本文關鍵詞：H3N2亞型豬流感病毒致病性試驗及其反向遺傳操作系統(tǒng)的構(gòu)建

  更多相關文章： 豬流感病毒 致病性 反向遺傳學 病毒拯救 嵌合病毒

【摘要】：豬擁有兩種唾液酸受體(SAα-2,3-Gal和SAα-2,6-Gal),使其可以被人或禽流感病毒感染,因此被看作產(chǎn)生重組病毒的“混合容器”。2009年H1N1亞型流感病毒(pdm/09)大暴發(fā),引起人類流感大流行,并引入到豬群中,目前,豬群中出現(xiàn)多種形式重組的豬流感病毒(Swine Influenza Virus, SIV)。因此,加強對SIV的監(jiān)控并了解其生物學特性對于防控人流感暴發(fā)具有重要的公共衛(wèi)生意義。為了闡明新型重組H3N2亞型SIVs對豬的致病性,本研究選用攜帶pdm09病毒的內(nèi)部基因(PB2、PB1、PA、NP和M)和季節(jié)性人流感病毒的表面基因(HA和NA)獲得的兩株H3N2亞型SIVs,即A/Swine/Guangxi /NNXD/2013和A/Swine/Guangxi/JG1/2014(分別簡稱為NNXD和JG1),分別通過氣管接種途徑感染10只仔豬,每組4只,陰性對照2只。感染結(jié)果發(fā)現(xiàn)在感染后3天和5天的鼻拭子中均能檢測到病毒,說明感染流感病毒后豬可以通過鼻腔進行排毒。3 dpi和5 dpi剖殺發(fā)現(xiàn),兩組病毒都能在肺臟中復制,其中JG1組肺組織和肺洗液中的病毒含量更高(肺組織可達104PFU/mL,肺洗液中可達104.91PFU/mL),肺部病變方面,肺泡結(jié)構(gòu)破壞更嚴重,炎性反應更明顯。為了探索NS基因在引起豬致病性差異方面的作用,本實驗通過RT-PCR技術(shù)分別對NNXD株的8個基因片段及JG1株的NS片段進行了特異性擴增,再經(jīng)過一系列克隆技術(shù),將這些片段分別連接至pHW2000雙向表達載體上,成功構(gòu)建了具有感染性的重組質(zhì)粒。然后通過細胞轉(zhuǎn)染技術(shù),將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到293T和MDCK共培養(yǎng)細胞中,以期拯救出rgNNXD和rgNNXD-JG1/NS。
【學位授予單位】：廣西大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S852.65

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;人和豬流感病毒在豬體內(nèi)重排現(xiàn)象增加[J];江西飼料;2009年04期

2 巴雅爾;;是豬惹的禍嗎[J];大科技(科學之謎);2009年07期

3 鄭杰,趙樸;豬流感病毒在自然感染豬中定植區(qū)域的研究[J];上海畜牧獸醫(yī)通訊;2003年05期

4 吳華;郭萬柱;;豬流感病毒分子生物學研究進展[J];中國預防獸醫(yī)學報;2006年02期

5 陳紅軍;侯義宏;白華;陳桂來;吳時友;尹燕博;錢永華;田振宇;;豬流感病毒分型基因芯片的建立和初步應用[J];畜牧獸醫(yī)學報;2007年07期

6 ;美國研究人員在新的豬流感病毒中發(fā)現(xiàn)禽流感基因[J];中國動物保健;2008年03期

7 趙中興;范鋒;周慶新;崔紅平;畢鄒生;毛愛民;楊芝芬;;無錫地區(qū)豬流感病毒的分離與鑒定[J];畜牧與獸醫(yī);2008年02期

8 溫納相;吳德銘;宋延華;周美華;黃星強;梁紅虎;;豬流感病毒的分離與鑒定[J];動物醫(yī)學進展;2008年04期

9 呂翠;馬小明;尹燕博;單虎;;豬流感病毒研究進展[J];動物醫(yī)學進展;2008年11期

10 ;豬流感病毒與人感染豬流感病毒[J];疑難病雜志;2009年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉業(yè)兵;陳堅;;豬流感疫苗研究進展[A];首屆中國獸藥大會——獸醫(yī)生物制品學、獸醫(yī)微生物學學術(shù)論壇論文集（2008）[C];2008年

2 劉華雷;王志亮;呂艷;黃偉堅;鄢明華;張維;李明義;王清華;李金明;鄭東霞;趙云玲;孫承英;;應用焦磷酸測序技術(shù)檢測豬流感病毒金剛烷胺耐藥性的分子標簽[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會第七屆全國會員代表大會暨第十三次學術(shù)研討會論文集（上冊）[C];2009年

3 余華;劉丹;嚴玉寶;胡娟;;豬流感病毒分子生物學研究[A];2009年中國藥學大會暨第九屆中國藥師周論文集[C];2009年

4 余華;;豬流感病毒分子生物學研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會獸醫(yī)公共衛(wèi)生學分會第二次學術(shù)研討會論文集[C];2010年

