場(chǎng) 檢測(cè) 載體構(gòu)建 抗草甘膦除草劑 轉(zhuǎn)基因大豆GTS40-3-2 SD大鼠 毒理學(xué)　出處：《山西農(nóng)業(yè)大學(xué)》2015年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：[目的]轉(zhuǎn)基因作物在全球范圍內(nèi)的廣泛種植促進(jìn)了糧食產(chǎn)量的增加,緩解了人類的貧困和饑餓以及因殺蟲(chóng)劑的使用而帶來(lái)的環(huán)境等問(wèn)題,為全球特別是發(fā)展中國(guó)家和地區(qū)的經(jīng)濟(jì)、環(huán)境以及社會(huì)福利等方面帶來(lái)了持續(xù)可觀的巨大利益。然而,生物安全性問(wèn)題從轉(zhuǎn)基因作物誕生之日起就與之相伴,其爭(zhēng)論從未停止過(guò)。盡管,在進(jìn)行商業(yè)化之前轉(zhuǎn)基因作物及其產(chǎn)品已經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的一系列毒理學(xué)認(rèn)證,但目前的轉(zhuǎn)基因作物及其產(chǎn)品的安全性試驗(yàn)大多數(shù)僅限于動(dòng)物短期喂養(yǎng)觀察試驗(yàn),對(duì)轉(zhuǎn)基因作物及其產(chǎn)品的長(zhǎng)期攝入所帶來(lái)的慢性影響缺乏相關(guān)試驗(yàn)數(shù)據(jù),且對(duì)人體的影響缺乏有效的論證。本論文從動(dòng)物飼料轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)入手,進(jìn)而針對(duì)人們的日常膳食肉、蛋、奶和油進(jìn)行全面的轉(zhuǎn)基因成分調(diào)查研究,最后進(jìn)行SD大鼠的長(zhǎng)期慢性動(dòng)物飼養(yǎng),旨在為我國(guó)轉(zhuǎn)基因飼料飼用安全性評(píng)價(jià)體系提供試驗(yàn)數(shù)據(jù)支持,同時(shí)也對(duì)來(lái)源于轉(zhuǎn)基因作物的原材料產(chǎn)品的合理應(yīng)用以及通過(guò)轉(zhuǎn)基因飼料喂養(yǎng)動(dòng)物所產(chǎn)生的農(nóng)畜產(chǎn)品的安全性評(píng)價(jià)具有重要的現(xiàn)實(shí)和理論意義。[方法]采用定性PCR方法檢測(cè)了30份山西市場(chǎng)上蛋雞和豬飼料中的轉(zhuǎn)基因成分;應(yīng)用重疊PCR方法,采用基因的克隆、轉(zhuǎn)化和表達(dá),構(gòu)建了標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒分子;利用構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒分子,進(jìn)行了山西市場(chǎng)上肉、蛋、奶和油等農(nóng)畜產(chǎn)品中轉(zhuǎn)基因成分定性、定量及ELISA蛋白檢測(cè);模擬了轉(zhuǎn)基因抗草甘膦除草劑大豆GTS40-3-2長(zhǎng)期喂養(yǎng)大鼠動(dòng)物模型,采用組織切片、血液學(xué)與血液生化學(xué)指標(biāo)、定性和定量及ELISA蛋白檢測(cè)等方法來(lái)探討轉(zhuǎn)基因大豆成分對(duì)大鼠的毒性作用及殘留情況。[結(jié)果](1)抽檢山西市場(chǎng)上飼料共計(jì)30份,包括20家不同廠家的雞和豬不同發(fā)育期飼料,品種具有代表性,覆蓋面廣。其中25個(gè)飼料樣品檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性,陽(yáng)性占有率為83.3%。而陽(yáng)性樣品中僅有1個(gè)飼料樣品標(biāo)明含有“轉(zhuǎn)基因”成分,轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品標(biāo)識(shí)率僅為4%。試驗(yàn)結(jié)果表明：雞和豬飼料中大多含有大豆轉(zhuǎn)化體事件GTS40-3-2,有少量飼料含有玉米轉(zhuǎn)化體事件MON810。