本文關(guān)鍵詞： 褪黑素 大鼠 代謝組學(xué) 基因芯片　出處：《河南農(nóng)業(yè)大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：為研究褪黑素(melatonin,MT)對動物生長及代謝的影響。本試驗選擇日齡、體重接近的SD級雄性大鼠50只,隨機(jī)平均分為5組,每組10只,分別為正常日糧組(ND)、正常日糧+褪黑素組(ND+MT)、脂肪添加組(FS)、脂肪添加+低劑量褪黑素組(FS+LMT)和、脂肪添加+高劑量褪黑素組(FS+HMT)。FS組在正常飼糧中添加10%的豬油,ND+MT、FS+LMT、FS+HMT組除飼喂特定飼糧外,分別灌服10mg/kgBW、2mg/kgBW、20mg/kg BW的MT溶液。試驗過程中每天稱重,計算日增重。試驗結(jié)束后采血,檢測大鼠血液中相關(guān)生化指標(biāo)、激素等含量。剖取內(nèi)臟主要組織器官并稱量相關(guān)脂肪組織重量,此外,取肝臟組織做冰凍切片,油紅O染色,觀察脂肪含量。對ND、ND+MT、FS、FS+MT組大鼠肝臟樣品采用1H-NMR的代謝組學(xué)方法進(jìn)行代謝組分析,從小分子代謝物層面反映肝臟營養(yǎng)代謝狀態(tài)。該技術(shù)可鑒定生物體在不同生理狀態(tài)下的生物標(biāo)志物,有利于判斷生物體在各種環(huán)境條件下的代謝狀態(tài)。在MT作用下,動物機(jī)體各器官,包括肝臟的各種代謝途徑均可受到影響,相關(guān)代謝產(chǎn)物必然發(fā)生不同程度的變化,用代謝組學(xué)的方法可以全面準(zhǔn)確地檢測到MT影響肝臟代謝的主要標(biāo)志物,判斷其影響肝臟代謝的途徑和程度。ND、ND+MT組大鼠肝臟樣品采用基因芯片的方法,從基因?qū)用孢M(jìn)一步探究MT對大鼠的影響。本研究可以得出如下結(jié)果:(1)ND+MT與ND相比日均采食量、平均日增重、肝臟重顯著下降(P0.05);肝臟組織主要脂肪酸、總膽固醇、大網(wǎng)膜含量、腎周脂肪、附睪脂肪含量均顯著降低(P0.05)。FS+LMT組日均采食量、平均日增重、肝臟主要脂肪酸、大網(wǎng)膜含量、附睪脂肪含量較FS組降低,腎周脂肪含量顯著升高(P0.05);FS+HMT組的大網(wǎng)膜重、附睪脂肪含量較FS組顯著降低(P0.05)。FS組附睪脂肪含量較ND組顯著降低(P0.05),而腎周脂肪含量則較ND組顯著增加(P0.05);FS+LMT與FS+HMT相比表明,高劑量褪黑素處理組腹腔內(nèi)脂肪的含量升高。(2)通過核磁共振的方法進(jìn)行代謝組學(xué)研究,可檢測到的代謝產(chǎn)物共有63種,分別為氨基酸類,有機(jī)酸類,糖類,多胺類以及維生素類,其中共發(fā)現(xiàn)13中潛在標(biāo)志性代謝物,其中ND組與ND+MT組之間共有5種,FS與FS+LMT組共有8種,ND與FS組共有5種,這些代謝物主要與氨基酸、脂肪和碳水化合物等代謝途徑有關(guān),可作為褪黑素對大鼠肝臟影響的標(biāo)志物。(3)通過ND組與ND+MT組大鼠肝臟的基因芯片分析,結(jié)合代謝組學(xué)的試驗結(jié)果,發(fā)現(xiàn)與代謝組學(xué)結(jié)果相關(guān)的差異性表達(dá)的基因共有16個,分別屬于糖代謝,脂肪酸代謝,氨基酸代謝的通路,這也從基因的角度與代謝組學(xué)構(gòu)成了互相印證,使得兩種試驗方法互相補(bǔ)充,也更加科學(xué)全面的研究了褪黑素對大鼠代謝的影響。本研究可以得出如下結(jié)論:(1)相同的日糧條件下MT可以降低大鼠的生長速度,減少大鼠肝臟內(nèi)脂肪的含量,改變脂肪在體內(nèi)的分配;(2)采用1H-NMR的代謝組學(xué)方法可以宏觀地觀察到肝臟在MT的作用下的代謝狀態(tài)的變化,為科學(xué)全面的闡述肝臟在受到褪黑素影響下的代謝情況提供依據(jù);(3)MT可以加強(qiáng)大鼠肝臟物質(zhì)代謝通路中的關(guān)鍵酶基因的表達(dá)。
[Abstract]:To study the influence of melatonin (melatonin, MT) on the growth and metabolism of the animal. This study selected age, weight close male SD 50 rats were randomly divided into 5 groups, 10 rats in each group were normal diet group (ND), normal diet + melatonin group (ND+MT). Add fat group (FS), add fat + low dose of melatonin group (FS+LMT) and fat, add + high dose of melatonin group (FS+HMT).FS was added 10% lard in normal diet, ND+MT, FS+LMT, FS+HMT group were fed diet specific, was administered 10mg/kgBW, 2mg/kgBW, MT 20mg /kg BW solution. During the test day weighed to calculate daily gain. At the end of the experiment were detected in rat blood biochemical index, hormone profile. Main organs and weighing related visceral adipose tissue weight, in addition, liver tissue slices, oil red O staining observation. The fat content of ND. ND+MT, FS, FS+ The metabolism of group 1H-NMR metabolic group analysis method liver samples of rats in group MT with small molecular metabolites levels reflect the liver nutritional and metabolic status. This technique can identify organisms in different physiological conditions of biomarkers in various environmental conditions conducive to the metabolism of organisms. State estimation in the presence of