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豬白細(xì)胞介素17A基因的克隆與鑒定

發(fā)布時(shí)間:2018-01-28 12:33

  本文關(guān)鍵詞: 豬白細(xì)胞介素A 基因 克隆 鑒定 出處:《基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)》2017年11期  論文類型:期刊論文


【摘要】:豬白細(xì)胞介素17A(IL-17A)是豬白介素17家族的重要成員,在豬體內(nèi)發(fā)揮重要作用的細(xì)胞因子。本研究將豬的外周血單核細(xì)胞分離后,用Con A刺激22 h后提取細(xì)胞的總RNA,RT-PCR方法擴(kuò)增出豬IL-17A基因,將其PCR產(chǎn)物回收純化克隆至p MD-18T載體上,轉(zhuǎn)化至大腸桿菌DH5α,PCR和雙酶切鑒定篩選陽性重組克隆質(zhì)粒。結(jié)果顯示,篩選的重組克隆質(zhì)粒為陽性克隆質(zhì)粒,基因片段為目的基因?寺~@得的豬IL-17A基因的序列與Gen Bank上公布的豬IL-17A基因序列同源性高,為99.4%。本研究成功克隆了IL-17A基因,有助于研究其在豬病毒性疾病中的作用。
[Abstract]:Porcine interleukin-17 (SIL-17A) is an important member of the porcine interleukin-17 family, which plays an important role in swine. In this study, porcine peripheral blood monocytes were isolated. The porcine IL-17A gene was amplified by RT-PCR after 22 h stimulation with Con A, and its PCR product was purified and cloned into p MD-18T vector. The recombinant plasmid was transformed into E. coli DH5 偽 -PCR and identified by double enzyme digestion. The results showed that the selected recombinant clone plasmid was positive clone plasmid. The cloned porcine IL-17A gene has high homology with the porcine IL-17A gene published on Gen Bank. IL-17A gene was cloned successfully, which is helpful to study its role in porcine viral diseases.
【作者單位】: 新鄉(xiāng)學(xué)院生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院新鄉(xiāng)學(xué)院生物技術(shù)研究中心;河南科技學(xué)院;
【基金】:國家自然基金(31272539) 新鄉(xiāng)學(xué)院科技創(chuàng)新基金(12ZA04);新鄉(xiāng)學(xué)院科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(XXUTD20170106;XXUTD20170107)共同資助 2015年河南省教育技術(shù)裝備和實(shí)踐教育研究立項(xiàng)課題(No.GZS095)
【分類號(hào)】:S858.28
【正文快照】: *通訊郵箱,wangxuannian@163.comCloning and Identification of Porcine IL-17A GeneHe Yong1Zhu Yanping1Yue Feng1Li Peng1Sun Guopeng1Zhang Yanfang1Xing Ruilin1Li Run-zhi1,2Yang Jian1Yang Chuan1Wang Xuannian1,21 Bio-technology Centre,School of Life Science,Xin

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本文編號(hào):1470775

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