發(fā)布時間：2018-02-04 12:34

  本文關(guān)鍵詞： 雞白細(xì)胞介素(ChIL-) 單克隆抗體　出處：《細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志》2017年07期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的制備抗雞白細(xì)胞介素4(ChIL-4)單克隆抗體(mAb)并進(jìn)行鑒定。方法以重組雞IL-4(GST-ChIL-4)作為免疫原免疫8周齡BALB/c小鼠,以重組蛋白His-ChIL-4作為檢測抗原建立篩選陽性雜交瘤細(xì)胞株的間接ELISA;以有限稀釋法制備穩(wěn)定分泌抗ChIL-4 mAb細(xì)胞株;采用間接ELISA、間接免疫熒光法(IFA)以及Western blot法分析mAb的特異性。結(jié)果獲得4株抗ChIL-4的mAb,分別命名為6A8、18F12、19F1、20G3,腹水mAb的ELISA效價為(1.6~6.4)×104;ELISA、IFA及Western blot結(jié)果顯示該4株mAb均是特異針對重組ChIL-4的mAb,不具有識別重組牛IL-4、雞γ干擾素(IFN-γ)等其他蛋白的能力。結(jié)論成功制備了抗ChIL-4的mAb。
[Abstract]:Objective to prepare and identify monoclonal antibody against chicken interleukin-4 (ChIL-4). Methods Recombinant chicken IL-4 GST-ChIL-4 was prepared and identified. To immunize 8-week-old BALB/c mice as an immunogen. Using recombinant protein His-ChIL-4 as detection antigen, indirect Elisa was established to screen positive hybridoma cell lines. ChIL-4 mAb cell lines secreted stably and stably were prepared by limited dilution method. The specificity of mAb was analyzed by indirect Elisa, indirect immunofluorescence assay (IFA) and Western blot. Results four mAb strains resistant to ChIL-4 were obtained. The ELISA titer of ascites mAb was 1.6 ~ 6.4 脳 10 ~ (4) 脳 10 ~ (4), respectively, and it was named as 6A8A ~ (18) F _ (12) ~ (19) F _ (1) ~ (20) G _ (3). The results of ELISAA IFA and Western blot showed that the four mAb strains were mAb-specific to recombinant ChIL-4 and did not recognize recombinant bovine IL-4. The ability of other proteins such as chicken interferon 緯 (IFN- 緯). Conclusion the anti-mAbs of ChIL-4 were successfully prepared.
【作者單位】： 揚(yáng)州大學(xué)江蘇省人獸共患病學(xué)重點實驗室江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心醫(yī)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(30972171,81472815)
【分類號】：S852.4
【正文快照】： 白細(xì)胞介素4(interleukin 4,IL-4)主要由2型輔助T(T helper type 2,Th2)細(xì)胞分泌,具有刺激Th2細(xì)胞分化、增殖的能力,是Th2細(xì)胞免疫應(yīng)答的重要調(diào)節(jié)因子[1-2],并對濾泡輔助T(follicular helperT cell,Tfh)細(xì)胞、B細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等其他多種細(xì)胞均具有免疫調(diào)節(jié)功能,從而

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本文編號：1490222