本文關(guān)鍵詞： 傳染性法氏囊病毒 桿狀病毒表達載體 VP蛋白　出處：《畜牧與獸醫(yī)》2017年08期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：從GenBank下載傳染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因序列,根據(jù)昆蟲細胞偏愛密碼子對IBDV VP2基因進行密碼子優(yōu)化,化學(xué)合成優(yōu)化后的VP2基因序列,然后構(gòu)建桿狀病毒表達載體pTri Ex-4-VP2,構(gòu)建成功的重組桿狀病毒pTri Ex-4-VP2轉(zhuǎn)染sf9細胞,制備病毒原種,采用SDS-PAGE和Western blot方法鑒定VP2的免疫原性。結(jié)果顯示:細胞感染Bac-VP2后,其細胞裂解蛋白在58 ku附近有1個條帶,且該條帶與IBD陽性血清發(fā)生特異性反應(yīng);間接免疫熒光試驗(IFA)結(jié)果顯示VP2基因能在Sf9細胞中表達;動物攻毒保護試驗中,2次免疫重組VP2蛋白后能誘導(dǎo)14日齡SPF雞產(chǎn)生對IBDV強毒攻擊,保護率為60%。本研究為進一步研究IBDV VP2基因工程疫苗提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。
[Abstract]:The sequence of VP2 gene of infectious bursal disease virus (IBDV) was downloaded from GenBank, and the codon of IBDV VP2 gene was optimized according to insect cell preference codon. The optimized VP2 gene sequence was synthesized by chemical synthesis, and then the baculovirus expression vector pTri Ex-4-VP2 was constructed. The recombinant baculovirus pTri Ex-4-VP2 was constructed and transfected into sf9 cells. SDS-PAGE and Western blot were used to identify the immunogenicity of VP2. The cleavage protein had one band near 58 ku, and it reacted specifically with IBD positive serum. The results of indirect immunofluorescence assay (IFA) showed that VP2 gene could be expressed in Sf9 cells. The recombinant VP2 protein was immunized twice in the animal toxicity protection test, and it could induce 14 day old SPF chickens to attack IBDV strongly. The protective rate is 60%. This study provides a material basis for further study of IBDV VP2 gene engineering vaccine.
【作者單位】： 廣東溫氏大華農(nóng)生物科技有限公司;華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院;
【基金】：省應(yīng)用型科技研發(fā)專項資金項目(2015B020230011)
【分類號】：S852.65
【正文快照】： 雞傳染性法氏囊病(infectious bursal disease,IBD)是由傳染性法氏囊病毒(infectious bursaldisease virus,IBDV)侵害引起的一種急性、高度接觸性傳染病,主要侵害雛雞和青年雞的法氏囊[1-2]。該病不僅造成雞只死亡還導(dǎo)致免疫抑制,是目前危害世界養(yǎng)禽業(yè)的主要傳染病之一[3]。傳

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 祁小樂;王笑梅;高玉龍;高宏雷;;雞傳染性法氏囊病病毒VP2蛋白研究進展[J];中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報;2008年08期

2 宋坤華,金勇豐,黃耀偉,張耀洲,于漣;重組家蠶病毒表達傳染性法氏囊病病毒VP2蛋白[J];生物化學(xué)與生物物理學(xué)報;2000年03期

3 王微;李秀錦;仲飛;王幸興;韓冬梅;靳慧君;潘素敏;李巍;;犬細小病毒VP2蛋白在真核細胞中的分泌表達及特性[J];微生物學(xué)報;2009年05期

4 王振軍;吳威;閆喜軍;呼延良浩;朱春生;胡博;張海玲;白雪;趙建軍;徐淑娟;馮卓;張蕾;李明霞;;水貂阿留申病病毒VP2蛋白基因在昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)中的表達[J];中國獸醫(yī)科學(xué);2013年12期