5 余華;劉丹;嚴玉寶;胡娟;;豬流感病毒分子生物學研究[A];2010年中國藥學大會暨第十屆中國藥師周論文集[C];2010年

6 余華;;豬流感病毒分子生物學研究進展[A];中國畜牧獸醫(yī)學會食品衛(wèi)生學分會第十一次學術(shù)研討會論文集[C];2010年

7 程玨益;廖明;任濤;羅開健;辛朝安;;豬流感病毒的分離和鑒定[A];豬的重要傳染病防治研究新成果——中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會第五屆理事會第二次全體會議暨防檢疫專業(yè)委員會第7次學術(shù)交流會論文集[C];2002年

8 孫泉云;張?zhí)K華;;豬流感診斷學研究進展[A];豬的重要傳染病防治研究新成果——中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會第五屆理事會第二次全體會議暨防檢疫專業(yè)委員會第7次學術(shù)交流會論文集[C];2002年

9 呂銘凡;;豬流感的種間傳播與防控要點[A];豬的重要傳染病防治研究新成果——中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會第五屆理事會第二次全體會議暨防檢疫專業(yè)委員會第7次學術(shù)交流會論文集[C];2002年

10 鄭杰;盧中華;尹鳳閣;楊霞;張紅英;;抗豬流感病毒(河南株)單克隆抗體雜交瘤細胞株的建立[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會成立20周年慶典暨第十次學術(shù)研討會論文集（上）[C];2003年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 記者 張?zhí)K民;我省著手制訂應急預案防控豬流感[N];海南日報;2009年

2 記者 張浩;俄羅斯采取措施嚴防豬流感[N];科技日報;2009年

3 記者 張忠霞;世衛(wèi)組織解答豬流感八大疑問[N];新華每日電訊;2009年

4 商報記者 王漪;尚無證據(jù)表明豬流感可通過食物傳播[N];北京商報;2009年

5 本報駐布魯塞爾記者 李力;歐盟呼吁冷靜應對豬流感[N];光明日報;2009年

6 郭松民;防控豬流感,應以“非典”為鏡鑒[N];檢察日報;2009年

7 本報記者 項錚;中醫(yī)藥將在豬流感防控中發(fā)揮優(yōu)勢[N];科技日報;2009年

8 本報記者 崔寅　廖政軍 張慧中 于青 左婭;全球防范豬流感[N];人民日報;2009年

9 李天揚;如何應對豬流感的“全球警報”[N];人民日報;2009年

10 ;全球攜手防控豬流感[N];人民日報;2009年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫翔翔;廣西犬H9N2和類禽型H1N1豬流感病毒的遺傳進化分析及對小鼠致病性的研究[D];廣西大學;2015年

2 祁賢;我國部分地區(qū)豬流感病毒分子流行病學及致病性研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2006年

3 黨源;新城疫病毒單感染及豬流感病毒與豬鏈球菌共感染差異蛋白組學分析[D];吉林大學;2013年

4 于海;中國部分地區(qū)豬流感病毒的分子流行病學研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2008年

5 李國新;分子佐劑C3d增強豬流感病毒HA-DNA疫苗免疫原性的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2008年

6 王錦祥;H1N1和H3N2亞型豬流感病毒的拯救及其致病基因的分析[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2012年

7 許傳田;H1N2、H3N2及H5N1亞型豬流感病毒進化及致病性研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2008年

8 沈陽;豬流感病毒感染細胞的p53蛋白變化及生物學活性分析[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2009年

9 張博;H1N1亞型豬流感病毒分離鑒定、鑒別診斷及M2e重組質(zhì)粒免疫效力研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2011年

10 鄭寶亮;表達H3N2亞型豬流感病毒HA的重組偽狂犬病病毒免疫效力的評價[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2006年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 汪秀會;古典H1N1亞型豬流感病毒PB2 K627E突變對病毒復制能力的影響[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2015年

2 李雪嬌;吉林省豬流感病毒的分離鑒定及分離株HA、NA基因序列分析[D];吉林農(nóng)業(yè)大學;2015年

3 魏春娜;苦參主要成分體外抗H3N2亞型豬流感病毒作用及其機制研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2015年

4 殷斌;兩株H1N1亞型豬流感病毒的分離鑒定及遺傳演化分析[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2015年

5 陶世宇;4株歐亞類禽H1N1亞型豬流感病毒生物學特性研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學;2016年

6 楊威;表面展示豬流感病毒NS1乳酸菌pSIP409-pgsA-NS1的制備及其免疫作用的研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學;2016年

7 宮曉倩;新型PA-X蛋白及PB2-627位氨基酸對豬流感病毒復制和致病能力的影響[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2016年

8 楊文娟;H3N2亞型豬流感病毒致病性試驗及其反向遺傳操作系統(tǒng)的構(gòu)建[D];廣西大學;2016年

9 張榮升;豬流感病毒NASBA-ELISA檢測方法的建立[D];天津農(nóng)學院;2012年

10 楊溢;抗豬流感病毒單味中藥的體外篩選[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2013年

，

本文編號：1187610