發(fā)布時(shí)間：2018-01-20 07:21

  本文關(guān)鍵詞： 副豬嗜血桿菌 基因缺失株 自然轉(zhuǎn)化 轉(zhuǎn)化頻率　出處：《農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào)》2017年12期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：自然轉(zhuǎn)化可用于構(gòu)建副豬嗜血桿菌(Haemophilus parasuis,HPS)的基因缺失株,對(duì)于研究其毒力因子和致病機(jī)制有重要的意義。本研究采用控制變量法,對(duì)副豬嗜血桿菌自然轉(zhuǎn)化過(guò)程中的實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化。分別比較了點(diǎn)樣時(shí)細(xì)菌不同生長(zhǎng)階段、點(diǎn)樣孵化不同時(shí)長(zhǎng)、轉(zhuǎn)化體系細(xì)菌不同濃度、外源環(huán)磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,c AMP)不同濃度、外源質(zhì)粒不同濃度及轉(zhuǎn)化后平板孵化不同時(shí)間等條件下的自然轉(zhuǎn)化頻率。結(jié)果表明,副豬嗜血桿菌的平板轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)在細(xì)菌處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)后期(OD600≈1.5~1.7)時(shí)點(diǎn)樣孵化,孵化時(shí)長(zhǎng)為13 h,體系中外源質(zhì)粒的濃度大于0.1μg/μL,轉(zhuǎn)化后平板孵育5 h時(shí),副豬嗜血桿菌自然轉(zhuǎn)化以較高頻率發(fā)生。本研究確定了副豬嗜血桿菌自然轉(zhuǎn)化過(guò)程中的最佳條件,為副豬嗜血桿菌毒力因子及致病機(jī)制等基因功能的相關(guān)研究提供了參考。
[Abstract]:Natural transformation can be used to construct the gene deletion strain of Haemophilus parasuis HPS. It is of great significance to study virulence factors and pathogenicity mechanism. Control variable method is used in this study. The experiment conditions of Haemophilus parasuis during natural transformation were optimized. Different growth stages of bacteria, different incubation time, different concentration of bacteria in transformation system were compared. Different concentrations of exogenous cyclic adenosine monophosphate were observed. The natural transformation frequency of exogenous plasmids in different concentrations and different incubation time after transformation was studied. The plate transformation test of Haemophilus parasuis incubated in the late stage of logarithmic growth, the incubation time was 13 hours. The concentration of exogenous plasmids in the system was greater than 0.1 渭 g / 渭 L and incubated with the plate for 5 h. The natural transformation of Haemophilus parasuis occurred at a higher frequency. In this study, the optimal conditions for the natural transformation of Haemophilus parasuis were determined. It provides a reference for the study of virulence factor and pathogenicity of Haemophilus parasuis.
【作者單位】： 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院豬病研究中心;西南醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【基金】：公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(No.201303034)
【分類號(hào)】：S852.612
【正文快照】： *同等貢獻(xiàn)作者Establishment and Condition Optimization for Natural TransformationMethod of Haemophilus parasuisJIN Jin1*DAI Ke1*WEN Xin-Tian1HE Lv-Qin1ZHANG Lu-Hua1,2ZHAO Yu-Jia1CAO San-Jie1HUANG Xiao-Bo1WU Rui1ZHAO Qin1WEN Yi-Ping1**1 Research Center of

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王麗榮;董永軍;杭柏林;趙春梅;王三虎;梁美蘭;;副豬嗜血桿菌的分離鑒定[J];西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2007年04期

2 溫華梅;;副豬嗜血桿菌的臨床分離鑒定與耐藥性分析[J];中國(guó)獸醫(yī)雜志;2009年12期

3 何麗麗;李春玲;王貴平;賈愛卿;楊冬霞;宣春玲;鄭鐵鎖;王金生;;廣東地區(qū)副豬嗜血桿菌的分離鑒定[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘;2010年03期

