本文關(guān)鍵詞： 鴨病毒性肝炎 VP 化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫　出處：《中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年06期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為建立一種快速檢測鴨甲肝病毒1型(DHAV-1)抗體的化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫分析方法(CLEIA),本研究從DHAV-1中國流行株中擴(kuò)增獲得病毒結(jié)構(gòu)蛋白VP1編碼基因,構(gòu)建重組原核表達(dá)質(zhì)粒pET-32a-VP1,并進(jìn)行重組蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)。將純化后的重組VP1蛋白作為檢測抗原建立了CLEIA檢測方法。結(jié)果顯示,利用建立的CLEIA方法對AIV、AMPV、DPV、ARV、MPV、RAV等病毒血清進(jìn)行檢測,均無交叉反應(yīng),特異性強(qiáng);靈敏度高于ELISA方法;重復(fù)性試驗(yàn)變異系數(shù)為2.18%~4.33%,具有較好的重復(fù)性;且與中和試驗(yàn)的陽性符合率和陰性符合率分別為100%和80%。本研究建立的CLEIA方法可以用于DHAV-1感染監(jiān)測及疫苗接種后的免疫評價(jià)。
[Abstract]:In order to establish a chemiluminescent enzyme linked immunosorbent assay for rapid detection of duck hepatitis A virus type 1 (DHAV-1) antibody, the VP1 encoding gene of virus structural protein was obtained from a Chinese epidemic strain of DHAV-1. The recombinant prokaryotic expression plasmid pET-32a-VP1 was constructed, and the recombinant protein was induced to express. The purified recombinant VP1 protein was used as the detection antigen to establish a CLEIA detection method. There was no cross reaction, high specificity, sensitivity higher than ELISA method, the coefficient of variation of reproducibility test was 2.18 and 4.33, which had good repeatability. The positive coincidence rate and negative coincidence rate with neutralization test were 100% and 80 respectively. The CLEIA method established in this study can be used for DHAV-1 infection monitoring and immunization evaluation after vaccination.
【作者單位】： 廣西大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;中國科學(xué)院微生物研究所病原微生物與免疫學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所;
【基金】：國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃“畜禽重大疫病防控與高效安全養(yǎng)殖綜合技術(shù)研發(fā)”重點(diǎn)專項(xiàng)(2016YFD0500800) 中國科學(xué)院重點(diǎn)部署項(xiàng)目(ZDRW-ZS-2016-4-4、KSZD-EW-Z-005-001)
【分類號】：S852.65

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本文編號：1521603