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熒光定量RT-PCR檢測PRRSV方法的建立及初步應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2017-11-24 17:27

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【摘要】:以豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)ORF5保守區(qū)域?yàn)榘谢?基于SYBR Green構(gòu)建了以RNA為模板、反轉(zhuǎn)錄和PCR擴(kuò)增一步完成的熒光定量RT-PCR(qRT-PCR)方法。該方法對質(zhì)粒和細(xì)胞培養(yǎng)物中病毒的檢測限分別為1×100copies/μL和1×10-2TCID50/m L;組內(nèi)和組間差異系數(shù)(CV)均小于5%。利用本方法檢測126份臨床組織樣品,PRRSV陽性率為42.06%,與傳統(tǒng)RT-PCR檢測結(jié)果具有較好的一致性(Kappa=0.918),且敏感性顯著高于傳統(tǒng)RT-PCR。本研究建立的qRT-PCR方法為豬繁殖與呼吸綜合征的臨床診斷提供了技術(shù)手段。
【作者單位】: 浙江農(nóng)林大學(xué)動物科技學(xué)院;浙江農(nóng)林大學(xué)動物健康檢測中心;
【基金】:中國博士后科學(xué)基金(2012M521187) 浙江省公益性研究農(nóng)業(yè)項(xiàng)目(2014C32061) 浙江省新苗人才項(xiàng)目(2014R412002) 浙江農(nóng)林大學(xué)創(chuàng)新訓(xùn)練項(xiàng)目(201301002);浙江農(nóng)林大學(xué)科研人才啟動項(xiàng)目(2013FR076)
【分類號】:S852.65
【正文快照】: 豬繁殖與呼吸綜合征(porcine reproductive andrespiratory syndrome,PRRS)是全世界范圍內(nèi)的高度接觸性病毒性傳染病,嚴(yán)重影響?zhàn)B豬行業(yè)健康發(fā)展,被OIE列為必須通報(bào)的動物疫病。該病在1987年首次發(fā)現(xiàn)于美國和歐洲,隨后日本等亞洲國家亦陸續(xù)報(bào)道該病[1-4]。我國PRRS首發(fā)被報(bào)道發(fā)

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 郭川;吳國平;鄭忠輝;蘇文金;曹敏杰;;豬繁殖和呼吸綜合征病毒福建毒株ORF5的序列分析及原核表達(dá)[J];廈門大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2006年01期



本文編號:1223048

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