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采用四引物ARMS-PCR方法檢測奶牛乳腺組織DGAT1基因單核苷酸多態(tài)性

發(fā)布時間:2018-02-14 16:34

  本文關(guān)鍵詞: 荷斯坦奶牛 DGAT基因 ARMS-PCR 基因分型 出處:《中國畜牧獸醫(yī)》2017年10期  論文類型:期刊論文


【摘要】:試驗旨在快速有效地檢測泌乳奶牛的二酰甘油轉(zhuǎn)酰基酶1(diacylgycerol acyltransferase 1,DGAT1)乳脂量性狀的優(yōu)勢等位基因K232A單核苷酸多態(tài)性,確定DGAT1基因型進(jìn)而確定泌乳性狀,為中國荷斯坦奶牛分子標(biāo)記輔助選擇提供技術(shù)支持。選取6頭泌乳初期(3頭為高乳產(chǎn)量牛,3頭為低乳產(chǎn)量牛)中國北方荷斯坦奶牛為研究對象,提取乳腺組織基因組DNA,分別設(shè)計1對外引物和1對內(nèi)引物,建立一種四引物ARMS-PCR體系快速檢測奶牛乳腺組織DGAT1基因單核苷酸多態(tài)性。結(jié)果發(fā)現(xiàn),外引物擴(kuò)增片段長度為512 bp,為PCR反應(yīng)的陽性對照,基因型為232K擴(kuò)增片段長度為369 bp,基因型為232A擴(kuò)增片段長度為181 bp。PCR結(jié)果顯示,6頭牛的乳腺組織樣本均由外部引物擴(kuò)增出長度為512 bp的片段,泌乳期高乳產(chǎn)量奶牛和泌乳期低乳產(chǎn)量奶牛乳腺組織的特異性擴(kuò)增片段長度均為181 bp。表明本研究選取的6頭奶牛樣本DGAT1基因K232A多態(tài)性均為232A型。提示該PCR鑒定方法能夠快速有效地鑒定奶牛DGAT1基因型,可用于中國荷斯坦奶牛分子標(biāo)記輔助選擇。
[Abstract]:The aim of the experiment was to detect the dominant allele K232A single nucleotide polymorphism of diacylglycerol transacylgycerol acyltransferase 1 DGAT1 in lactating cows quickly and effectively, and to determine the DGAT1 genotype and then the lactation traits. To provide technical support for molecular marker-assisted selection of Chinese Holstein cows, 6 Holstein cows with high milk yield and 3 low milk yield cows were selected as the research objects. The genomic DNA of mammary gland tissue was extracted, 1 external primer and 1 pair of internal primer were designed, and a four primer ARMS-PCR system was established for rapid detection of single nucleotide polymorphism of DGAT1 gene in dairy cow mammary tissue. The amplified fragment length of outer primer was 512bp, which was the positive control of PCR reaction. The length of the amplified fragment was 369bp for genotype 232K and 181 bp.PCR for genotype 232A. The results showed that 512bp fragment was amplified from breast tissue samples of 6 cattle by external primer. The specific amplified fragment length of breast tissue of high lactating dairy cows and low lactating dairy cows was 181 BP. The results showed that the K232A polymorphism of DGAT1 gene was 232A type in 6 dairy cattle samples selected in this study. It is suggested that this PCR identification formula is suitable for this purpose. The method can be used to identify the DGAT1 genotypes of dairy cows quickly and effectively. It can be used for molecular marker-assisted selection in Chinese Holstein cows.
【作者單位】: 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金面上項目(31671285) 黑龍江省博士后科研啟動金(LBH-Q16027)
【分類號】:S823

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本文編號:1511125

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