本文關(guān)鍵詞： 豬 偽狂犬病病毒 變異毒株 分離 鑒定 gE基因 遺傳變異分析　出處：《中國畜牧獸醫(yī)》2017年07期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為了解豬偽狂犬病病毒(PRV)變異毒株的特點(diǎn),本研究采集臨床疑似PRV感染發(fā)病豬的淋巴結(jié)等組織樣品進(jìn)行PCR鑒定,選取僅PRV陽性的組織樣品經(jīng)研磨除菌后取上清接種于PK-15細(xì)胞進(jìn)行病毒分離培養(yǎng)、蝕斑純化、PCR和間接免疫熒光法(IFA)鑒定,采用Reed-Muench法測定PRV的TCID50,接種小鼠并觀察臨床癥狀,對純化的PRV和死亡小鼠腦組織樣品進(jìn)行g(shù)E基因PCR擴(kuò)增及測序分析。結(jié)果顯示,PRV陽性病料接種于PK-15細(xì)胞24h后出現(xiàn)典型細(xì)胞病變(CPE),經(jīng)3輪蝕斑純化后PCR和IFA鑒定結(jié)果均為陽性,分離株命名為HeNZK-2014,其TCID50為10-9.77/0.1mL;以1×108個TCID50病毒懸液接種小鼠22h后可引起小鼠出現(xiàn)奇癢、撕咬、死亡等典型豬偽狂犬病癥狀,死亡小鼠腦組織樣品PRV PCR檢測結(jié)果為陽性;純化病毒和死亡小鼠腦組織樣品gE基因核苷酸序列同源性為100.0%,與GenBank中2011年以前登錄的經(jīng)典毒株位于不同分支,與2011年之后中國流行毒株位于同一分支,在第48和496位各有1個天冬氨酸(D)的插入,具有變異毒株的典型特征。本研究成功分離了1株P(guān)RV變異毒株,為進(jìn)一步開展針對PRV變異毒株的疫苗及其防控研究奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to understand the characteristics of porcine pseudorabies virus (PRV) variant strains, PCR samples were collected from clinical samples of swine lymph nodes suspected to be infected with pseudorabies virus (PRV). Only PRV positive tissue samples were harvested and inoculated into PK-15 cells after grinding and inoculated with the supernatant for virus isolation and culture. PK-15 was identified by plaque purification and indirect immunofluorescence assay (IFA). The TCID50 of PRV was determined by Reed-Muench method. The mice were inoculated and the clinical symptoms were observed. The purified PRV and brain tissue samples of dead mice were amplified by PCR of GE gene and sequenced. PRV positive venereal material inoculated with PK-15 cells for 24 hours showed typical cytopathic changes. After three rounds of plaque purification, both PCR and IFA were positive. The isolate was named HeNZK-2014 and its TCID50 was 10-9.77 / 0.1 mL; Mice inoculated with 1 脳 108 TCID50 virus suspension for 22 hours could cause typical pig pseudorabies symptoms such as itching, biting and death. PRV PCR was positive in brain tissue of dead mice. The homology of nucleotide sequence of GE gene between purified virus and brain tissue of dead mice was 100.0%, which was located in different branches with the classical virus strains which were registered before 2011 in GenBank. It is located in the same branch as the Chinese epidemic strain after 2011, and there is one aspartic acid D insertion at the 48th and 496th positions, respectively. One PRV variant strain was successfully isolated, which laid a foundation for further research on vaccine and control of PRV variant strain.
【作者單位】： 河南省動物疫病預(yù)防與控制中心;廣東永順生物制藥股份有限公司;
【基金】：河南省科技創(chuàng)新人才計(jì)劃項(xiàng)目(174200510003)
【分類號】：S852.651
【正文快照】： 偽狂犬病(pseudorabies,PR)是由偽狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)感染引起的可致多種動物發(fā)病的疫病,其中仔豬受到的危害最為嚴(yán)重。感染PRV后懷孕母豬會出現(xiàn)流產(chǎn),產(chǎn)死胎、木乃伊胎;新生仔豬會出現(xiàn)腹瀉、衰竭及嚴(yán)重的精神癥狀,死亡率可達(dá)100%[1-2]。PR給世界養(yǎng)殖業(yè)造成的

