發(fā)布時間：2017-12-01 13:25

  本文關(guān)鍵詞：牛結(jié)核病皮內(nèi)變態(tài)反應檢測抗原的篩選及應用研究

  更多相關(guān)文章： 牛結(jié)核病 重組抗原 皮試 診斷

【摘要】：牛結(jié)核病(Bovine tuberculosis)是一種由牛結(jié)核分支桿菌(Mycobacterium bovis)等引起的以呼吸道系統(tǒng)感染為主的人畜共患慢性消耗性傳染病。由于牛結(jié)核分支桿菌擁有廣泛的宿主,牛是最敏感的宿主之一,人們經(jīng)由未經(jīng)消毒的病牛奶就可被結(jié)核菌感染,而人結(jié)核病又可以傳染給牛,因此,人畜之間的交叉感染是造成結(jié)核病廣泛流行傳播的重要原因。這是國內(nèi)外迫切要解決的一個非常嚴重的公共安全問題。現(xiàn)階段,“檢疫—撲殺”是國內(nèi)外對于牛結(jié)核病防控的主要措施,及時準確地診斷牛結(jié)核病是防控牛結(jié)核病的重中之重。結(jié)核菌素試驗(Tuberculin test,TST)是OIE推薦使用的檢測牛結(jié)核病的方法,這種檢測方法是基于Ⅳ型變態(tài)反應的一種以結(jié)核菌素的純化蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)或舊結(jié)核菌素(OT)為抗原誘發(fā)遲發(fā)型細胞超敏反應的皮內(nèi)檢測方法。牛結(jié)核菌素(PPD-B)是由分支桿菌培養(yǎng)物滅活提純得到,生產(chǎn)過程需要牛分支桿菌強毒株,存在散毒危險,并與禽結(jié)核菌素(PPD-A)、環(huán)境中廣泛存在的分支桿菌、BCG存在共同抗原,再因其是多種蛋白、脂類和糖的混合物,定性定量困難,批次間的穩(wěn)定性難以保持,試驗中個體的免疫能力還會影響PPD的應答水平。當然,除結(jié)核菌素皮試以外還有,如抗體檢測法、IFN-γ體外釋放法等來診斷牛結(jié)核病,但這些方法的關(guān)鍵之一就是選擇最為靈敏的特異性反應抗原來輔助診斷。因此,用PPD來作為診斷抗原,其特異性較差,容易出現(xiàn)假陽性的診斷結(jié)果,并且牛分支桿菌感染機體過程中分泌多種抗原,使用單個抗原檢測靈敏度低,而重組牛分支桿菌特異性蛋白成份明確、易于質(zhì)控、特異性較高且無生物安全隱患等優(yōu)點。所以,為提高檢測的特異性,排除部分分支桿菌感染和BCG接種后的干擾,有必要開發(fā)特異性強的重組基因抗原。鑒于以上原因,本研究采用皮內(nèi)變態(tài)反應為基礎(chǔ)的實驗方法,用卡介苗(BCG)和新金分支桿菌、草分支桿菌、副結(jié)核分支桿菌等不同的分支桿菌來免疫豚鼠,用純化出的重組融合蛋白MPB70-64、MPB83-70-63-64、MPB83-70-ESAT6-CFP10、ESAT6-CFP10、MPB51-63和MPB63-64,以及PPD對54只免疫豚鼠誘發(fā)DTH反應,測量數(shù)值后進行差異性對比,篩選出MPB70-64、MPB83-70-63-64、MPB83-70-ESAT6-CFP10及ESAT6-CFP10四種特異性較高的重組融合蛋白,因MPB83-70-63-64與其他三種重組抗原對比,其具有更高的特異性,故應用MPB83-70-63-64作為反應原對212頭牛進行了皮內(nèi)變態(tài)反應檢測,并與PPD對比,顯示以MPB83-70-63-64作為皮內(nèi)變態(tài)反應檢測抗原,檢出的結(jié)核陽性牛和疑似陽性牛的頭數(shù)均低于PPD作為反應原檢出的頭數(shù),表明該抗原提高了牛結(jié)核檢測的特異性。因此,MPB83-70-63-64有望作為牛結(jié)核病變態(tài)反應檢測抗原,在牛結(jié)核病的防制中發(fā)揮作用。
【學位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S858.23

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李瓊璋;牛結(jié)核病的活體診斷[J];畜牧獸醫(yī)科技信息;2000年09期

