本文關(guān)鍵詞： 山羊 小腸上皮細(xì)胞 細(xì)胞角蛋白 波形蛋白 肌間線蛋白 細(xì)胞模型　出處：《中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報》2017年10期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為研究山羊小腸上皮細(xì)胞營養(yǎng)吸收調(diào)控及其與腸道微生物之間的關(guān)系,提供原代細(xì)胞培養(yǎng)模型,采用組織塊接種來獲得山羊小腸上皮細(xì)胞,利用有限稀釋法來克隆山羊小腸上皮細(xì)胞,并通過細(xì)胞形態(tài)學(xué)以及細(xì)胞角蛋白18、波形蛋白、肌間線蛋白和細(xì)胞生長曲線來鑒定山羊小腸上皮細(xì)胞。結(jié)果表明:1)采用組織塊接種能夠分離純化得到山羊小腸上皮細(xì)胞并穩(wěn)定傳至大約10代;2)RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)山羊小腸上皮細(xì)胞不能夠表達(dá)波形蛋白和肌間線蛋白;3)在正置顯微鏡下觀察到山羊小腸上皮細(xì)胞能夠產(chǎn)生細(xì)胞角蛋白18綠色熒光。研究發(fā)現(xiàn),培養(yǎng)至第8代的山羊小腸上皮細(xì)胞仍然保持著上皮細(xì)胞的特征,至10代山羊小腸上皮細(xì)胞質(zhì)變大,細(xì)胞幾乎無法增殖,細(xì)胞開始凋亡。綜上所述,采用組織塊接種能夠獲得山羊小腸上皮細(xì)胞并正常傳至第10代,可為研究山羊小腸上皮細(xì)胞營養(yǎng)物質(zhì)吸收和調(diào)控機(jī)理提供細(xì)胞素材。
[Abstract]:In order to study the regulation of nutrient absorption of goat intestinal epithelial cells and their relationship with intestinal microorganism, the primary culture model of goat small intestinal epithelial cells was obtained by tissue block inoculation. Goat small intestinal epithelial cells were cloned by a limited dilution method, and by cell morphology and cytokeratin 18, vimentin. Myofiline and cell growth curves were used to identify goat small intestinal epithelial cells. The results showed that small intestinal epithelial cells could be isolated and purified by tissue mass inoculation and transferred steadily to about 10 passages of small intestine by RT-PCR. Epithelial cells were not able to express vimentin and myoflinin-3) under a positive microscope, goat small intestinal epithelial cells were observed to produce cytokeratin 18 green fluorescence. Goat small intestinal epithelial cells cultured up to the 8th passage still retain the characteristics of epithelial cells, and by the 10th passage goat intestinal epithelial cells become larger, the cells can hardly proliferate, and the cells begin to apoptosis. Goat small intestinal epithelial cells could be obtained by tissue mass inoculation and passed to the tenth passage, which could provide material for studying the absorption and regulation mechanism of nutrients in goat intestinal epithelial cells.
【作者單位】： 江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院;揚(yáng)州大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;
【基金】：江蘇高校品牌專業(yè)建設(shè)工程資助項目(PPZY2015A083)
【分類號】：S827

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本文編號：1516572