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 駱延波;一株不引起法氏囊病變變異毒株的構(gòu)建[J];山東畜牧獸醫(yī);1999年03期

2 ;新加坡推出檢測禽流感變異毒株的“廣譜”試劑[J];畜禽業(yè);2012年06期

3 王新衛(wèi);趙軍;陳陸;姚惠霞;王川慶;王澤霖;;H9N2 AIV HA蛋白S145N變異毒株的抗原性和免疫原性[J];中國獸醫(yī)學(xué)報(bào);2012年02期

4 秦毅斌;盧冰霞;趙武;何穎;李瑩瑩;李斌;梁家幸;梁保忠;蘇乾蓮;蔣冬福;周英寧;;豬流行性腹瀉病毒變異毒株與經(jīng)典毒株RT-PCR鑒別檢測方法的建立及應(yīng)用[J];中國獸醫(yī)科學(xué);2014年05期

5 李志杰;丁壯;孟軻音;宣華;王貴平;高恩鵬;叢彥龍;母連志;;PRRSV缺失變異毒株JL/07/SW株的分離鑒定及序列分析[J];中國獸醫(yī)學(xué)報(bào);2009年07期

6 邱洪凱;曹丙蕾;肖一紅;周恩民;;PRRSV SD-TA變異毒株的分離及序列分析[J];西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2010年05期

7 高志強(qiáng);郭鑫;楊漢春;陳艷紅;查振林;;豬繁殖與呼吸綜合征病毒缺失變異株的基因組特征[J];中國畜牧獸醫(yī)文摘;2006年03期

8 李志杰;丁壯;彭龍;宣華;王貴平;叢彥龍;母連志;;PRRSV缺失變異毒株JL/07/SWM基因克隆與原核表達(dá)[J];中國獸醫(yī)學(xué)報(bào);2009年11期

9 匡宇;郭鑫;滕可導(dǎo);楊漢春;陳艷紅;查振林;;PRRSV缺失變異毒株HB-2(sh)/2002在人工感染仔豬組織中的分布與定位[J];中國獸醫(yī)雜志;2007年03期

10 ;[J];;年期

相關(guān)會議論文 前3條

1 趙軍;王新衛(wèi);王川慶;陳陸;鄭鹿平;王澤霖;;H9N2亞型禽流感病毒HA蛋白S145N變異毒株的致病性研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會第八屆全國會員代表大會暨第十五次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2013年

2 李志杰;丁壯;孟軻音;宣華;王貴平;高恩鵬;叢彥龍;母連志;;PRRSV缺失變異毒株JL/07/SW株的分離鑒定及序列分析[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會第七屆全國會員代表大會暨第十三次學(xué)術(shù)研討會論文集（上冊）[C];2009年

3 李志杰;丁壯;孟軻音;宣華;王貴平;高恩鵬;叢彥龍;母連志;;PRRSV缺失變異毒株JL/07/SW M基因克隆、序列分析與原核表達(dá)[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會第七屆全國會員代表大會暨第十三次學(xué)術(shù)研討會論文集（上冊）[C];2009年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前3條

1 陳操 趙玉軍;操縱“主犯”：變異毒株及其“特異”功能[N];中國畜牧獸醫(yī)報(bào);2007年

2 王小龍;美揭開SARS病毒跨物種感染機(jī)制[N];科技日報(bào);2009年

3 陳操 趙玉軍;操縱“主犯”：變異毒株及其“特異”功能[N];中國畜牧獸醫(yī)報(bào);2007年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 梁海霞;豬繁殖與呼吸綜合征病毒經(jīng)典毒株和變異毒株NASBA-ELISA鑒別診斷方法的建立及應(yīng)用[D];中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所;2009年

2 楊杰華;雞傳染性支氣管炎變異毒株的分離鑒定及其免疫原基因的序列分析[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

3 周峰;2012-2013年河南地區(qū)豬繁殖與呼吸綜合征病毒分子流行病學(xué)調(diào)查及河南流行株的分離、鑒定[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

，

本文編號：1459523