(2)利用定性PCR和重疊PCR技術(shù),將四個(gè)基因成功通過(guò)分子克隆的方法克隆到一個(gè)質(zhì)粒載體分子中,在后續(xù)的定性和定量PCR檢測(cè)中用作陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品。(3)對(duì)山西市場(chǎng)肉、蛋、奶和油等農(nóng)畜產(chǎn)品進(jìn)行轉(zhuǎn)基因生物產(chǎn)品成分相關(guān)基因及蛋白檢測(cè)。在進(jìn)行動(dòng)物飼料相關(guān)基因檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)所有抽查的11家農(nóng)戶所喂養(yǎng)動(dòng)物的飼料全部含有轉(zhuǎn)基因成分,特別是含有大豆GTS40-3-2特異轉(zhuǎn)化體事件。隨后試驗(yàn)收集這11家農(nóng)戶所飼養(yǎng)動(dòng)物的糞便進(jìn)行相關(guān)基因檢測(cè),除了含有真核生物核糖體特異的基因18SrDNA外,都未檢測(cè)到相關(guān)基因。對(duì)所抽查的一戶農(nóng)家的10只肉雞進(jìn)行了轉(zhuǎn)基因大豆GTS40-3-2在肉雞體內(nèi)代謝殘留的研究,無(wú)論是定性和定量還是蛋白檢測(cè),都檢測(cè)到肉雞的盲腸內(nèi)容物和腸糞中含有轉(zhuǎn)基因成分,肉雞的其它實(shí)質(zhì)臟器未發(fā)現(xiàn)含有轉(zhuǎn)基因成分。此外,對(duì)山西市場(chǎng)食用油及豬肉、雞蛋和牛奶進(jìn)行了相關(guān)基因及蛋白檢測(cè),發(fā)現(xiàn)除了豬的腸內(nèi)容物含有轉(zhuǎn)基因成分外,其它實(shí)質(zhì)臟器都未檢測(cè)到轉(zhuǎn)基因成分的相關(guān)基因及蛋白。14份食用油檢測(cè)到有13個(gè)油樣含不同含量的大豆內(nèi)標(biāo)Lectin基因,只有2個(gè)油樣檢測(cè)出含有極低拷貝的GTS40-3-2基因。(4)通過(guò)添加含有大豆轉(zhuǎn)化體事件GTS40-3-2的豆粕作為飼料喂養(yǎng)一代和二代SD大鼠,試驗(yàn)測(cè)定了大鼠的周增重、飼料消耗、血液學(xué)指標(biāo)、血液生化指標(biāo)以及組織病理切片觀察等指標(biāo),都未發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因組和非轉(zhuǎn)基因組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的顯著差異。試驗(yàn)對(duì)大鼠的腸道菌群以及臟器進(jìn)行了與飼料相關(guān)基因的定性和定量檢測(cè)以及ELISA蛋白檢測(cè),只有大鼠腸糞和盲腸內(nèi)容物檢測(cè)到有轉(zhuǎn)基因成分的殘留,大鼠的腸道菌群和實(shí)質(zhì)臟器都未檢出有轉(zhuǎn)基因成分的殘留。[結(jié)論]通過(guò)定性PCR、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、切片技術(shù)和ELISA蛋白檢測(cè)等方法對(duì)山西市場(chǎng)上的動(dòng)物飼料、豬臟器、肉雞臟器、雞蛋、牛奶、食用油和SD大鼠長(zhǎng)期喂養(yǎng)進(jìn)行試驗(yàn)。研究結(jié)果揭示：山西市場(chǎng)上的動(dòng)物飼料中普遍含有轉(zhuǎn)基因成分,但對(duì)這些飼料喂養(yǎng)的動(dòng)物所產(chǎn)生的豬肉、肉雞、雞蛋和牛奶等農(nóng)畜產(chǎn)品進(jìn)行飼料相關(guān)的定性、定量及ELISA檢測(cè),均未發(fā)現(xiàn)有相關(guān)轉(zhuǎn)基因成分和蛋白的殘留；食用油的檢測(cè)結(jié)果顯示樣品含有低拷貝內(nèi)源基因,少數(shù)樣品含有極低拷貝的外源基因。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S816

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1521784