本文關(guān)鍵詞：中國荷斯坦奶牛衣原體多樣性研究

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【摘要】：衣原體(Chlamydia spp.)是一種專性細(xì)胞內(nèi)寄生,介于細(xì)菌和病毒之間的微生物。衣原體具有獨(dú)特的發(fā)育周期,分為元體和始體兩種不同形態(tài)。元體有感染性,無繁殖能力,直徑0.2-0.4μm；始體有繁殖能力,無感染性,直徑0.9-1.0 μm。衣原體科包括一個(gè)衣原體屬,下含11個(gè)衣原體種,包括肺炎衣原體(C. pneumoniae)、沙眼衣原體(C. trachomatis)、鸚鵡熱衣原體(C. psittaci)、豬衣原體(C. suis)、鼠衣原體(C. muridarum)、流產(chǎn)衣原體(C. abortus)、豚鼠衣原體(C. caviae)、貓衣原體(C.felis)、家畜衣原體(C. pecorum)、鳥衣原體(C. avium)和家禽衣原體(C. gallinacea)。衣原體能夠感染哺乳動(dòng)物、家禽和人類,大多數(shù)衣原體種具有較寬的宿主譜。肺炎衣原體、沙眼衣原體和鸚鵡熱衣原體是可以導(dǎo)致人類發(fā)病的重要衣原體。其中肺炎衣原體主要引起人和動(dòng)物的呼吸系統(tǒng)感染；沙眼衣原體主要引起人的泌尿生殖系統(tǒng)感染,還可以導(dǎo)致沙眼、結(jié)膜炎、嬰兒肺炎、淋巴肉芽腫；人感染鸚鵡熱衣原體時(shí)會(huì)出現(xiàn)類似流感和肺炎的癥狀,并伴隨著結(jié)膜炎和胃腸道疾病等,而間質(zhì)性肺炎可導(dǎo)致人的死亡。感染牛的衣原體種主要有鸚鵡熱衣原體、家畜衣原體、流產(chǎn)衣原體和豬衣原體；而感染奶牛的主要有鸚鵡熱衣原體、家畜衣原體和流產(chǎn)衣原體。研究證實(shí),奶牛感染衣原體引起的產(chǎn)奶量下降和奶產(chǎn)品質(zhì)量下降等可造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。中國關(guān)于牛衣原體的研究多數(shù)局限于血清學(xué)方面,而對(duì)于奶牛衣原體多樣性的系統(tǒng)研究較少,甚至有些研究認(rèn)為,牛衣原體病是單純地由鸚鵡熱衣原體感染所引起。為了對(duì)中國荷斯坦奶牛的衣原體多樣性進(jìn)行研究,本試驗(yàn)采用建立的FRET-qPCR方法,對(duì)來自11個(gè)省的1,450份中國荷斯坦奶牛和553份中國地方肉牛的血液樣品以及江蘇某奶牛場隨機(jī)選擇的108頭中國荷斯坦奶牛的陰道拭子、糞便、牛奶和血液樣品進(jìn)行衣原體的檢測(cè)和分型等研究。應(yīng)用FRET-qPCR方法對(duì)中國11個(gè)省的牛衣原體多樣性研究表明,衣原體的總陽性率為2.4% (48/2,003)。在1,450份中國荷斯坦奶牛血液樣品中,2.4%(35/1,450)為衣原體陽性,檢測(cè)到家禽衣原體、鸚鵡熱衣原體、家畜衣原體和肺炎衣原體,且存在鸚鵡熱衣原體和家畜衣原體的混合感染。陽性樣品中,鸚鵡熱衣原體占31.4%(11/35),肺炎衣原體占25.7% (9/35),家禽衣原體占22.9% (8/35),家畜衣原體占20.0% (7/35)。在采集的533份中國肉牛的血液樣品中,2.4%(13/533)為衣原體陽性,檢測(cè)到肺炎衣原體(84.7%,11/13)和家禽衣原體(15.3%,2/13)。在江蘇某奶牛場隨機(jī)選擇108頭奶牛進(jìn)行糞便、陰道拭子、牛奶、血液樣品采集并用FRET-qPCR方法進(jìn)行衣原體檢測(cè)和分型。結(jié)果表明,64.8%(70/108)的奶牛為衣原體陽性,檢測(cè)到4種衣原體,其中家畜衣原體是主導(dǎo)的衣原體種(75.7%,53/70),還包括家禽衣原體(47.1%,32/70),鸚鵡熱衣原體(10.0%,7/70)和肺炎衣原體(4.3%,3/70)。在70頭衣原體陽性奶牛中,68.6% (48/70)的奶牛檢測(cè)到1種衣原體,28.5% (20/70)檢測(cè)到2種衣原體,2.9% (2/70)中檢測(cè)到3種衣原體。在奶牛的四種樣品中,糞便的陽性率最高,為72.9%(51/70),主要為家畜衣原體(94.1%,48/51),且存在和鸚鵡熱衣原體的混合感染(5.9%,3/51)；陰道拭子樣品陽性率為38.6%(27/70),檢測(cè)到家禽衣原體(88.9%,24/27)、肺炎衣原體(7.4%,2/27)和家畜衣原體(3.7%,1/27)；牛奶樣品陽性率為11.4%(8/70),檢測(cè)到家禽衣原體(62.5%,5/8)和鸚鵡熱衣原體(37.5%,3/8);血液樣品陽性率最低,為8.6% (6/70),其中家禽衣原體占66.7% (4/6),而鸚鵡熱衣原體、家畜衣原體和肺炎衣原體各占16.7%(1/6)。本試驗(yàn)設(shè)計(jì)了針對(duì)不同衣原體ompA基因的種特異性PCR方法,進(jìn)一步研究衣原體的多態(tài)性。結(jié)果表明,江蘇某奶牛場畜群中家畜衣原體ompA基因的全序列具有高度的多態(tài)性,檢測(cè)到7個(gè)共6種不同的序列；不同的是,家禽衣原體和鸚鵡熱衣原體的ompA基因序列保守,其序列和從揚(yáng)州家禽中檢測(cè)到的這兩種衣原體的序列一致。綜上所述,通過本研究建立的高度特異、敏感的FRET-qPCR方法對(duì)中國11個(gè)省的中國荷斯坦奶牛、肉牛的血液樣品以及江蘇某奶牛場奶牛的陰道拭子、糞便、牛奶和血液樣品進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn),衣原體的陽性率較高且檢測(cè)到家畜衣原體、鸚鵡熱衣原體、肺炎衣原體和家禽衣原體。目前公認(rèn)家禽衣原體主要感染家禽,肺炎衣原體的主要宿主是人類；本研究首次報(bào)道家禽衣原體和肺炎衣原體是牛攜帶的主要衣原體種,拓寬了家禽衣原體和肺炎衣原體的宿主譜。基于ompA基因多樣性研究提示,牛是家畜衣原體的自然宿主,而牛攜帶的家禽衣原體和鸚鵡熱衣原體來源于家禽。本試驗(yàn)系統(tǒng)地研究了中國荷斯坦奶牛的衣原體多樣性,而衣原體感染對(duì)奶牛和肉牛的健康以及生產(chǎn)性能如產(chǎn)奶量、牛奶質(zhì)量和肉品質(zhì)量所產(chǎn)生的影響需進(jìn)一步探究。
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S858.23

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