4 蔣征;李軍星;姜平;柴其然;余飛;錢黎婷;;副豬嗜血桿菌分離與基因分型鑒定[J];畜牧與獸醫(yī);2008年06期

5 周雪;付利芝;王孝友;翟少欽;譚榮;丁玉春;;重慶地區(qū)副豬嗜血桿菌的分離鑒定及藥物敏感性分析[J];中國(guó)獸醫(yī)雜志;2011年12期

6 張雷;張秀亮;鄭新添;余旭平;;副豬嗜血桿菌的分離與鑒定[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2008年02期

7 郭建強(qiáng);王傳寶;張彬;;副豬嗜血桿菌的分離鑒定與藥敏試驗(yàn)[J];中國(guó)動(dòng)物保健;2008年06期

8 陸國(guó)林;何海健;;浙江省副豬嗜血桿菌的分離鑒定與藥敏試驗(yàn)[J];中國(guó)獸醫(yī)科學(xué);2010年06期

9 張念章;儲(chǔ)岳峰;趙萍;高鵬程;賀英;逯忠新;;重疊PCR法構(gòu)建副豬嗜血桿菌外源打靶基因[J];生物技術(shù)通報(bào);2011年07期

10 仇微紅;張盼鋒;郭世寧;;副豬嗜血桿菌的分離鑒定及中藥藥敏試驗(yàn)[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2009年02期

相關(guān)會(huì)議論文 前4條

1 趙戰(zhàn)勤;龍塔;薛云;陳坤鵬;王樂(lè);徐惠娟;劉軍濤;;副豬嗜血桿菌的分離鑒定及其生物學(xué)特性研究[A];2012年中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)病理學(xué)分會(huì)暨中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)動(dòng)物病理生理專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

2 邸海波;王孝友;楚常歡;宋蒼浩;黃偉;;副豬嗜血桿菌的分離及鑒定[A];重慶微生物學(xué)會(huì)第九屆會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2009年

3 都啟晶;文心田;曹三杰;黃小波;;副豬嗜血桿菌基因組表達(dá)文庫(kù)的構(gòu)建與其莢膜輸出多糖蛋白基因的篩選和免疫原性研究[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物傳染病學(xué)分會(huì)第四次豬病防控學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

4 陳欣;符芳;李雪松;王偉;李曦;高學(xué)軍;;副豬嗜血桿菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)學(xué)分會(huì)暨中國(guó)免疫學(xué)會(huì)獸醫(yī)免疫分會(huì)第八次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 汪洋;副豬嗜血桿菌感染豬肺泡巨噬細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究與環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增法的建立[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

2 蔡旭旺;副豬嗜血桿菌的分離鑒定及診斷方法與滅活疫苗的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

3 樂(lè)敏;副豬嗜血桿菌基因組學(xué)及毒力相關(guān)因子研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張悅;副豬嗜血桿菌耐藥性調(diào)查及其對(duì)氟苯尼考耐藥分子機(jī)制的研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

2 �；�;副豬嗜血桿菌細(xì)胞致死膨脹毒素細(xì)胞毒性機(jī)制研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

3 米丁丹;副豬嗜血桿菌HbpA蛋白功能及其致病中作用的初步研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2015年

4 陳凡杰;副豬嗜血桿菌HAPS_ 2096基因介導(dǎo)的天蠶素B抗性研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

5 李雪梅;副豬嗜血桿菌nanH基因和at1基因的功能研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

6 馮芬芬;CpxA/R雙組份系統(tǒng)在副豬嗜血桿菌應(yīng)對(duì)刺激中的作用研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

7 袁虹;混合培養(yǎng)對(duì)豬鏈球菌和副豬嗜血桿菌生長(zhǎng)及基因表達(dá)的影響[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

8 郭海祥;副豬嗜血桿菌sapA基因的鑒定與生物學(xué)特性研究[D];仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院;2016年

9 徐玉智;副豬嗜血桿菌分型鑒定和HigBA原核表達(dá)及功能分析[D];沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

10 王立燕;副豬嗜血桿菌多位點(diǎn)序列分型及其密度感應(yīng)信號(hào)分子初步鑒定[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2016年

，

本文編號(hào)：1447352