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H9亞型流感病毒數(shù)字RT-PCR檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2018-02-13 08:23

  本文關(guān)鍵詞: H亞型流感病毒 數(shù)字RT-PCR 實(shí)時(shí)定量RT-PCR 出處:《中國家禽》2017年21期  論文類型:期刊論文


【摘要】:通過數(shù)字RT-PCR和實(shí)時(shí)定量RT-PCR兩種方法的比對(duì)試驗(yàn),建立快速檢測(cè)H9亞型流感的數(shù)字RT-PCR方法。利用同一對(duì)引物和探針,以梯度稀釋的方法測(cè)定這兩種方法針對(duì)H9亞型流感的靈敏性、特異性及重現(xiàn)性。結(jié)果顯示:兩種方法均能夠檢測(cè)出104倍稀釋的H9亞型流感病毒,而數(shù)字RT-PCR可以檢測(cè)出單個(gè)微滴中的H9亞型流感病毒,其靈敏度性高于實(shí)時(shí)定量RT-PCR;兩種方法的特異性和重復(fù)性都較好,對(duì)H3N2、H4N2、H6N2等亞型流感病毒均未有擴(kuò)增反應(yīng)。數(shù)字RT-PCR方法比實(shí)時(shí)定量RT-PCR具有更高的靈敏度,在快速檢測(cè)H9亞型流感病毒方面可發(fā)揮重要作用。
[Abstract]:A digital RT-PCR method for rapid detection of H9 subtype influenza was established by comparing the methods of digital RT-PCR and real-time quantitative RT-PCR. Using the same pair of primers and probes, the sensitivity of these two methods for H9 subtype influenza was determined by gradient dilution method. Specificity and reproducibility. The results showed that both methods could detect 104-fold diluted H9 subtype influenza virus, while digital RT-PCR could detect H9 subtype influenza virus in a single microdrop. The sensitivity of the two methods was higher than that of real-time quantitative RT-PCR, the specificity and reproducibility of the two methods were better, and there was no amplification reaction to subtype H _ 3N _ 2H _ 4N _ 2H _ 6N _ 2. The digital RT-PCR method was more sensitive than real-time quantitative RT-PCR. It can play an important role in rapid detection of H 9 subtype influenza virus.
【作者單位】: 國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局口岸傳染病檢測(cè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局科研項(xiàng)目(2014IK248)
【分類號(hào)】:S852.65

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本文編號(hào):1507727

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