本文關(guān)鍵詞： 從江香豬 載脂蛋白C基因 基因克隆 亞細胞定位　出處：《畜牧與獸醫(yī)》2017年08期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為了觀察從江香豬載脂蛋白C3(ApoC3)基因及其表達產(chǎn)物在真核細胞中的亞細胞定位情況,以脂肪型小型豬從江香豬為研究對象,克隆ApoC3基因CDS區(qū),構(gòu)建攜帶有綠色熒光蛋白的pEGFP-C1-ApoC3重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染HEK-293T細胞。結(jié)果顯示:從江香豬ApoC3基因與GenBank上公布的序列相比,在141位有1個堿基發(fā)生轉(zhuǎn)換,由腺嘌呤(A)突變成鳥嘌呤(G),為無義突變;對ApoC3蛋白的亞細胞定位分析表明,該蛋白在胞外基質(zhì)占55.6%,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)占22.2%,液泡占11.1%,細胞質(zhì)占11.1%。pEGFP-C1-ApoC3重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HEK-293T細胞后的熒光共定位結(jié)果顯示,ApoC3蛋白在細胞中表達部位與PSORT II Prediction軟件預(yù)測結(jié)果一致。本研究結(jié)果為進一步構(gòu)建ApoC3基因轉(zhuǎn)基因動物模型,開展ApoC3基因的多態(tài)性變化而導(dǎo)致的相關(guān)疾病研究奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to observe the subcellular localization of apolipoprotein C _ 3 (ApoC _ 3) gene and its expression products in eukaryotic cells of Congjiang Xiang pig, the fatty miniature pig Congjiang Xiang pig was studied. The CDS region of ApoC3 gene was cloned and the recombinant plasmid of pEGFP-C1-ApoC3 carrying green fluorescent protein was constructed. The results of transfection of HEK-293T cells showed that there was one base conversion between the ApoC3 gene of Congangxiang pig and the published sequence on GenBank. From adenine (A) to guanine guanine (G), it is a nonsense mutation. The subcellular localization analysis of ApoC3 protein showed that the protein was 55.6% in extracellular matrix, 22.2% in endoplasmic reticulum and 11.1% in vacuole. The fluorescence co-localization of the recombinant plasmid pEGFP-C1-ApoC3 after transfection into HEK-293T cells showed that cytoplasm accounted for 11.1%. The expression site of ApoC3 protein in cells was consistent with that predicted by PSORT II Prediction software. This study was intended to further construct the transgenic animal model of ApoC3 gene. The research on the related diseases caused by the polymorphism of ApoC3 gene has laid a foundation.
【作者單位】： 高原山地動物遺傳育種與繁殖省部共建教育部重點實驗室;貴州大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院;貴州露元現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司;
【基金】：省校聯(lián)合基金(黔科合LH字[2014]7668) 貴州大學(xué)青年基金(貴大自青基合字[2012]010號)
【分類號】：Q78;S828
【正文快照】： 脂蛋白主要由膽固醇、甘油三酯(TG)、磷脂和載脂蛋白組成。載脂蛋白是指位于脂蛋白中的蛋白質(zhì),目前已發(fā)現(xiàn)20余種。載脂蛋白能介導(dǎo)脂蛋白與細胞膜上的脂蛋白受體結(jié)合,并被攝入細胞內(nèi)進行分解代謝[1-2]。載脂蛋白C3(Apo C3)是脂蛋白代謝的重要調(diào)節(jié)劑,被認為是血脂代謝中與脂蛋白

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本文編號：1489165