雞Akirin2和GM-CSF促進(jìn)傳染性法氏囊病病毒VP2基因DNA疫苗免疫效果的研究
本文關(guān)鍵詞: 雞傳染性法氏囊病 VP基因 雞Akirin 雞GM-CSF DNA疫苗 出處:《動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展》2017年10期 論文類型:期刊論文
【摘要】:為提高雞傳染性法氏囊病病毒VP2基因DNA疫苗的免疫效力,將IBDV VP2、雞Akirin2和雞GM-CSF三基因編碼區(qū)串聯(lián)后克隆到真核表達(dá)載體pTriEx-4上,用構(gòu)建的pT-VP2-Akirin2-GM-CSF重組質(zhì)粒體外轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,然后提取表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行SDS-PAGE分析。結(jié)果在58、35、22ku附近各有一蛋白條帶。用pT-VP2-Akirin2-GM-CSF免疫SPF雞,加強(qiáng)免疫2周后,攻IBDV BC6-85強(qiáng)毒,4d后統(tǒng)計(jì)保護(hù)率。結(jié)果發(fā)現(xiàn),注射14d后,pT-VP2-Akirin2-GM-CSF質(zhì)粒免疫組血清中能檢測到特異性IBDV抗體和IBDV中和抗體,第28天,該組雞的抗體滴度極顯著高于空白對照組(P0.01),該組雞外周血淋巴細(xì)胞增殖能力也極顯著高于空白對照組(P0.01)。說明VP2-Akirin2-GM-CSF三基因串聯(lián)DNA疫苗有很好的應(yīng)用前景。
[Abstract]:In order to improve the immunogenicity of VP2 gene DNA vaccine of infectious bursal disease virus (IBDV), IBDV VP2 was used. The three coding regions of chicken Akirin2 and chicken GM-CSF were sequenced and cloned into eukaryotic expression vector pTriEx-4. The recombinant plasmid of pT-VP2-Akirin2-GM-CSF was transfected into 293T cells in vitro, and the expression product was extracted for SDS-PAGE analysis. PT-VP2-Akirin2-GM-CSF was used to immunize SPF chickens. After 2 weeks of intensified immunization, IBDV BC6-85 was attacked. The results showed that the protective rate was 14 days after injection. Specific IBDV antibody and IBDV neutralizing antibody were detected in serum of pT-VP2-Akirin2-GM-CSF plasmid immunized group. The titer of antibody in this group was significantly higher than that in the control group (P 0.01). The proliferative ability of peripheral blood lymphocytes in this group was also significantly higher than that in the blank control group (P0.01). The results indicate that VP2-Akirin2-GM-CSF triple gene tandem DNA vaccine has a good application prospect.
【作者單位】: 肇慶大華農(nóng)生物藥品有限公司;華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院;
【基金】:廣東省應(yīng)用型科技研發(fā)專項(xiàng)資金項(xiàng)目(2015B020230011)
【分類號】:S852.4
【正文快照】: 雞傳染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)是由雞傳染性法氏囊病病毒(Infectious bursaldisease virus,IBDV)引起的一種免疫抑制性疾病,嚴(yán)重危害家禽養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展[1]。20世紀(jì)80年代流行起來的致病力和抗原性大為不同的變異毒株和超強(qiáng)毒株,能突破傳統(tǒng)疫苗和母源抗體
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