MT in different organs of animal the body, including various metabolic pathways of the liver can be affected by the metabolites must change to different degree, using the method of metabonomics can comprehensively and accurately detect MT main sign of liver metabolism, determine the effect of liver metabolism pathway and.ND method, the liver samples of rats in ND+MT group by gene the chip, further explore the effects of MT on rats from the gene level. We can draw the following results: (1) ND+MT ND compared with the average daily feed intake, average daily weight gain, liver Weight decreased significantly (P0.05); the main fatty acids in liver tissue, total cholesterol content, omentum, perirenal fat, epididymal fat content decreased significantly (P0.05) in group.FS+LMT, the average daily feed intake, average daily gain, liver fatty acid content, omentum, epididymal fat content was lower than that of FS group, perirenal fat the content was significantly increased (P0.05); FS+HMT group of omental weight, epididymal fat content decreased significantly compared with group FS (P0.05).FS group, epididymal fat content decreased significantly compared with ND group (P0.05), and perirenal fat content was significantly higher than that in ND group (P0.05); FS+LMT compared with FS+HMT showed that increased the content of high dose melatonin treatment group intraperitoneal fat. (2) studied by NMR method for metabolic metabolites could be detected in a total of 63, respectively, amino acids, organic acids, sugars, vitamins and polyamines, which were found in the metabolic potential marker 13 Among them, between ND group and ND+MT group were 5, FS and FS+LMT were 8, ND and FS group, a total of 5 species, mainly related to these metabolites and amino acids, fat and carbohydrate metabolism, markers can be used as the effect of melatonin on rat liver by gene chip (3). ND group and ND+MT group rat liver test results analysis, combination of metabolomics, discovery and metabolomics results related genes were 16, belonging to the sugar metabolism, fatty acid metabolism, amino acid metabolism pathway, which is from the perspective of gene and generation of metabolomics constitute each other that makes two kinds of test methods complement each other, but also more scientific and comprehensive study of the effects of melatonin on the metabolism of rats. The conclusions were as follows: (1) the same diet under the condition of MT can reduce the growth rate of rats, reduce the content of fat in the liver of rats, Change in the body fat distribution; (2) using 1H-NMR metabonomic method of macroscopic observed changes in the metabolic state under the effect of MT in the liver, provide a scientific basis for the comprehensive exposition of metabolism in liver by melatonin under the influence; (3) MT can enhance the expression of key enzyme genes in the liver metabolism pathway in rats.

【學(xué)位授予單位】：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S852.2

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本文編號：1464068