本文關(guān)鍵詞： 豬流行性腹瀉病毒 野毒株 疫苗株 雙重PCR　出處：《中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報》2017年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為建立鑒別豬流行性腹瀉病毒野毒株與疫苗株的檢測方法,本研究根據(jù)GenBank中登錄的豬流行性腹瀉病毒(PEDV)M、ORF3基因序列,設(shè)計合成了2對特異性引物,通過PCR擴增條件的優(yōu)化,建立了鑒別PEDV野毒株和疫苗株的雙重RT-PCR檢測方法。特異性試驗顯示,該檢測方法對豬圓環(huán)病毒2型、豬偽狂犬病毒、豬細小病毒、Salmonella及E.coli等結(jié)果均為陰性;敏感性試驗顯示,所建立的雙重PCR檢測方法對M基因和ORF3基因的最低有效檢測量分別為44.5拷貝/μL和481拷貝/μL。本研究建立的雙重RT-PCR檢測方法可實現(xiàn)對PEDV野毒和疫苗毒的快速檢測,適合于現(xiàn)地豬流行性腹瀉的鑒別診斷。
[Abstract]:In order to establish a method for the identification of wild and vaccine strains of porcine epidemic diarrhea virus, two pairs of specific primers were designed and synthesized according to the sequence of PEDVV MORF3 gene registered in GenBank, and the conditions of PCR amplification were optimized. A double RT-PCR detection method was established for the identification of PEDV wild strain and vaccine strain. The specificity test showed that the detection method was negative for porcine circovirus type 2, porcine pseudorabies virus, porcine parvovirus Salmonella and E. coli, and the sensitivity test showed that the detection method was negative for porcine circovirus type 2, porcine pseudorabies virus, porcine parvovirus and E. coli. The minimum effective detection of M gene and ORF3 gene was 44. 5 copies / 渭 L and 48 1 copies / 渭 L, respectively. The double RT-PCR detection method established in this study could be used to detect PEDV wild virus and vaccine virus quickly. It is suitable for differential diagnosis of epidemic diarrhea in pigs.
【作者單位】： 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院;鄭州市豬重大疫病防控重點實驗室;
【基金】：河南省產(chǎn)學(xué)研合作項目(132107000002、152107000003)
【分類號】：S858.28

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本文編號：1513482