發(fā)布時間：2017-12-18 20:38

  本文關鍵詞：豬融合抗菌肽基因雙質粒共轉化重組畢赤酵母菌的構建

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【摘要】：為構建高效表達的豬融合抗菌肽蛋白的重組酵母菌發(fā)酵表達體系,規(guī)�；a制備新型免疫分子防控動物傳染病,本試驗從實驗室先前構建的p GAPZαA-P質粒中克隆出已構建好的豬融合抗菌肽CAMPs基因片段。通過I nfusion技術,將C AMPs片段分別克隆入p PIC9K和p PICZαA真核表達質粒中,并通過P CR以及測序驗證,成功構建了p PIC9K-CAMPs和p PICZαA-CAMPs重組質粒。通過電轉化將線性化p PIC9K-CAMPs轉入畢赤酵母G S115基因組中,并篩選高拷貝菌株G S-PK-CAMPs。再將線性化p PICZαA-CAMPs轉入重組酵母G S-PK-CAMPs中,篩選出高拷貝菌株G S-PKZ-CAMPs。對重組酵母GS-PKZ-CAMPs進行誘導表達后作轉錄表達研究,檢測抗菌肽是否表達。最終結果顯示,成功獲得了G S-PKZ-CAMPs可誘導表達菌株,這給豬融合抗菌肽蛋白的大規(guī)模發(fā)酵制備和應用于動物傳染病的防治奠定了可靠的初步基礎。
【作者單位】： 四川大學生命科學學院生物資源與生態(tài)環(huán)境教育部重點實驗室動物疫病防控與食品安全四川省重點實驗室;
【分類號】：Q78;S859.797
【正文快照】： 抗菌肽作為宿主防御肽,是機體天然的免疫保護屏障,不但具有良好的抗菌活性,還具有很強的穩(wěn)定性與安全性[1],因具有獨特的抗菌機制,微生物對其產生耐藥性的概率極低[2]。國內外的研究結果表明,抗菌肽不但能夠顯著提高動物的抗病能力,有的還能促進動物生長[3]。因此,抗菌肽作為

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5 廖富，

本文編號：1305566