本文關(guān)鍵詞：熒光定量RT-PCR檢測PRRSV方法的建立及初步應(yīng)用

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【摘要】：以豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)ORF5保守區(qū)域為靶基因,基于SYBR Green構(gòu)建了以RNA為模板、反轉(zhuǎn)錄和PCR擴增一步完成的熒光定量RT-PCR(qRT-PCR)方法。該方法對質(zhì)粒和細胞培養(yǎng)物中病毒的檢測限分別為1×100copies/μL和1×10-2TCID50/m L;組內(nèi)和組間差異系數(shù)(CV)均小于5%。利用本方法檢測126份臨床組織樣品,PRRSV陽性率為42.06%,與傳統(tǒng)RT-PCR檢測結(jié)果具有較好的一致性(Kappa=0.918),且敏感性顯著高于傳統(tǒng)RT-PCR。本研究建立的qRT-PCR方法為豬繁殖與呼吸綜合征的臨床診斷提供了技術(shù)手段。
【作者單位】： 浙江農(nóng)林大學動物科技學院;浙江農(nóng)林大學動物健康檢測中心;
【基金】：中國博士后科學基金(2012M521187) 浙江省公益性研究農(nóng)業(yè)項目(2014C32061) 浙江省新苗人才項目(2014R412002) 浙江農(nóng)林大學創(chuàng)新訓練項目(201301002);浙江農(nóng)林大學科研人才啟動項目(2013FR076)
【分類號】：S852.65
【正文快照】： 豬繁殖與呼吸綜合征(porcine reproductive andrespiratory syndrome,PRRS)是全世界范圍內(nèi)的高度接觸性病毒性傳染病,嚴重影響?zhàn)B豬行業(yè)健康發(fā)展,被OIE列為必須通報的動物疫病。該病在1987年首次發(fā)現(xiàn)于美國和歐洲,隨后日本等亞洲國家亦陸續(xù)報道該病[1-4]。我國PRRS首發(fā)被報道發(fā)

【相似文獻】

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1 郭川;吳國平;鄭忠輝;蘇文金;曹敏杰;;豬繁殖和呼吸綜合征病毒福建毒株ORF5的序列分析及原核表達[J];廈門大學學報(自然科學版);2006年01期

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本文編號：1223048