5 易立;程世鵬;王建科;柴秀麗;羅彬;張海玲;吳威;閆喜軍;;犬細小病毒VP2蛋白的表達及間接ELISA方法的建立[J];中國獸醫(yī)學(xué)報;2010年08期

6 孫靜;魏永偉;章曉棟;于漣;;穩(wěn)定表達傳染性法氏囊病病毒VP2蛋白突變體細胞系的建立[J];浙江大學(xué)學(xué)報(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版);2011年05期

7 萬勇;謝金文;余為一;;傳染性法氏囊病毒VP2蛋白的分子生物學(xué)研究進展[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展;2006年02期

8 李奇蒙;陳普成;柳金雄;姜永萍;王笑梅;田雨;胡永浩;陳化蘭;;表達傳染性法氏囊病毒VP2蛋白的重組火雞皰疹病毒的構(gòu)建[J];中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報;2014年07期

9 胡桂秋;郭鶴;梁紅茹;馮昊;王化磊;鄭學(xué)星;趙永坤;趙麗麗;楊松濤;夏咸柱;;犬細小病毒VP2蛋白在家蠶/昆蟲細胞中表達[J];中國病原生物學(xué)雜志;2013年07期

10 楊洋;宮婷;米立娟;趙敬慧;陳奇;錢方;劉曄;張守峰;扈榮良;;犬細小病毒VP2蛋白重組人5型腺病毒的構(gòu)建[J];中國生物制品學(xué)雜志;2013年05期

相關(guān)會議論文 前5條

1 歐陽偉;王永山;周宇;張海彬;范紅結(jié);;傳染性法氏囊病病毒重組病毒樣顆粒VP2蛋白的制備與應(yīng)用[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會禽病學(xué)分會第十五次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

2 謝之景;夏咸柱;扈榮良;閆芳;趙忠鵬;黃耕;;表達犬細小病毒VP2蛋白重組犬2型腺病毒的構(gòu)建及鑒定[A];人畜共患傳染病防治研究新成果匯編[C];2004年

3 宋坤華;金勇豐;黃耀偉;張耀洲;于漣;;重組家蠶病毒表達傳染性法氏囊病病毒主要宿主保護性抗原VP2蛋白[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會禽病學(xué)分會第十一次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2002年

4 潘群興;何孔旺;王永山;溫立斌;郭容利;;重組外源基因的豬細小病毒VP2蛋白病毒樣顆粒的構(gòu)建與鑒定[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物傳染病學(xué)分會第三屆豬病防控學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

5 李斐;任雪楓;鄭其升;魏建超;曹瑞兵;周斌;陳溥言;;豬細小病毒VP2蛋白主要抗原表位基因的原核表達及應(yīng)用[A];第一屆中國養(yǎng)豬生產(chǎn)和疾病控制技術(shù)大會——2005中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會學(xué)術(shù)年會論文集[C];2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 田麗紅;虎源貓泛白細胞減少癥病毒VP2蛋白的原核表達及應(yīng)用研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前7條

1 王微;犬細小病毒VP2蛋白穩(wěn)定表達細胞系的建立[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

2 朱彥彩;雞傳染性法氏囊病病毒VP2蛋白配體結(jié)合表位的鑒定[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

3 杜靜;雞傳染性法氏囊病病毒JS株VP2蛋白重組腺病毒的構(gòu)建及其免疫特性[D];揚州大學(xué);2010年

4 陸桂麗;雞傳染性貧血病毒VP3蛋白的原核表達及其抗VP3和VP2蛋白單克隆抗體的制備與鑒定[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

5 李斐;豬細小病毒VP2蛋白主要抗原表位基因的表達及檢測應(yīng)用[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

6 宋幸輝;雞傳染性法氏囊病病毒VP2蛋白配體結(jié)合表位多肽的原核表達及功能的研究[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

7 萇生科;PPV/HN-2011毒株分子生物學(xué)特性研究及利用桿狀病毒表達其VP2蛋白[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

，

本文編號：1460755