本文關(guān)鍵詞： 豬流行性腹瀉病毒 野毒株 疫苗株 雙重PCR　出處：《中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年05期 　論文類(lèi)型：期刊論文

【摘要】：為建立鑒別豬流行性腹瀉病毒野毒株與疫苗株的檢測(cè)方法,本研究根據(jù)GenBank中登錄的豬流行性腹瀉病毒(PEDV)M、ORF3基因序列,設(shè)計(jì)合成了2對(duì)特異性引物,通過(guò)PCR擴(kuò)增條件的優(yōu)化,建立了鑒別PEDV野毒株和疫苗株的雙重RT-PCR檢測(cè)方法。特異性試驗(yàn)顯示,該檢測(cè)方法對(duì)豬圓環(huán)病毒2型、豬偽狂犬病毒、豬細(xì)小病毒、Salmonella及E.coli等結(jié)果均為陰性;敏感性試驗(yàn)顯示,所建立的雙重PCR檢測(cè)方法對(duì)M基因和ORF3基因的最低有效檢測(cè)量分別為44.5拷貝/μL和481拷貝/μL。本研究建立的雙重RT-PCR檢測(cè)方法可實(shí)現(xiàn)對(duì)PEDV野毒和疫苗毒的快速檢測(cè),適合于現(xiàn)地豬流行性腹瀉的鑒別診斷。
[Abstract]:In order to establish a method for the identification of wild and vaccine strains of porcine epidemic diarrhea virus, two pairs of specific primers were designed and synthesized according to the sequence of PEDVV MORF3 gene registered in GenBank, and the conditions of PCR amplification were optimized. A double RT-PCR detection method was established for the identification of PEDV wild strain and vaccine strain. The specificity test showed that the detection method was negative for porcine circovirus type 2, porcine pseudorabies virus, porcine parvovirus Salmonella and E. coli, and the sensitivity test showed that the detection method was negative for porcine circovirus type 2, porcine pseudorabies virus, porcine parvovirus and E. coli. The minimum effective detection of M gene and ORF3 gene was 44. 5 copies / 渭 L and 48 1 copies / 渭 L, respectively. The double RT-PCR detection method established in this study could be used to detect PEDV wild virus and vaccine virus quickly. It is suitable for differential diagnosis of epidemic diarrhea in pigs.
【作者單位】： 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院;鄭州市豬重大疫病防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：河南省產(chǎn)學(xué)研合作項(xiàng)目(132107000002、152107000003)
【分類(lèi)號(hào)】：S858.28

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