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A型產(chǎn)氣莢膜梭菌噬菌體裂解酶Cp51的原核表達(dá)及活性檢測(cè)

發(fā)布時(shí)間:2018-01-19 15:28

  本文關(guān)鍵詞: 產(chǎn)氣莢膜梭菌 噬菌體 裂解酶 蛋白表達(dá) 殺菌活性 出處:《華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年05期  論文類型:期刊論文


【摘要】:【目的】原核表達(dá)A型產(chǎn)氣莢膜梭菌噬菌體裂解酶Cp51并研究其對(duì)A型產(chǎn)氣莢膜梭菌Clostridium perfringens的體外抗菌活性!痉椒ā亢铣墒删w裂解酶Cp51基因,并構(gòu)建了pET-32a-Cp51原核表達(dá)載體,轉(zhuǎn)化到大腸埃希菌Escherichia coli BL21(DE3),經(jīng)終濃度為0.5 mmol·L~(-1)的IPTG誘導(dǎo)以及鎳柱純化后,獲得了可溶性的Cp51重組蛋白;用比濁法檢測(cè)Cp51重組蛋白的殺菌活性!窘Y(jié)果】噬菌體裂解酶Cp51重組蛋白能夠有效降低7株A型產(chǎn)氣莢膜梭菌的濁度,裂解酶質(zhì)量濃度在5μg·m L~(-1)以上、作用30 min對(duì)A型產(chǎn)氣莢膜梭菌的殺菌率可達(dá)到99.99%以上,而對(duì)其他種類細(xì)菌無殺菌效果!窘Y(jié)論】A型產(chǎn)氣莢膜梭菌噬菌體裂解酶Cp51重組蛋白對(duì)A型產(chǎn)氣莢膜梭菌有較強(qiáng)的體外殺菌活性和特異性,研究結(jié)果為后續(xù)裂解酶Cp51的臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:[objective] to express the phage lyase Cp51 of Clostridium perfringens type A in prokaryotic expression and to study its effect on Clostridium of Clostridium perfringens type A. In vitro antibacterial activity of perfringens. [methods] Phage lyase Cp51 gene was synthesized. The prokaryotic expression vector of pET-32a-Cp51 was constructed and transformed into Escherichia coli Escherichia coli BL21 (DE3). The soluble recombinant Cp51 protein was obtained by IPTG induction and nickel column purification at the final concentration of 0.5 mmol 路L ~ (-1). The bactericidal activity of Cp51 recombinant protein was detected by turbidimetry. [results] the bacteriophage lyase Cp51 recombinant protein could effectively reduce the turbidity of 7 strains of Clostridium perfringens A. The bactericidal rate of Clostridium perfringens type A was over 99.99% when the lyase concentration was above 5 渭 g 路mL ~ (-1) and exposed for 30 min. Conclusion the recombinant protein of bacteriophage lyase Cp51 of Clostridium perfringens type A has strong bactericidal activity and specificity against Clostridium perfringens type A. The results laid a foundation for clinical application of Cp51.
【作者單位】: 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院/廣東省動(dòng)物源性人獸共患病預(yù)防與控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014A020208099)
【分類號(hào)】:S852.61
【正文快照】: 優(yōu)先出版網(wǎng)址:http://kns.cnki.net/kcms/detail/44.1110.s.20170714.0855.008.html產(chǎn)氣莢膜梭菌Clostridium perfringens又名魏氏梭菌C.welchii,是一種重要的人畜共患病原菌[1]。產(chǎn)氣莢膜梭菌為兩端鈍圓厭氧性菌,呈粗桿狀,單個(gè)或成對(duì)存在,是一種能產(chǎn)芽孢的革蘭陽性菌,在人和

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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9 李曉靜,張豪,付學(xué)奇,李彥英,陳t,

本文編號(hào):1444776


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