發(fā)布時(shí)間：2018-01-30 19:16

  本文關(guān)鍵詞： 拉沙里菌素 半抗原 單克隆抗體 間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA　出處：《中國畜牧獸醫(yī)》2017年10期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為制備拉沙里菌素(LAS)單克隆抗體,建立針對(duì)LAS的間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA(Ci-ELISA)方法,試驗(yàn)采用了活性酯法將LAS分別與BSA和OVA偶聯(lián)成LAS-BSA和LAS-OVA作為免疫原和檢測(cè)原,6次免疫后,取小鼠脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,最終篩選出一株能穩(wěn)定分泌抗LAS單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株C11。經(jīng)鑒定,C11的抗體類型為Ig G1,輕鏈為κ鏈;所制腹水效價(jià)為1∶16 000,與莫能菌素鈉、鹽霉素鈉、馬杜霉素胺、頭孢噻吩鈉和硫酸鏈霉素均無交叉反應(yīng)。用此單克隆抗體建立LAS Ci-ELISA檢測(cè)方法顯示,Ci-ELISA標(biāo)準(zhǔn)工作曲線為y=0.376x-0.2374(R2=0.9914),LAS在5~1 000 ng/m L時(shí),線性關(guān)系良好,IC50為90.22 ng/m L,加標(biāo)回收率為81.76%~102.41%,表明方法精確度好、靈敏度高。LAS單克隆抗體的制備和Ci-ELISA方法的建立為下一步試劑盒的研發(fā)奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to prepare LAS-LAS monoclonal antibody, an indirect competitive ELISA-Ci-ELISA-ELISA-specific method for LAS was established. In this experiment, LAS was coupled with BSA and OVA to form LAS-BSA and LAS-OVA as immunogen respectively by using active ester method. Mouse spleen cells were fused with myeloma cells, and a hybridoma cell line C11, which could stably secrete monoclonal antibody to LAS, was selected. The antibody type of C11 was identified as Ig G1. The light chain is 魏 chain; The titer of ascitic fluid was 1:16, with monensin sodium, salinomycin sodium and maduromycin amine. There was no cross reaction between cefthiophene sodium and streptomycin sulfate. LAS Ci-ELISA assay was established with this monoclonal antibody. The standard working curve of Ci-ELISA was 0.376x-0.2374 R29914L, and the linear relationship was good when the value of Las was 50.376x-0.2374 ng/m / L. The IC50 was 90.22 ng/m / L and the recovery rate was 81.76 / 102.41, which indicated that the method was accurate. The preparation of highly sensitive. Las monoclonal antibody and the establishment of Ci-ELISA method laid a foundation for the further development of the kit.
【作者單位】： 揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院;江蘇省動(dòng)物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：牛羊碳水化合物、蛋白質(zhì)與能量代謝失衡防控技術(shù)研究(2016YFD0501206)
【分類號(hào)】：S859.84
【正文快照】： 拉沙里菌素(lasalocid,LAS),又名那塞羅,是由拉沙里鏈霉菌發(fā)酵產(chǎn)生一種的抗生素[1-2],與莫能菌素、鹽霉素同屬聚醚類離子載體抗生素。LAS主要用于提高動(dòng)物生長性能,改善反芻動(dòng)物的飼料利用率[1-3],預(yù)防畜禽球蟲感染[4]。LAS攝入后會(huì)分布在肝臟、肌肉、脂肪、心臟、皮膚、胸腺

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3 張永根;拉沙里菌素在養(yǎng)牛生產(chǎn)上的應(yīng)用效果及其作用機(jī)理[J];飼料博覽;1999年08期

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10 于詠蘭;汪明;;一種復(fù)方抗球蟲制劑的研制[J];中國獸醫(yī)雜志;2006年09期

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本文編號(hào)：1477022