檢測陰溝腸桿菌的數(shù)字PCR定量方法建立
本文關(guān)鍵詞:檢測陰溝腸桿菌的數(shù)字PCR定量方法建立 出處:《畜牧與獸醫(yī)》2016年03期 論文類型:期刊論文
更多相關(guān)文章: 陰溝腸桿菌 數(shù)字PCR(ddPCR) 實時定量PCR
【摘要】:以陰溝腸桿菌Amp C酶基因為靶基因,建立了可對其準確定量的數(shù)字PCR(dd PCR)方法。對dd PCR反應(yīng)中的探針濃度進行了優(yōu)化,并將該方法與實時熒光PCR方法做對比來檢測陰溝腸桿菌。結(jié)果表明,最終確定dd PCR反應(yīng)中的最佳探針濃度為400 nmol/L,該方法檢測陰溝腸桿菌的最低DNA拷貝數(shù)為8.9拷貝/μL,且重復(fù)性良好。表明數(shù)字PCR方法靈敏度高、特異性好,可用于陰溝腸桿菌的鑒定。
[Abstract]:An accurate and quantifiable digital PCR(dd PCR method was established using Enterobacter cloacae Amp C as target gene. The probe concentration in dd PCR reaction was optimized. The method was compared with the real-time fluorescence PCR method to detect Enterobacter cloacae. The results showed that the optimal probe concentration in dd PCR reaction was determined to be 400 nmol/L. The minimum copy number of DNA for the detection of Enterobacter cloacae was 8.9 copies / 渭 L, and the reproducibility of the method was good, which indicated that the digital PCR method had high sensitivity and specificity, and could be used for the identification of Enterobacter cloacae.
【作者單位】: 湖南出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心;湖南省桂陽縣畜牧獸醫(yī)水產(chǎn)局;
【基金】:湖南省科技基金項目(2014SK3082)
【分類號】:S852.61
【正文快照】: 陰溝腸桿菌(Enterobacter cloacae)屬腸桿菌科腸桿菌屬,廣泛分布于自然界中,普遍存在于人和動物的腸道中,是一種條件致病菌,在引起食源性疾病的同時也是醫(yī)院內(nèi)感染和機會感染的重要致病菌[1]。其引起的感染常累及多個系統(tǒng)器官,包括皮膚軟組織感染、泌尿道感染、呼吸道感染以及
【共引文獻】
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【二級參考文獻】
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,本文編號:1430952
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