本文關(guān)鍵詞： 牦牛 β-胡蘿素 維生素A β胡蘿卜素-15 15　出處：《青海大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：成年牦牛(Bos mutus)脂肪呈現(xiàn)出明顯的黃色,其對β-胡蘿卜素在內(nèi)的類胡蘿卜素具有較強(qiáng)的富集能力,這種現(xiàn)象并非遺傳缺陷及病理原因造成的,而是牦牛適應(yīng)高原特殊生境環(huán)境的一種營養(yǎng)代謝機(jī)制。為了研究和探討牦牛脂肪中β-胡蘿卜素富集與β-胡蘿卜素關(guān)鍵代謝酶之間的關(guān)系,采用高效液相色譜法測定牦牛組織中β-胡蘿卜素和維生素A的含量,并對β-胡蘿卜素降解酶含量及酶活進(jìn)行測定;應(yīng)用實時熒光定量PCR檢測牦牛不同營養(yǎng)時期組織中β胡蘿卜素-15,15'-單加氧酶(BCMO1)m RNA的表達(dá)差異,應(yīng)用蛋白免疫印跡(western blot)檢測牦牛不同營養(yǎng)時期組織中β胡蘿卜素-15,15'-單加氧酶(BCMO1)蛋白表達(dá)水平。(1)不同營養(yǎng)時期,各組織中β-胡蘿卜素含量不同。營養(yǎng)豐盛期牦牛血清、肝臟、十二指腸、空腸和瘤胃中β-胡蘿卜素的含量明顯高于營養(yǎng)匱乏期(P0.05),其中血清中β-胡蘿卜素的含量差異最明顯,而脂肪和腎臟中β-胡蘿卜素含量差異不顯著(P0.05)。營養(yǎng)豐盛期肝臟中維生素A的含量明顯高于營養(yǎng)匱乏期,兩個時期相比較,回腸、腸內(nèi)容物、瘤胃內(nèi)容物及其他組織中維生素A含量差異顯著(P0.05);(2)牦牛肝臟和胰臟組織β-胡蘿卜素降解酶活性在營養(yǎng)豐盛期要高于營養(yǎng)匱乏期,而其他組織降解酶活性在營養(yǎng)匱乏期要高于營養(yǎng)豐盛期。(3)不同營養(yǎng)時期牦牛β胡蘿卜素-15,15'-單加氧酶(BCMO1)m RNA基因在各組織中均有表達(dá),在營養(yǎng)豐盛期十二指腸、腎臟、瘤胃和空腸中的m RNA的表達(dá)量明顯低于營養(yǎng)匱乏期(P0.05),而肌肉和胰臟中m RNA的表達(dá)量營養(yǎng)豐盛期要高于營養(yǎng)匱乏期。(4)牦牛十二指腸、空腸、腎臟、肌肉和瘤胃組織中的β胡蘿卜素-15,15'-單加氧酶(BCMO1)蛋白表達(dá)量,營養(yǎng)豐盛期均低于營養(yǎng)匱乏期(P0.05),肝臟中的β胡蘿卜素-15,15'-單加氧酶(BCMO1)蛋白表達(dá)量在營養(yǎng)豐盛期要顯著高于營養(yǎng)匱乏期(P0.05),肺臟和回腸中的β胡蘿卜素-15,15'-單加氧酶(BCMO1)蛋白表達(dá)量在兩個營養(yǎng)時期差異不顯著(P0.05)。通過對研究結(jié)果的分析發(fā)現(xiàn),牦牛脂肪等組織在營養(yǎng)豐盛期能富集大量的β-胡蘿卜素,在維生素A缺乏的季節(jié),組織中β-胡蘿卜素可降解轉(zhuǎn)化為VA。牦牛脂肪中β-胡蘿卜素的富集與β-胡蘿卜素降解酶有一定的關(guān)系,具體表現(xiàn)在除肝臟和胰臟外,牦牛組織中β-胡蘿卜素降解酶活性在營養(yǎng)匱乏期高于營養(yǎng)豐盛期,從基因及蛋白表達(dá)水平分析在營養(yǎng)豐盛期大部分組織中β胡蘿卜素-15,15'-單加氧酶(BCMO1)的表達(dá)水平低于營養(yǎng)匱乏期。從β-胡蘿卜素反饋代謝機(jī)理分析β-胡蘿卜素的代謝產(chǎn)物(視黃酸等)可能會反饋性抑制β胡蘿卜素-15,15'-單加氧酶(BCMO1)的表達(dá)。
[Abstract]:The fat of adult Yak Bos Mutusus showed obvious yellow, and it had a strong ability to enrich the carotenoid, including 尾 -carotene. This phenomenon is not caused by genetic defects and pathological reasons. In order to study the relationship between 尾 -carotene enrichment and 尾 -carotene key metabolic enzymes in yak fat. The content of 尾 -carotene and vitamin A in yak tissue was determined by HPLC, and the content and activity of 尾 -carotene degrading enzyme were determined. Real time fluorescence quantitative PCR was used to detect the expression of 尾 -carotene -15A15 and monooxygenase (BCMO1) m RNA in yak tissues at different nutritional stages. Western blot was used to detect 尾 -carotene 15 in yak tissues at different nutritional stages. The expression level of BCMO1) protein was different in different nutrition period. The serum, liver and duodenum of yak during nutritious period were different. The content of 尾 -carotene in jejunum and rumen was significantly higher than that in nutrient-deficient period (P 0.05), and the difference of serum 尾 -carotene was most obvious. However, there was no significant difference in 尾 -carotene content between fat and kidney. The content of vitamin A in the liver in the nutrient-rich period was significantly higher than that in the nutrition-deficient period, and the contents of ileum and intestine were compared between the two periods. The content of vitamin A in rumen contents and other tissues was significantly different from that in other tissues. (2) the activity of 尾 -carotene degrading enzyme in liver and pancreas of yak was higher than that in the period of rich nutrition. The activity of other tissue degradation enzymes was higher in the period of nutrient deficiency than that in the period of rich nutrition.) 尾 -carotene -15 in yak at different nutrition stage. BCMO1m RNA gene was expressed in all tissues, and it was found in duodenum and kidney during nutritious period. The expression of m RNA in rumen and jejunum was significantly lower than that in nutritional deficiency period (P 0.05). The expression of m RNA in muscle and pancreas was higher than that in nutrient-deficient period. The 尾 -carotene -15 was found in duodenum, jejunum, kidney, muscle and rumen tissue of yak. The protein expression of BCMO1 was lower than that of P0.05 in nutrition-deficient period and 尾 -carotene-15 in liver. The expression of BCMO1 protein was significantly higher than that of P0.05, 尾 -carotene -15 in lung and ileum during the period of rich nutrition. There was no significant difference in the expression of BCMO1 protein between the two nutrition periods (P 0.05). It was found by the analysis of the results of the study that there was no significant difference in the expression of BCMO1 protein between the two nutrition periods. Yak fat and other tissues can enrich a large amount of 尾 -carotene during the period of rich nutrition, in the season of vitamin A deficiency. The concentration of 尾 -carotene in fat of yak was related to 尾 -carotene degrading enzyme, except liver and pancreas. The activity of 尾 -carotene degrading enzyme in yak tissue was higher than that in nutrition-rich period, and 尾 -carotene -15 in most tissues of nutrition-rich period was analyzed from the level of gene and protein expression. The expression level of BCMO1 was lower than that in the period of nutritional deficiency. The metabolites of 尾 -carotene (retinoic acid, etc.) were analyzed from the feedback metabolic mechanism of 尾 -carotene. May have a feedback inhibition of beta-carotene -15. The expression of BCMO1.
【學(xué)位授予單位】：青海大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S823.85

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本文編號：1443790