表面展示豬流行性腹瀉病毒纖突蛋白S1的重組桿狀病毒及其免疫效果研究
發(fā)布時(shí)間:2017-12-22 22:04
本文關(guān)鍵詞:表面展示豬流行性腹瀉病毒纖突蛋白S1的重組桿狀病毒及其免疫效果研究 出處:《蠶業(yè)科學(xué)》2016年06期 論文類(lèi)型:期刊論文
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【摘要】:豬流行性腹瀉病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)纖突蛋白S1能夠介導(dǎo)宿主抵御PEDV感染的中和抗體的產(chǎn)生,是PEDV基因工程疫苗研究的重要靶抗原。將PEDV的S1基因克隆至桿狀病毒基因組中,構(gòu)建包含PEDV S1基因的重組桿狀病毒,使S1蛋白表面展示表達(dá)。以該重組病毒作為活載體疫苗皮下接種BALB/c小鼠,驗(yàn)證S1蛋白在重組桿狀病毒中的表達(dá)及其免疫原性。Western blotting分析被重組桿狀病毒感染的Sf9細(xì)胞中,PEDV S1蛋白能有效表達(dá)且呈現(xiàn)大小分別約120 k D和150 k D的2條帶,其中前者至少比預(yù)期大30 k D左右,推測(cè)重組S1蛋白在Sf9細(xì)胞中被高度糖基化修飾。重組桿狀病毒的膠體金免疫電子顯微鏡觀測(cè)結(jié)果顯示S1蛋白展示于桿狀病毒表面;間接ELISA試驗(yàn)結(jié)果證明重組桿狀病毒可以誘導(dǎo)產(chǎn)生PEDV特異性抗體,抗體效價(jià)達(dá)到1∶5 000。血清中和試驗(yàn)及淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)結(jié)果證明,該重組桿狀病毒能夠激發(fā)有效的體液免疫及細(xì)胞免疫反應(yīng),S1蛋白在重組桿狀病毒表面展示表達(dá)并具有免疫原性。
【作者單位】: 浙江理工大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;浙江省家蠶生物反應(yīng)器和生物醫(yī)藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:浙江省高校生物學(xué)重中之重學(xué)科開(kāi)發(fā)基金項(xiàng)目(No.116-10331251507)
【分類(lèi)號(hào)】:S852.65
【正文快照】: 豬感染豬流行性腹瀉病毒(porcine epidemic diar- rhea virus,PEDV)引起的腸道傳染性疫病的主要臨床表現(xiàn)為水樣腹瀉、脫水、嘔吐等,多發(fā)于冬季和早春季節(jié),各年齡段豬均易感染,其中仔豬感病的致死率高達(dá)80%~100%[1-2]。自20世紀(jì)70年代在英國(guó)和比利時(shí)報(bào)道豬流行性腹瀉(porcine
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本文編號(hào):1321206
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