2 史同瑞;牛結(jié)核病診斷技術(shù)[J];畜牧獸醫(yī)科技信息;2000年10期

3 賈志江;牛結(jié)核病群體檢疫中應注意的問題[J];貴州畜牧獸醫(yī);2001年05期

4 馬衛(wèi)平,張磊,徐國強;烏市牛結(jié)核病的檢疫防治[J];中國動物檢疫;2001年07期

5 郭海晏 ,龔寶泰 ,陳有文;海南地區(qū)牛結(jié)核病調(diào)查[J];中國獸醫(yī)科技;2002年03期

6 王孟華;牛結(jié)核病檢測及存在問題探討[J];福建畜牧獸醫(yī);2002年S1期

7 Mitchell A Essey ,郝俊峰 ,王傳武;美國牛結(jié)核病的狀況[J];中國畜牧獸醫(yī);2003年05期

8 劉增再,彭運潮,胡述光;牛結(jié)核病診斷研究進展[J];動物醫(yī)學進展;2005年05期

9 朝格達來;牛結(jié)核病的危害與防治[J];現(xiàn)代農(nóng)業(yè);2005年07期

10 胡杰,陸光濤;我國牛結(jié)核病的研究進展[J];畜牧獸醫(yī)科技信息;2005年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳煥春;郭愛珍;;國內(nèi)外牛結(jié)核病的防控歷史與現(xiàn)狀[A];中國畜牧獸醫(yī)學會2009學術(shù)年會論文集（上冊）[C];2009年

2 王孟華;;牛結(jié)核病檢測及存在問題探討[A];福建省科協(xié)第二屆學術(shù)年會衛(wèi)星會議動物傳染病防制與人類健康研討會論文集[C];2002年

3 劉思國;王春來;郭設(shè)平;張秀華;郭洋;邵美麗;宮強;;牛結(jié)核病病原生態(tài)學和流行病學研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)學分會暨中國免疫學會獸醫(yī)免疫分會第六次研討會論文集[C];2005年

4 王孟華;;牛結(jié)核病檢測及存在問題探討[A];福建省科協(xié)第二屆學術(shù)年會衛(wèi)星會議——動物傳染病防治與人類健康研討會論文集[C];2002年

5 林世祿;;乳牛結(jié)核病的防治措施[A];福建省科協(xié)第七屆學術(shù)年會分會場——“堅持科技創(chuàng)新，建設(shè)海西現(xiàn)代畜牧業(yè)”研討會論文集[C];2007年

6 趙德明;;牛結(jié)核病研究進展[A];第3屆全國人畜共患病學術(shù)研討會論文集[C];2011年

7 劉思國;王春來;郭設(shè)平;宮強;邵美麗;;牛結(jié)核病的研究進展[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會第六屆全國會員代表大會暨第11次學術(shù)研討會論文集[C];2005年

8 徐鳳宇;高云航;何昭陽;;ELISA檢測乳中牛結(jié)核抗體的研究[A];人畜共患傳染病防治研究新成果匯編[C];2004年

9 劉思國;宮強;王牟平;王春來;彭永剛;;牛結(jié)核病[A];人畜共患傳染病防治研究新成果匯編[C];2004年

10 劉思國;王春來;郭設(shè)平;宮強;邵美麗;;牛結(jié)核病的研究進展[A];第六屆全國會員代表大學暨第11次學術(shù)研討會論文集（下）[C];2005年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 王忠仁;控制人類結(jié)核 必先撲滅牛結(jié)核[N];健康報;2004年

2 中國動物疫病預防控制中心;怎樣防控牛結(jié)核病[N];農(nóng)民日報;2007年

3 喬志;牛結(jié)核病的防治[N];農(nóng)民日報;2005年

4 朱建國;必須高度重視我國動物結(jié)核病防制[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2005年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 徐賢坤;水牛γ-干擾素單克隆抗體制備及水牛結(jié)核病夾心ELISA檢測方法的初步建立[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2009年

2 宮強;牛結(jié)核病DNA疫苗的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2007年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 康奕;以基因為靶標的膠體金免疫層析法檢測牛結(jié)核病[D];吉林農(nóng)業(yè)大學;2016年

2 石慧;牛結(jié)核病皮內(nèi)變態(tài)反應檢測抗原的篩選及應用研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學;2016年

3 杜艷芬;牛結(jié)核病病原學調(diào)查及分子流行病學研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2009年

4 陳江;牛結(jié)核病γ-干擾素診斷方法的優(yōu)化與應用[D];湖南農(nóng)業(yè)大學;2009年

5 欽博;牛結(jié)核病膠乳凝集方法的建立以及臨床的初步應用[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2006年

6 張桂榮;牛結(jié)核病特異抗體間接ELISA檢測方法的建立及初步應用[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2006年

7 張書環(huán);牛結(jié)核病膠體金免疫層析方法的建立與初步運用[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2007年

8 李樹春;牛結(jié)核病流行病學調(diào)查和診斷[D];新疆農(nóng)業(yè)大學;2010年

9 徐鳳宇;ELISA檢測乳中結(jié)核抗體的研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學;2002年

10 邴睿;我國牛結(jié)核病血清學篩查及其病原的分離鑒定[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學;2013年

，

本文編號：1241270